ショウジョウバエのトランスジェネシスは、生物レベルでの遺伝子機能の研究に不可欠です。胚マイクロインジェクションは、トランスジェニックフライの構築にとって重要なステップです。ここでは、ショウジョウバエにおけるphiC31インテグラーゼ媒介性トランスジェネシスを例に、ショウジョウバエにおけるトランスジェネシスのための胚マイクロインジェクションの詳細なプロトコールを紹介します。
先端がグラインダーで面取りされた注射針は、通常、詰まったり、大きな細胞質漏れを引き起こしたりすることはありません。しかし、研削工程では、研削液が針の斜めの先端に入ることがあり、先端内の研削液はすぐには自然に乾きません。私たちのプロトコルでは、圧力計付きのフットエアポンプを使用して、針の先端を研削しながら針に空気圧を加えます。
これにより、粉砕液が吸い上げられるのを防ぎ、研磨液が面取りされた先端に入るのを防ぎ、面取りされた針をすぐに使用できるようになります。