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Method Article
Miedo condicionado se puede disminuir a través de un proceso inhibidor llama extinción, pero pueden resurgir en condiciones tales como el paso del tiempo o la exposición al estrés. Nuestro protocolo presenta una forma novedosa de prevenir la recuperación miedo por la introducción de la extinción durante la ventana de reconsolidación (la fase de re-almacenamiento de una memoria reactivado).
El miedo es desadaptativa cuando persiste mucho después de que las circunstancias han convertido a salvo. Por tanto, es crucial desarrollar un enfoque que constantemente impide el retorno del miedo. Pavlovianos acondicionado miedo paradigmas son comúnmente empleadas para crear una asociación controlada, el miedo novela en el laboratorio. Después de emparejar un estímulo inocuo (estímulo condicionado, CS) con un resultado aversivo (estímulo no condicionado, EE.UU.) que pueden provocar una respuesta de miedo (respuesta condicionada, o CR) presentando simplemente el estímulo solo 1,2. Una vez que el miedo es adquirida, puede ser disminuida mediante entrenamiento de extinción, por lo que el estímulo condicionado se presenta repetidamente sin la consecuencia aversiva hasta que el miedo ya no se expresa 3. Este aprendizaje inhibitorio crea una nueva representación, seguro para el CS, que compite para la expresión del miedo 4 memoria original. Aunque la extinción es eficaz en la inhibición de miedo, no es permanente. El miedo puede espontáneamenterecuperar con el paso del tiempo. La exposición al estrés o regreso al contexto de la educación inicial también puede causar miedo a resurgir 3,4.
Nuestro protocolo se refiere a la naturaleza transitoria de la extinción por la orientación de la ventana de reconsolidación de modificar la memoria emocional de una manera más permanente. Amplia evidencia sugiere que la reactivación de una memoria consolidada se vuelve a un estado lábil, durante el cual la memoria es más, susceptibles de interferencia 5-9. Esta ventana de oportunidad para abrir aparece poco después de la reactivación y cerca de aproximadamente 6 horas más tarde 5,11,16, aunque esto puede variar dependiendo de la fuerza y la edad de la memoria 15. Al permitir que la nueva información a incorporar en la huella de memoria original, esta memoria puede ser actualizado ya que reconsolida 10,11. Los estudios que implican animales no humanos han bloqueado con éxito la expresión del miedo memoria mediante la introducción de las manipulaciones farmacológicas dentro de la reventana de consolidación, sin embargo, la mayoría de los agentes utilizados son tóxicos para los seres humanos o mostrar efectos ambiguos cuando se utiliza en estudios en humanos 12-14. Nuestro protocolo aborda estos desafíos ofreciendo una solución eficaz, todavía no invasiva, la manipulación de comportamiento que es seguro para los humanos.
Por provocando temor recuperación de memoria antes de extinción, esencialmente en marcha el proceso de reconsolidación, permitiendo que nueva información de seguridad (es decir, la extinción) para ser incorporado, mientras que el recuerdo del miedo sigue siendo susceptible a las interferencias. Un estudio reciente utilizando esta manipulación del comportamiento en ratas ha logrado bloquear la memoria del miedo usando estos parámetros temporales 11. Otros estudios en humanos han demostrado que la introducción de nueva información después de la recuperación de los previamente consolidado motor 16, 17 episódica o declarativa recuerdos 18 conduce a la interferencia con la traza original de la memoria 14. A continuación se indican una pro novelaprotocolo utilizado para bloquear la recuperación miedo en los seres humanos.
Visión de conjunto
El estudio se describe en este protocolo se llevó a cabo durante tres días consecutivos, con un diseño entre sujetos de los tres grupos experimentales. El día 1, todos los sujetos se someten condicionamiento del miedo, donde aprenden a discriminar entre dos señales, una que predice un choque y otro que no lo hace. En el día 2, todos los sujetos se someten a entrenamiento de extinción, pero difieren con respecto a lo que sucede de antemano: Dos grupos reciben una señal de recordatorio para reactivar la memoria de miedo antes de entrenamiento de extinción, mientras que un tercer grupo no recibe ninguna señal tal. Un grupo recibe la señal recordatorio 10 min antes de la extinción, por lo que se someten a la extinción, mientras que la memoria del miedo se reconsolidar. El otro grupo recibe la señal recordatorio 6 h antes de la extinción, por lo tanto se someten a la extinción después de esta ventana presumiblemente ha cerrado. El tercer grupo no recibe ninguna señal recordatorio antes de someterse a la extinción, por lo que una formación extinción estándar. En el Día 3, todos los sujetos rEEncienda para otra sesión de extinción. Su nivel de miedo cuando se ven por primera vez la señal acondicionado en el día 3 indica si el recuerdo del miedo permanece. Todos los tres días se llevó a cabo en la misma configuración experimental, que es un sonido atenuado, con control de temperatura ambiente. Los estímulos condicionados son cuadrados de colores presentados en una pantalla de ordenador. Nos inducir y medir el miedo con una descarga eléctrica leve y conductancia de la piel, respectivamente, utilizando un módulo de sistema Biopac (ver Tabla 1). Una computadora de escritorio se utiliza para ejecutar el programa de software Acqknowledge que permite el registro y seguimiento de la resolución, mientras que un equipo independiente se utiliza para ejecutar y presentar la escritura experimental con el tema. Los sujetos se someten a las tres etapas a la misma hora del día.
1. El miedo de Evaluación con la respuesta conductancia de la piel (SCR) - Aplicación de electrodos y grabación
2. El miedo de inducción con estimulación leve descarga eléctrica - Aplicación de electrodos y procedimiento de elaboración
3. Día 1 - Adquisición
4. Día 2 - Formación Reactivación y Extinción
Desglose Asunto:
Dividir aleatoriamente todos los sujetos que han demostrado adquisición adecuada de miedo de día 1 (ver criterios de exclusión abajo) en tres grupos:
Grupo 1 (reactivación-10 min): recibe entrenamiento de extinción 10 minutos después de la recuperación dentro de la ventana de reconsolidación
Grupo2 (reactivación-6 hr): recibe entrenamiento de extinción 6 horas después de la recuperación fuera de la ventana de reconsolidación
Grupo 3 (no-reactivación): recibe entrenamiento de extinción estándar sin ningún tipo de recuperación
5. Día 3 - Ensayo de recuperación espontánea Miedo
6. Pre-procesamiento de datos y tablaturas SCR
Sincronización
Día 1
Preparación: 5-7 minutos
Guión de adquisición: ≈ 9 min
Total: 15 min
Día 2
Preparación: 5-7 minutos
Guión Reactivación: ≈ 30 segundos
Break: 10 min
Script Extinción: ≈ 5,5 min
Total: 20 min
Día 3
Preparación: 5-7 minutos
Re-Extinción Guión: ≈ 6,5 min
Total: 15 min
7. Resultados representativos de cada grupo
Al final del día 1 (adquisición), los sujetos deben demostrar diferencial SCR a los CSs, es decir, mayor respuesta a la CS + como en comparación con el CS-(véase la figura 4, la adquisición, para un ejemplo de los sujetos individuales). Al final del día 2 (reactivación / extinción), esta respuesta diferencial debe disminuir, de modo que ya no hay una diferencia entre CS + y CS-(véase la figura 4, la extinción, para un ejemplo de los sujetos individuales). Al examinar la recuperación espontánea en el día 3, esperaríamos ver una falta de recuperación de miedo en el grupo de reactivación-10 mindesde este grupo recibieron entrenamiento de extinción dentro de la ventana de reconsolidación, permitiendo así que la huella de memoria original a reconsolidar con esta nueva información de seguridad, y la prevención de la recuperación de las respuestas al miedo (véase la Figura 4, panel superior, para un ejemplo de un sujeto individual). Nosotros esperamos ver una recuperación sustancial de miedo, sin embargo, para los símbolos + CS (no EC-) en el grupo de reactivación-6 hr que recibió entrenamiento de extinción fuera de la ventana de reconsolidación (véase la Figura 4, panel central, para un ejemplo de un individuo sujeto), así como el grupo sin reactivación que recibieron entrenamiento de extinción estándar (ver Figura 4, panel inferior, para un ejemplo de un sujeto individual).
Figura 1. Ejemplo de SCR durante electrodo configurado. Las flechas negras, verticales indican el punto en el que sujeto fue instruido para tomaruna respiración profunda que dio lugar a un notable aumento de SCR. Haga clic aquí para ampliar la cifra .
Figura 2. Ejemplo de SCR durante el choque procedimiento de tratamiento. Negro flechas verticales indican el punto en el que se administró una descarga. Flechas grises indican el pico de aumento de la conductancia de la piel en respuesta a la shock. Haga clic aquí para ampliar la cifra .
Figura 3 Ejemplo de la respuesta condicionada (RC) para el inicio de la CS +, seguido de una mayor respuesta incondicionada (RI) para la entrega de choque (EE.UU.);. Juicio posterior es la de un CS-. Flechas grises indican el inicio y el desplazamiento CS, indic flechas negrocomió la entrega de los EE.UU.. Haga clic aquí para ampliar la cifra .
Figura 4 Ejemplo de recuperación de adquisición, extinción y espontánea en un sujeto individual de cada condición experimental (parte superior del panel: reactivación-10 min, panel central: la reactivación-6 hr; panel inferior: no reactivación)..
Tabla 1. Tabla de productos y equipo pertinentes.
Tabla 2. Reconsolidación protocolo y línea de tiempo.
Tabla 3. Un ejemplo de la orden de ensayo para cada fase de laexperimento. Tenga en cuenta un adicional CS-debe añadirse a día 2,2 (extinción) en ambos grupos de recordatorio con el fin de dar cuenta de la reactivación del + CS. La primera CS-ensayo en el día 3 (denotado con fondo gris) se tiene en cuenta debido a la respuesta de orientación al comienzo de la sesión.
Experimental Configurar
La configuración incluye un PC con E-prime, un Mac con reconocer, un sistema Biopac MP100, y una caja sorpresa. En la línea de código está programado en la secuencia de comandos de E-prime para comunicarse con el software de Reconocimiento y la caja de choque. Esto permite a E-prime para enviar señales al Reconocer que denota inicios de eventos, y las señales a la caja de choque para desencadenar la administración de shock. La salida de E-prime se envía a través de un puerto de impresora en el sistema Biopac, que a su vez envía la señal de evento a la fisiología de grabación con Mac Reconocer través de una conexión USB proporcionado con el sistema Biopac, así como a la caja de choque (véase Tabla 1 para productosducto de la información).
Criterios de exclusión
Los sujetos deben ser excluidos antes de completar todas las sesiones experimentales o de análisis de datos, si demuestran cualquiera de los siguientes:
El protocolo que aquí se presenta permite crear una respuesta simple miedo condicionado a un estímulo neutro se combina con un resultado adverso. Un día más tarde, reactivado la memoria del miedo con el fin de provocar su reconsolidación. Durante esta etapa se induce interferencias en forma de entrenamiento de extinción. Para verificar que la extinción afecta a la reconsolidación se utilizaron dos grupos de control. Uno de los grupos se sometieron a extinción sin la reconsolidación ensayo recordatorio de dispa...
No hay conflictos de interés declarado.
Damos las gracias a D. Johnson y K. Doelling para asistencia para la recopilación de datos. También damos las gracias M.-H. Monfils, J. LeDoux, Niv Y. y M. Milad para el asesoramiento sobre los protocolos experimentales. Este estudio fue financiado por la Fundación James S. McDonnell y los Institutos Nacionales de Salud (NIH) de subvención R21 MH072279 (EAP), subvenciones NIH R37 MH038774, P50 MH058911, RO1 MH046516 y MH067048 K05 (JEL), becas postdoctorales NSERC, CIHR y AHFMR (M.-HM), y una beca Fulbright y premios Blavatnik (DS).
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