Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
Şartlanmış korku yok denilen bir inhibitör sürecinde azalmış, ancak zaman ya da strese maruz geçişi gibi koşullar altında yeniden su yüzüne olabilir olabilir. Bizim protokol reconsolidation pencerede (bir yeniden bellek yeniden depolama faz) sırasında nesli getirerek korku düzelmesini engelleyen yeni bir yol sunuyor.
Bu koşullar güvenli hale süre sonra da ortadan kalkmaz Korku maladaptive. O ısrarla korku dönüşü engelleyen bir yaklaşım geliştirilmesi bu nedenle çok önemlidir. Pavlov korku-condition paradigmalar yaygın laboratuar kontrollü bir roman, korku ilişkilendirmesi oluşturmak için istihdam edilmektedir. Caydırıcı bir sonuç (koşulsuz uyaran, ABD) ile zararsız bir uyaran (şartlı uyarıcı, CS) eşleştirdikten sonra biz yalnız 1,2 sadece uyaran sunarak bir korku tepkisi (koşullanmış bir yanıttır, veya CR) temin edebilirsiniz. Korku kazanılmış sonra korkum artık 3 dile kadar şartlı uyarıcı defalarca caydırıcı sonuç olmadan sunulmaktadır sayede, o nesli eğitim kullanılarak azalmış olabilir. Bu inhibitör öğrenme orijinal korku bellek 4 ifadesi için yarışan CS için yeni, güvenli temsilini oluşturur. Nesli inhibe korku etkili olsa da, kalıcı değildir. Korku kendiliğinden yapabilirsinizZamanın geçişi ile iyileşir. Stres veya ilk öğrenme bağlamında dönen maruz kalmak da yeniden su yüzüne 3,4 korku neden olabilir.
Bizim protokol daha kalıcı bir şekilde duygusal bellek modifiye reconsolidation pencere hedefleyerek tükenme geçici doğası adresleri. Geniş kanıtlar konsolide bellek reaktive hafıza tekrar girişime 5-9 açıktır sırasında, labil bir duruma döndürür düşündürmektedir. Bu bellek 15 gücü ve yaşına bağlı olarak değişebilir ancak bu fırsat penceresinden, reaktivasyonu kısa bir süre sonra açın ve sonra 5,11,16 yaklaşık 6hrs kapatmak için görünür. O 10,11 reconsolidates gibi yeni bilgiler orijinal bellek izi içine dahil etmek için izin vererek, bu bellek güncellenebilir. İnsan olmayan hayvanlar ile ilgili çalışmalar başarıyla yeniden içinde farmakolojik manipülasyonlar getirerek korku bellek ifadesi engelledinizbirleştirme pencere Bununla birlikte, ikinci en ajanlar ya da insanlar için toksik olan veya insan çalışmaları 12-14 kullanıldığı zaman müphem etkiler göstermektedir. Bizim protokol etkili sunarak bu zorlukları ele, henüz insanlar için güvenli non-invaziv, davranışsal manipülasyon olduğunu.
Öncesinde tükenmeye korku bellekten geri çağırma sormadan, biz aslında korku hatırası hâlâ girişime maruz iken yeni güvenlik bilgileri (örneğin, sönme) dahil olmasını sağlayan, reconsolidation süreci başlatabilir. Sıçanlarda bu davranışsal manipülasyon kullanan yeni bir çalışma başarıyla bu zamansal parametreleri 11 kullanarak korku bellek engelledi. İnsanlarda Ek çalışmalar daha önceden konsolide motoru 16, epizodik 17 veya bildirimsel 18 anıların alma sonra yeni bilgilerin sunulması orijinal bellek iz 14 ile girişime yol açtığını göstermiştir. Biz bir roman yanlısı aşağıda ana hatlarıylatokol insanlarda korku kurtarma engellemek için kullanılır.
Genel bakış
Bu protokolde tarif çalışmada üç deney grupları arasındaki-konu tasarımı ile, üç ardışık gün içinde yapılır. 1. gün, tüm denekler değil bir şok ve başka tahmin iki kuyrukları, biri arasında ayrım öğrenmek korku klima, tabi. Günde 2, tüm deneklerin tükenme eğitimden geçmesi, ama ne önceden olur ilişkin farklıdır: İki grup üçüncü bir grup böyle bir işaret alır ise nesli eğitim öncesi korku belleği etkinleştirmek için bir hatırlatıcı ipucu alabilirsiniz. Korku bellek reconsolidating iken bir grup tükenme önce hatırlatıcı ipucu 10 dakika alır, böylece onlar yok tabi. Bu pencere muhtemelen kapadıktan sonra diğer grup nesli öncesinde hatırlatma ipucu 6 saat alır, bu nedenle yok tabi. Üçüncü grup yok geçmeden önce, hiçbir hatırlatma ipucu alır, böylece standart nesli eğitime tabi tutulurlar. 3. Gün, tüm konular rBaşka yok oturum için eturn. Onlar Gün 3 Klimalı isteka ilk görmek korku Onların seviyesi korku hafıza kaldığını belirtir. Her üç günde bir ses-zayıflatılmış, sıcaklık kontrollü oda aynı deney ayarı yapılmaktadır. Klimalı uyaranlara bilgisayar ekranında renkli kareler vardır. Biz Biopac sistem modülü (bkz. Tablo 1) kullanılarak, sırasıyla, hafif bir elektrik çarpması ve deri iletkenliği ile korku neden ve ölçün. Bir masaüstü bilgisayar ayrı bir bilgisayar konuya deneysel komut dosyasını çalıştırmak ve sunmak için kullanılan ederken SCR kayıt ve izleme sağlar AcqKnowledge yazılım programı çalıştırmak için kullanılır. Konularda günün aynı zamanda etrafında her üç aşamalardan geçmesi.
1. Deri iletkenlik Yanıt (SCR) ile Fear Değerlendirilmesi - Elektrot Başvuru ve Kayıt
2. Hafif Elektrik Çarpması uyarılması ile Fear İndüksiyon - Elektrod Uygulama ve İş-up Prosedürü
3. 1. Gün - Toplama
4. 2. Gün - Aktifleştirdiğinizde & Extinction Eğitim
Konu dağılımı:
Rastgele üç gruba günde 1 korku yeterli edinimi (aşağıya Dışlama Kriterleri bakın) göstermiştir tüm konular bölmek:
Grup 1 (reaktivasyon-10 dk): reconsolidation pencere içinde 10 dakika alma sonra yok eğitimi alır
Grup2 (reaktivasyon-6 saat): reconsolidation penceresinin dışına 6 saat alma sonra yok eğitimi alır
Grup 3 (no-reaktivasyonu): herhangi bir alma olmadan standart söndürme eğitimi alır
5. Gün 3 - Spontan Korku Kurtarma Testi
6. Ön-işleme ve SCR Veri Skorlama
Zamanlama
1. Gün
Hazırlanışı: 5-7 dk
Toplama Script: ≈ 9 dk
Toplam: 15 dk
2. Gün
Hazırlanışı: 5-7 dk
Aktifleştirdiğinizde Senaryo: ≈ 30 sn
Emilim: 10 dk
Extinction Senaryo: ≈ 5.5 dak
Toplam: 20 dk
3. Gün
Hazırlanışı: 5-7 dk
Re-Extinction Senaryo: ≈ 6,5 dak
Toplam: 15 dk
7. Her grup için Temsilcisi Sonuçlar
1. gün (iktisap) sonunda, bireylerde CS yanıt olduğunu, CSS diferansiyel SCR göstermelidir + olarak karşılaştırmak CS-(bireysel konularda bir örnek için Şekil 4, satın alma, bakınız). Günde 2 (reaktivasyon / yok) sonunda, bu diferansiyel yanıtı CS + ve CS-(bireysel konularda bir örnek için Şekil 4, tükenme, bakınız) arasında bir fark artık yok, öyle ki düşecektir. 3. Günde spontan iyileşme incelerken, biz reaktivasyonu-10 dk grubunda korku kurtarma eksikliği görmeyi beklediğinizBu grup böylece orijinal bellek izlemesi, bu yeni güvenlik bilgileri reconsolidate izin ve korku tepkileri (bireysel özne bir örnek için Şekil 4, üst paneli, bakınız) kurtarma engelleme reconsolidation pencere içinde tükenme eğitimi aldıktan sonra. Biz reconsolidation penceresinin dışına tükenme eğitimi almış reaktivasyonu-6 saat grubunda CS + (CS-) (bireysel bir örnek için Şekil 4, orta panel, bakınız, ancak korkunun önemli iyileşme görmeyi beklediğiniz konu) yanı sıra, (bir denek bir örnek için Şekil 4, taban paneli, bakınız) standart sönme eğitimi almış no-reaktivasyon grubu.
Şekil 1. SCR Örnek elektrot sırasında kurdu. Siyah, dikey oklar konu almak için talimat noktayı işaretSCR belirgin bir artışa neden derin bir nefes. büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın .
Şekil 2. Şok iş alma prosedürü boyunca SCR örneği. Siyah dikey oklar şoku verildi bu noktada göstermektedir. Gri oklar şok yanıt deri iletkenlik artış pik gösterir. büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın .
Şekil 3 CS başlangıçlı + şok teslimat (ABD) büyük bir koşulsuz yanıt (UR) izledi şartına yanıt (CR) örneği;. Duruşma bunun bir CS-. Siyah oklar indic; Gri oklar CS başlangıçlı ve ofset göstermektedirABD teslim yedik. büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın .
Şekil 4 Her deney koşulunda (üst panel: reaktivasyonu-10 dk; orta panel: reaktivasyonu-6 sa; alt panel: hayır reaktivasyonu) bireyin konu edinimi, sönme ve spontan iyileşme örneği..
Tablo 1. Ilgili ürün ve ekipman Tablo.
Tablo 2. Reconsolidation protokolü ve zaman çizelgesi.
Tablo 3. Her aşaması için deneme amacıyla bir örnekdeney. CS-olmalıdır CS + ve reaktivasyonu için hesap için iki hatırlatma grupta Günü 2,2 (yok) eklenecek bir ekstra unutmayın. 3. Gün (gri arka plan ile gösterilir) ile ilgili ilk CS-deneme oturumun başında yönlendirme tepkisi nedeniyle gözardı edilir.
Deneysel ayarlama
Kurulum E-prime çalıştıran bir PC, çalışan bir Mac kabul, bir MP100 Biopac sistemi, ve bir şok kutusu içerir. In-line kodu onaylayın yazılım ve şok kutusu ile iletişim kurmak için e-prime betik içine programlanmıştır. Bu şok yönetimi tetiklemek için şok kutusu için belirtici olay sergilenir ve sinyalleri onaylanması için sinyalleri göndermek için E-prime sağlar. E-asal gelen çıktı (bakınız sırayla Biopac sistem ile donatılmış bir USB bağlantısı yoluyla onaylanması yanı sıra, şok kutusu ile birlikte Mac kayıt fizyolojisine olay sinyali gönderir Biopac sistemi için bir yazıcı bağlantı noktası aracılığıyla gönderilir eşya için Tablo 1) bilgileri ürünün içine.
Dışlama Kriterleri
Onlar Aşağıdakilerden herhangi göstermeniz durumunda Konular bütün deneysel oturumları tamamladıktan önce veya veri analizine dahil edilmelidir:
Burada sunulan protokol caydırıcı bir sonuç ile eşleştirilmiş bir nötr uyarıcı basit bir şartlı korku tepkisi oluşturarak sağlar. Bir gün sonra biz onun reconsolidation tetiklemek için korku bellek yeniden. Bu aşamada biz tükenme eğitim şeklinde müdahale indüklenen. Nesli reconsolidation etkiler doğrulamak için iki kontrol grubu kullanılmıştır. Bir grup hatırlatma deneme tetikleme reconsolidation olmadan yok edildi ve başka bir grup hatırlatma deneme yaşadı ama sonra reconsolidation penc...
Çıkar çatışması ilan etti.
Biz veri toplama konusunda yardım almak için D. Johnson ve K. Doelling ederim. Biz de teşekkür M.-H. Monfils, J. LeDoux, Y. Niv ve M. deneysel protokolleri tavsiye Milad. Bu çalışma, James S. McDonnell Vakfı ve Sağlık (NIH) National Institutes hibe R21 MH072279 (DAP), NIH hibe R37 MH038774, P50 MH058911, RO1 MH046516 ve K05 MH067048 (JEL), Doktora Sonrası bursları NSERC, CIHR ve AHFMR tarafından finanse edilmiştir (M.-HM) ve Fulbright ve Blavatnik ödüller (DS).
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır