È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Method Article
Paura condizionata può essere ridotta attraverso un processo inibitorio chiamato estinzione, ma può riemergere in condizioni quali il passaggio del tempo o esposizione a stress. Nostro protocollo presenta un nuovo modo di prevenire recupero paura introducendo estinzione durante la finestra riconsolidazione (il ricollocamento fase di riattivazione a memoria).
La paura è disadattamento quando persiste a lungo dopo le circostanze si sono sicuro. E 'quindi fondamentale sviluppare un approccio che impedisce costantemente il ritorno della paura. Pavloviani paura condizionata paradigmi sono comunemente impiegati per creare una controllata, associazione romanzo paura in laboratorio. Dopo l'associazione uno stimolo innocuo (stimolo condizionato, CS), con un risultato avversivo (stimolo incondizionato, Stati Uniti), si può suscitare una risposta di paura (risposta condizionata, o CR), presentando semplicemente lo stimolo solo 1,2. Una volta che si acquisisce la paura, può essere ridotta utilizzando la formazione estinzione, per cui lo stimolo condizionato viene ripetutamente presentato senza l'esito avversivo fino paura non è più espressa 3. Questo apprendimento inibitorio crea una nuova rappresentazione sicuro per il CS, che compete per l'espressione con il 4 di memoria originale paura. Sebbene estinzione è efficace a inibire la paura, non è permanente. La paura può spontaneamenterecuperare con il passare del tempo. L'esposizione a stress o tornare al contesto della formazione iniziale può anche causare paura a riemergere 3,4.
Il nostro protocollo affronta la natura transitoria di estinzione di mira la finestra riconsolidamento di modificare la memoria emotiva in modo più permanente. Ampia evidenza suggerisce che riattivando una memoria consolidata ritorna ad uno stato labile, in cui la memoria è ancora sensibili alle interferenze 5-9. Questa finestra di opportunità sembra aprire poco dopo la riattivazione e chiudere circa 6 ore dopo 5,11,16, anche se può variare a seconda della forza e l'età della memoria 15. Consentendo nuove informazioni di incorporare nella traccia di memoria originale, questa memoria può essere aggiornato come reconsolidates 10,11. Gli studi che coinvolgono animali non umani hanno bloccato con successo l'espressione della memoria paura con l'introduzione di manipolazioni farmacologiche all'interno del refinestra di consolidamento, tuttavia, la maggior parte agenti usano i tossici per l'uomo o mostrare effetti dubbi quando viene utilizzato in studi sull'uomo 12-14. Il nostro protocollo affronta queste sfide offrendo un efficace, ma non invasivo, la manipolazione del comportamento che è sicuro per gli esseri umani.
Con la richiesta di memoria di recupero paura prima di estinzione, abbiamo essenzialmente innescare il processo di riconsolidamento, permettendo nuove informazioni sulla sicurezza (ad esempio, estinzione) deve essere incorporata mentre la memoria paura è ancora suscettibile di interferenze. Un recente studio che impiega questa manipolazione comportamentale nel ratto ha bloccato con successo ricordo di paura usando questi parametri temporali 11. Ulteriori studi nell'uomo hanno dimostrato che l'introduzione di nuove informazioni dopo il recupero di precedentemente consolidate motore 16, 17 episodica, o dichiarative 18 memorie porta a interferenze con la traccia di memoria originale 14. Si delineano di seguito un pro romanzoprotocollo utilizzato per bloccare il recupero paura negli esseri umani.
Panoramica
Lo studio descritto in questo protocollo si svolge nell'arco di tre giorni consecutivi, con una tra-design soggetti dei tre gruppi sperimentali. Il giorno 1, tutti i soggetti sottoposti a condizionamento alla paura, dove si impara a discriminare tra due segnali, uno che predice uno shock e un altro che non lo fa. Il giorno 2, tutti i soggetti sottoposti a una formazione di estinzione, ma si differenziano per quanto riguarda ciò che accade prima: Due gruppi ricevono un segnale promemoria per riattivare la memoria paura prima dell'allenamento di estinzione, mentre un terzo gruppo non riceve tale cue. Un gruppo riceve la stecca promemoria 10 minuti prima dell'estinzione, in tal modo subiscono l'estinzione mentre la memoria paura è riconsolidando. L'altro gruppo riceve la stecca promemoria 6 ore prima dell'estinzione, in tal modo subiscono estinzione dopo che questa finestra è probabilmente chiusa. Il terzo gruppo non riceve alcun cue promemoria prima di subire l'estinzione, così essi una formazione standard di estinzione. Il giorno 3, tutti i soggetti rRitornate per un'altra sessione di estinzione. Il loro livello di paura la prima volta che vedi la stecca condizionata al Day 3 indica se il ricordo di paura rimane. Tutti i tre giorni sono condotte nella stessa impostazione sperimentale, che è un suono attenuato, temperatura controllata camera. Gli stimoli condizionati sono quadrati colorati presentati sullo schermo del computer. Ci inducono e misurare la paura con una leggera scossa elettrica e conduttanza cutanea, rispettivamente, con un modulo di sistema Biopac (cfr. tabella 1). Un computer desktop viene utilizzato per eseguire il programma software AcqKnowledge che permette la registrazione e il monitoraggio di SCR, mentre un altro computer viene utilizzato per eseguire e presentare lo script sperimentale al soggetto. I soggetti sottoposti a tutte tre le fasi intorno allo stesso tempo del giorno.
1. La paura di valutazione con Skin Response Conduttanza (SCR) - l'applicazione degli elettrodi e di registrazione
2. Induzione paura con lieve stimolazione shock elettrico - l'applicazione degli elettrodi e lavoro di cui alle procedure
3. Giorno 1 - Acquisizione
4. Giorno 2 - Formazione & riattivazione estinzione
Ripartizione Oggetto:
Casualmente dividere tutti i soggetti che hanno dimostrato l'acquisizione adeguato di paura dal giorno 1 (vedi criteri di esclusione di seguito) in tre gruppi:
Gruppo 1 (riattivazione-10 min): riceve una formazione estinzione 10 minuti dopo il recupero all'interno della finestra di riconsolidamento
Gruppo2 (riattivazione-6 ore): riceve una formazione estinzione 6 ore dopo il recupero al di fuori della finestra di riconsolidamento
Gruppo 3 (no-riattivazione): riceve una formazione standard di estinzione senza alcun recupero
5. Giorno 3 - Recupero spontanea saggio Paura
6. Pre-elaborazione dei dati & Scoring SCR
Tempismo
Giorno 1
Preparazione: 5-7 min
Script di acquisizione: ≈ 9 min
Totale: 15 min
Giorno 2
Preparazione: 5-7 min
Riattivazione Script: ≈ 30 sec
Break: 10 min
Script estinzione: ≈ 5.5 min
Totale: min 20
Giorno 3
Preparazione: 5-7 min
Re-Extinction Script: ≈ 6.5 min
Totale: 15 min
7. Risultati rappresentante per ciascun gruppo
Alla fine del giorno 1 (acquisizione), i soggetti devono dimostrare differenziale SCR al CS, cioè superiore rispondendo al CS + come confrontare la CS-(vedere Figura 4, l'acquisizione, per un esempio da singoli soggetti). Alla fine del giorno 2 (riattivazione / estinzione), tale risposta differenziale dovrebbe diminuire, in modo tale che non vi è più una differenza tra CS + e CS-(vedere Figura 4, estinzione, per esempio da singoli soggetti). Nell'esaminare il recupero spontaneo del Day 3, ci si aspetterebbe di vedere una mancanza di paura di recupero nel gruppo di riattivazione-10 minpoiché questo gruppo ha ricevuto formazione estinzione all'interno della finestra riconsolidazione, permettendo così la traccia di memoria originale riconsolidare con questa nuova informazione di sicurezza, e prevenire il recupero di risposte di paura (vedi Figura 4, pannello superiore, ad esempio da un singolo soggetto). Ci si aspetterebbe di vedere un sostanziale recupero di paura, invece, per il + CS (non CS-) nel gruppo di riattivazione-6 ore che ha ricevuto formazione estinzione al di fuori della finestra di riconsolidamento (vedi Figura 4, pannello centrale, per un esempio da un individuo soggetto) così come il no-riattivazione gruppo che ha ricevuto la formazione standard estinzione (vedi Figura 4, pannello inferiore, ad esempio da un singolo soggetto).
Figura 1. Esempio di SCR durante elettrodo costituito. Nere, frecce verticali indicano il punto in cui è stato istruito soggetto per scattareun respiro profondo che ha determinato un notevole aumento SCR. Clicca qui per ingrandire la figura .
Figura 2. Esempio di SCR durante lo shock work-up procedura. Nero frecce verticali indicano il punto in cui è stato somministrato shock. Frecce grigie indicano il picco di aumento della conduttanza cutanea in risposta allo shock. Clicca qui per ingrandire la figura .
Figura 3 Esempio di risposta condizionata (CR) alla comparsa del CS + seguita da una risposta più incondizionato (UR) per l'erogazione di shock (US). Successivo processo è quella di un CS-. Frecce grigie indicano l'insorgenza CS e offset; nero indic freccemangiato la consegna degli Stati Uniti. Clicca qui per ingrandire la figura .
Figura 4 Esempio di recupero di acquisizione, l'estinzione e spontaneo in un soggetto individuale da ogni condizione sperimentale (Pannello superiore: riattivazione-10 min; pannello centrale: riattivazione-6 h; pannello inferiore: nessuna riattivazione)..
Tabella 1. Tabella dei prodotti di cui trattasi e delle attrezzature.
Tabella 2. Protocollo riconsolidamento e timeline.
Tabella 3. Un esempio di ordine di prova per ciascuna fase delesperimento. Nota: uno in più CS-deve essere aggiunto al Day 2.2 (estinzione) in entrambi i gruppi di sollecito al fine di spiegare la riattivazione del + CS. La prima prova CS-il giorno 3 (indicato con sfondo grigio) viene ignorato a causa della risposta orientativa all'inizio della sessione.
Set up sperimentale
La configurazione comprende un PC dotato di E-prime, un Mac con riconoscimento, un sistema MP100 Biopac, e una scatola di shock. In linea di codice è memorizzato nella E-prime script per comunicare con il software Acknowledge e la scatola dell'ammortizzatore. In questo modo E-prime per inviare segnali a riconoscere insorgenze eventi denotativi, e segnali per la casella di shock per innescare l'amministrazione shock. L'uscita da E-prime viene inviato tramite una porta stampante al sistema Biopac, che a sua volta invia il segnale di evento alla fisiologia registrazione Mac con Acknowledge tramite un collegamento USB fornito con il sistema Biopac, nonché alla scatola shock (vedere Tabella 1 per i prodottidotto informazioni).
Criteri di esclusione
I soggetti devono essere escluse prima di completare tutte le sessioni sperimentali o dall'analisi dei dati se dimostrano una delle seguenti operazioni:
Il protocollo che abbiamo presentato qui permette la creazione di una semplice risposta paura condizionata a uno stimolo neutro in coppia con un risultato avverso. Il giorno dopo abbiamo riattivato la memoria paura al fine di attivare l'riconsolidamento. Durante questa fase abbiamo indotto interferenze sotto forma di formazione estinzione. Per verificare che l'estinzione colpisce riconsolidamento sono stati utilizzati due gruppi di controllo. Un gruppo ha subito l'estinzione senza il riconsolidamento process...
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamo D. Johnson e K. Doelling per l'assistenza con la raccolta dei dati. Ringraziamo anche M.-H. Monfils, J. LeDoux, Niv Y. e M. Milad per una consulenza sui protocolli sperimentali. Questo studio è stato finanziato dalla S. James McDonnell Foundation e il National Institutes of Health (NIH) sovvenzione R21 MH072279 (EAP), le sovvenzioni NIH R37 MH038774, P50 MH058911, RO1 MH046516 e K05 MH067048 (JEL), borse di studio post-dottorato NSERC, CIHR e AHFMR (M.-HM), e una Fulbright e premi Blavatnik (DS).
Richiedi autorizzazione per utilizzare il testo o le figure di questo articolo JoVE
Richiedi AutorizzazioneThis article has been published
Video Coming Soon