A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
פחד מיזוג יכול להיות מוקטן באמצעות תהליך הנקרא מעכבות הכחדה, אבל יכול פני שטח בתנאים כגון חלוף הזמן או חשיפה ללחץ. הפרוטוקול שלנו מציג דרך חדשנית למניעת התאוששות פחד על ידי החדרת הכחדה במהלך חלון reconsolidation (השלב מחדש האחסון של זיכרון מחדש).
פחד הוא הסתגלותי כשהיא נמשכת זמן רב לאחר שהנסיבות הפכו בטוחות. לכן חיוני לפתח גישה עקבית שמונעת את חזרתו של הפחד. פרדיגמות הפבלוביות פחד מיזוג מועסקות בדרך כלל כדי ליצור קשר מבוקר, רומן פחד במעבדה. לאחר זיווג גירוי מזיק (גירוי מותנה, CS) עם תוצאה מרתיעה (גירוי בלתי מותנה, ארה"ב) אנו יכולים לעורר תגובת פחד (תגובה מותנית, או CR) על ידי הצגה רק הגירוי לבד 1,2. ברגע שפחד הוא רכש, זה יכול להיות מופחת באמצעות אימון הכחדה, לפיה גירוי המותנה מוצג שוב ושוב ללא תוצאות מרתיעות עד שפחד כבר לא בטא 3. למידה מעכבת זה יוצר ייצוג חדש, בטוח לCS, שמתחרה על ביטוי עם 4 זכרון הפחד המקוריים. למרות ההכחדה יעילה בעיכוב פחד, זה לא קבוע. פחד יכול באופן ספונטנילהתאושש עם חלוף הזמן. חשיפה ללחץ או לחזור להקשר של למידה ראשונית יכולה גם היא לגרום לפחד וחוזר ועולים 3,4.
הפרוטוקול שלנו עוסק באופיים הזמני של הכחדה על ידי מיקוד חלון reconsolidation לשנות זיכרון רגשי באופן קבוע יותר. עדויות רבות מצביעות על כך שההפעלה מחדש של זיכרון מאוחד מחזירה אותו למצב לא יציב, שבמהלכו הוא הזיכרון שוב לסבול מהפרעות 5-9. חלון ההזדמנויות הזה מופיע לזמן קצר לאחר הפעלתו מחדש, לפתוח ולסגור כ 6hrs מאוחר 5,11,16, אם כי זה עשוי להשתנות בהתאם לכוח וגיל 15 הזיכרון. על ידי מתן מידע חדש שתוכל לשלב את עקבות הזיכרון המקוריות, זיכרון זה עשוי להיות לא מעודכן כפי שreconsolidates 10,11. מחקרים שכלל בעלי חיים שאינם בני אדם חסמו את הביטוי של זכרון פחד בהצלחה על ידי החדרת מניפולציות תרופתיות בתוך מחדשחלון איחוד, לעומת זאת, רוב הסוכנים המשמשים גם הם רעילים לבני אדם או להציג תופעות מפוקפקות כאשר נעשה שימוש במחקרים בבני אדם 12-14. הפרוטוקול שלנו נותן מענה לאתגרים אלה על ידי הצעה יעילה, אך לא פולשנית מניפולציה, התנהגות שהוא מסוכן לבני אדם.
על ידי עידוד אחזור זכרון פחד לפני ההכחדה, אנחנו בעצם להפעיל את תהליך reconsolidation, המאפשרים מידע בטיחות חדש (כלומר, הכחדה) להיות משולב תוך הזיכרון והפחד הוא לסבול מהפרעות. מחקר שנערך לאחרונה העסקת מניפולצית ההתנהגות הזה בחולדות חסם הצלחת זכרון פחד באמצעות פרמטרים אלה זמניים 11. מחקרים נוספים בבני האדם הראו כי החדרת מידע חדש לאחר שהליפה של 16 מנוע שאוחד בעבר, 17 אפיזודי, או 18 זכרונות תוכניים גורמת להפרעה לעקבות הזיכרון המקוריות 14. אנחנו נתווה להלן פרו רומןtocol משמש לחסימת התאוששות פחד בבני אדם.
סקירה
המחקר שאנו מתארים בפרוטוקול זה מתבצע במשך שלושה ימים רצופים, עם עיצוב בין הנושא של שלוש קבוצות ניסוי. ביום 1, בכל הנושאים לעבור מיזוג פחד, שם הם לומדים להבחין בין שני אותות, אחד שמנבא הלם ואחר שלא. ביום 2 בכל נושאי הכשרת הכחדה, אבל שונים בנוגע למה שקורה מראש: שתי קבוצות תקבלנה אות תזכורת על מנת להפעיל מחדש את זכרון הפחד לפני אימון הכחדה ואילו קבוצה שלישית לא מקבלת אות כזה. קבוצה אחת מקבלת 10 דקות רמז התזכורת לפני ההכחדה, ובכך שהם עוברים בזמן הכחדת זכרון הפחד reconsolidating. הקבוצה השנייה מקבלת 6 שעתי קיו תזכורת לפני ההכחדה, ובכך הם עוברים הכחדה לאחר החלון הזה נסגר ככל הנראה. הקבוצה השלישית לא מקבלת אות תזכורת לפני שעברה הכחדה, ולכן הם עוברים הכשרת הכחדה סטנדרטית. ביום 3 ביום, בכל הנושאים rזור למפגש הכחדה אחרת. רמת הפחד כשהם רואים לראשונה את הרמז המותנה ביום 3 מציינת אם זכרון הפחד נשאר. כל שלושה הימים נערכים באותה ההגדרה ניסיונית, שהוא חדר קול נחלש, עם בקרת טמפרטורה. הגירויים הממוזגים הם ריבועים צבעוניים המוצגים על מסך מחשב. אנחנו גורמים לפחד ולמדוד בהלם חשמלי קל ומוליכות עור, בהתאמה, באמצעות מודול מערכת Biopac (ראה טבלה 1). מחשב השולחני משמש להפעלת תוכנת AcqKnowledge המאפשרת הקלטה והניטור של SCR תוך מחשב נפרד משמש להפעלה ומציג את התסריט הניסיוני לנושא. הנבדקים לעבור את כל שלושת השלבים בערך באותו הזמן של היום.
1. הערכת פחד עם תגובה של מוליכות עור (SCR) - יישום אלקטרודה והקלטה
2. אינדוקצית פחד עם גירוי מכות חשמל חלש - יישום אלקטרודה ונוהל עבודה למעלה
3. יום 1 - רכישה
4. יום 2 - הדרכה להפעלה מחדש והכחדה
פירוט נושא:
אקראי לחלק את כל הנושאים שהוכיחו רכישה מספקת של פחד מהיום 1 (ראה קריטריוני פסילה בהמשך) לשלוש קבוצות:
קבוצה 1 (אקטיבציה-10 דקות): מקבלת הכשרת הכחדה 10 דקות אחרי שבת בתוך חלון reconsolidation
קבוצה2 (הפעלה מחדש-6 שעות): מקבל הכשרת הכחדה 6 שעות אחרי שבת מחוץ לחלון reconsolidation
קבוצת 3 (ללא הפעלה מחדש): מקבל הכשרת הכחדה סטנדרטית ללא כל ליפה
5. יום 3 - Assay שחזור פחד הספונטני
6. טרום עיבוד & ניקוד SCR נתונים
תזמון
יום 1
הכנה: דקות 5-7
סקריפט רכישה: ≈ 9 דקות
סה"כ: 15 דקות
יום 2
הכנה: דקות 5-7
סקריפט הפעלה מחדש: ≈ 30 שניות
הפסקה: 10 דקות
ss> סקריפט הכחדה = "jove_content": ≈ 5.5 דקות
סה"כ: 20 דקות
יום 3
הכנה: דקות 5-7
תסריט מחדש הכחדה: ≈ 6.5 דקות
סה"כ: 15 דקות
7. נציג תוצאות לכל קבוצה
בסופו של היום 1 (רכישה), נושאים צריכים להוכיח ההפרש SCR לCSS, כלומר, גבוה יותר להגיב לCS + כמו להשוות CS-(ראה איור 4, רכישה, לדוגמה מנושאים בודדים). בסוף היום 2 (הפעלה מחדש / הכחדה), תגובת ההפרש הזה צריכה להפחית, באופן שאין עוד הבדל בין CS + ו CS-(ראה איור 4, הכחדה, לדוגמה מנושאים בודדים). כאשר בוחן החלמה ספונטנית ביום 3, הייתי מצפה לראות התאוששות חוסר פחד בקבוצה מחדש-10 דקותמאז קבוצה זו קבלה הכשרת הכחדה בתוך חלון reconsolidation, ובכך מאפשר לעקבות הזיכרון המקוריות לreconsolidate עם מידע בטיחות חדש זה, ולמנוע את ההתאוששות של תגובות פחד (ראה איור 4, פנל עליון, לדוגמה מנושא פרטי). אנו מצפים לראות התאוששות משמעותית של פחד, עם זאת, לCS + (לא CS-) בקבוצה מחדש-6 השעות שקבלה הכשרת הכחדה מחוץ לחלון reconsolidation (ראה איור 4, באמצע פנל, לדוגמה מאדם נושא), כמו גם קבוצה שלא זכה מחדש שקבלה הכשרת הכחדה סטנדרטית (ראה תרשים 4, לוח תחתון, לדוגמה מנושא פרטי).
איור 1. דוגמה לSCR במהלך האלקטרודה להגדיר. חיצים שחורים, אנכיים לציין את הנקודה שבה הנושא קבל הוראה להסירנשימה עמוקה אשר הביאה לעלייה ניכרת בSCR. לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.
איור 2. דוגמה לSCR במהלך הליך לעבוד למעלה הלם. חיצים שחורים אנכיים מציינים נקודה שבה ההלם היה מנוהל. חיצים אפורים מצביעים שיא של עליית מוליכות עור בתגובה להלם. לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.
איור 3 דוגמה לתגובה מותנית (CR) להופעה של CS + ואחריו תגובה בלתי מותנית גדולה יותר (UR) לאספקה של הלם (ארה"ב);. המשפט הבא הוא זה של CS-. חיצים אפורים מציינים את תחילת CS וקיזוז; הודי חיצים שחוריםאכלתי את המסירה של ארה"ב. לחץ כאן לצפייה בדמות גדולה.
איור 4 דוגמה לרכישה, הכחדה וספונטנית התאוששות בנושא היחיד מכל תנאי ניסוי (פנל עליון: אקטיבציה-10 דקות; לוח מרכזי: הפעלה מחדש-6 שעות; פנל תחתון: לא מחדש)..
טבלת 1. טבלה של מוצרים וציוד רלוונטיים.
טבלה 2. פרוטוקול Reconsolidation וציר זמן.
לוח 3. דוגמה של סדר דין על כל שלב שלניסוי. שים לב לאחת נוסף, CS-יש להוסיף ליום 2.2 (הכחדה) בשתי קבוצות התזכורת כדי להסביר לאקטיבציה של CS +. CS-המשפט הראשון ביום 3 (מסומן ברקע אפור) הוא התעלם בשל תגובת orienting בתחילת הפגישה.
ניסויי גדר
ההתקנה כולל מחשב עם מערכת הפעלת E-ממשלה, מק פועל להכיר, מערכת Biopac MP100, ותיבת הלם. קוד בשורה מתוכן לתסריט E-הממשלה כדי לתקשר עם תוכנה אשר ותיבת ההלם. זה מאפשר לדואר כדי לשלוח אותות ממשלה להכיר onsets המציין אירוע, ומסמן לתיבת ההלם כדי לעורר ממשל הלם. הפלט מדואר הממשלה הוא נשלח דרך יציאת מדפסת למערכת Biopac, אשר בתורו שולחת את אות אירוע לפיזיולוגית הקלטת מק עם הכר דרך חיבור ה-USB שסופק עם מערכת Biopac, כמו גם לתיבת ההלם (ראה טבלה 1 לדחיפהUCT מידע).
קריטריוני פסילה
נושאים צריכים להיות מחוץ לפני ההשלמה כל ההפעלות הניסיוניות או מניתוח נתונים, אם הם מדגימים כל אחד מאלה:
הפרוטוקול שהצגנו כאן מאפשר יצירת תגובת פחד מותנית פשוטה לגירוי ניטראלי מזווג עם תוצאה מרתיעה. יום לאחר מכן אנחנו מחדש את זכרון הפחד כדי לעורר reconsolidation. במהלך שלב זה אנו מושרים התערבות בצורה של אימון הכחדה. כדי לוודא שהכחדה משפיעה reconsolidation השתמשנו בשתי קבוצות ביקורת. ק...
אין ניגודי האינטרסים הכריזו.
אנו מודים ד ג'ונסון וק Doelling לסיוע באיסוף נתונים. אנו מודים גם לM.-H. מונפילס, ג'לדו, י ניב ומ 'מילאד לייעוץ על פרוטוקולי הניסוי. מחקר זה מומן על ידי ג'יימס ס 'מקדונל הקרן ומכונים הלאומיים לבריאות (NIH) מענק R21 MH072279 (EAP), מענקי NIH R37 MH038774, P50 MH058911, RO1 MH046516 וK05 MH067048 (Jel), מלגות דוקטורי NSERC, CIHR וAHFMR (מ-HM), ופרסי לבטניק פולברייט ו( DS).
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved