Una técnica para biopsia de tejido adiposo Abdominal subcutáneo mediante un método no-diatermia

Resumen

Estandarizó una biopsia de tejido adiposo abdominal utilizando un método de diatermia no realizado bajo anestesia local. Se produjeron tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). Concluimos que una biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal utilizando un método de diatermia no puede aplicarse con seguridad a hombres sanos.

Resumen

Biopsias de tejido adiposo ofrecen muestras de tejido que, en el análisis, pueden proporcionar interesantes descripciones de mecanismos relacionados con el metabolismo y la enfermedad. Para obtener biopsias de tejido adiposo subcutáneo en la zona abdominal, los investigadores y los médicos utilizan una cirugía o una técnica basada en la aguja. Sin embargo, biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden proporcionar una visión más completa de las complejidades de índices biológicos en tejido adiposo blanco. Por lo general, una biopsia quirúrgica de tejido adiposo incluye un tratamiento de diatermia para la cauterización de los vasos de sanguíneos prevenir el sangrado excesivo. Sin embargo, efectos secundarios, como fogonazos y las lesiones de piel en el tejido, se han divulgado después de diatermia. Por lo tanto, el objetivo fue estandarizar una biopsia de tejido adiposo abdominal quirúrgica realizada bajo anestesia local utilizando un método no-diatermia. Se realizaron biopsias de tejido adiposo subcutáneo 115 en hombres sanos utilizando un método no-diatermia abdominal biopsia quirúrgica. Nuestros resultados mostraron tres casos de excesiva después de la operación sangrado fuera de 115 operaciones (2,61%). En conclusión, nuestra biopsia quirúrgica de tejido adiposo abdominal subcutáneo estandarizado utilizando un método de diatermia no puede aplicarse con seguridad a hombres sanos en la cabecera, con efectos secundarios mínimos.

Introducción

Biopsias de tejido adiposo ofrecen muestras de tejido que, en el análisis, pueden proporcionar una visión general perspicaz de mecanismos relacionados con el metabolismo y la enfermedad. Por ejemplo, se utilizan para el cáncer de mama tumor identificación¹, ácido graso composición examen²e investigación sobre enfermedades metabólicas y hormonales importantes vías³. Para obtener biopsias de tejido adiposo subcutáneo en la zona abdominal, los investigadores y los médicos utilizan una cirugía o una técnica basada en la aguja. Sin embargo, las biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden proporcionar una visión más completa de mecanismos biológicos complejos [por ejemplo, Mensajero (ARNm) el ácido ribonucleico expresión, análisis histológico, etc.]⁴ . Previamente han sido utilizados en adultos sanos⁴ y puede realizarse con seguridad en la noche⁵.

La técnica de biopsia de la aguja requiere liposucción intensa que puede destruir la integridad del tejido, y generalmente recupera una pequeña cantidad de tejido (100-500 mg)⁶. Estas muestras de tejido pueden no ser apropiadas para estudios de investigación compleja. Además, en comparación con la técnica de aguja, biopsias quirúrgicas de grasa subcutáneas pueden ofrecer muestras de tejido que pueden dibujar un cuadro más completo de varios índices inflamatorios (por ej., células T y B de la señalización); regulación del citoesqueleto; vías celulares; vías metabólicas de los lípidos, carbohidratos y aminoácidos. y fosforilación oxidativa vías⁴. La técnica de aguja incluye también, un mayor riesgo de contaminación de células de la sangre que la quirúrgica⁴, mientras que proporciona poca información sobre las regiones fibróticas del tejido^4,7,8 .

Por lo general, una biopsia quirúrgica de tejido adiposo incluye un tratamiento de diatermia para la cauterización de los vasos sanguíneos para prevenir el sangrado excesivo⁹. Una diatermia también se utiliza para quemar y destruir los tejidos afectados por neoplasias y verrugas o tejidos que son infectados por la enfermedad⁹. Esta técnica es particularmente aplicable en neurocirugía y ojo cirugía⁹.

El uso excesivo de la diatermia puede conducir a la formación de tejido necrótico, que causan infecciones y retardando la cicatrización proceso¹⁰. De hecho, se han divulgado efectos secundarios como fogonazos y las lesiones de piel en el tejido después de diatermia⁹. Además, se han planteado preocupaciones sobre la toxicidad del humo quirúrgico publicado por diatermia en el entorno de la cirugía, que puede ser inhalado por el paciente y el participante y el personal operativo⁹. De hecho, el uso de la diatermia puede causar toxicidad del aire en la sala de operaciones igual a la producida por fumar cigarrillos seis¹¹ y, aunque las salas de operaciones suelen tener sistemas de ventilación, la contaminación puede durar al menos 20 min¹² . Sin embargo, en los pacientes realizando una cirugía de amigdalectomía, el método de diatermia ha demostrado menos, pero el dolor no significativa, post-operatorios,¹³ y¹⁴ de sangrado que el método de hemostasia ligadura clásica. En general, existe evidencia respecto a las diferencias en el dolor postoperatorio y sangrado apenas las tasas después de biopsias de tejido adiposo en individuos sanos. Dada la falta de pruebas y los efectos secundarios de la diatermia, la estandarización de un método no-diatermia para biopsia de tejido adiposo está garantizado. Por consiguiente, el objetivo de este estudio fue estandarizar una técnica quirúrgica para biopsia de tejido adiposo abdominal subcutáneo, realizada bajo anestesia local utilizando un método no-diatermia en hombres sanos. Por otra parte, describiremos los procedimientos para la recolección de tejido para determinar la expresión del mRNA y la proteína concentración y realizar análisis histológicos.

Protocolo

el estudio se ajustó a las normas establecidas por la declaración de Helsinki y fue aprobado por la Universidad de Tesalia, Departamento de Ciencias de ejercicio, Βiοethics Comité.

1. preparación de los equipos de cirugía y consumibles

1. colocar un campo quirúrgico desinfectado en un soporte de Mayo quirúrgico de 4 ruedas.
2. Posición de los siguientes insumos y equipo quirúrgico en un soporte de Mayo quirúrgico 4 ruedas:
   Un par de tijeras de operación recta (15 cm)
   un bisturí (Nº 11)
   mango de una bisturí
   un par de tijeras curvas (14 cm)
   pinza un mosquito
   un par de pinzas de Kocher
   una pinza quirúrgica
   povidona-yodo (en un estéril gasa)
   una sutura (4.0)
   un par de tijeras rectas (11 cm)
   (15 cm) del sostenedor de la uno aguja
   cinco gasas estériles
   una gasa estéril adhesivo
   una jeringa de 10 mL con una aguja desinfectada
   10 mL de xilocaína 2% (sin adrenalina)
   uno par de guantes quirúrgicos desinfectados
3. Coloque los siguientes materiales sobre un banco separado:
   dos tubos de microcentrífuga
   un tubo que contenga 5 mL de formalina al 10%
   un recipiente pequeño que contenga 50-100 mL de nitrógeno líquido a-190 ° C.

2. Preparación de los participantes

1. que los participantes siguen un rápido de 8 h ¹⁵ antes del procedimiento de biopsia.
2. Tienen los participantes abstenerse de ejercicio físico, estrés excesivo, el alcohol y activo y pasivo antes de 72 h la biopsia ^{16 , 17}.

3. Realizar la biopsia de tejido adiposo subcutáneo

1. posición del participante en el lecho quirúrgico en una posición supina.
2. Desinfectar la región de la incisión con povidona-yodo.
3. Inyectar 10 mL de xilocaína 2% (sin adrenalina) lentamente y constantemente ¹⁸ en la región seleccionada para servir como anestesia local.
4. Colocar un campo quirúrgico estéril sobre el área a cubrir el cuerpo de los participantes, excepto la región de la incisión.
5. Al menos 3-5 min después, aplique presión con un par de pinzas en el área de anestesia local y pregunta al participante si siente cualquier dolor ¹⁹ para asegurarse de que la anestesia local se ha logrado.
6. Coloque el bisturí Nº 11 en el mango del bisturí.
7. Crear una incisión de 2-2.5 cm de longitud, 3-5 cm hacia la izquierda o derecha del ombligo.
8. Quitar el tejido subcutáneo con un par de recta 15 cm tijeras del funcionamiento.
9. Una vez que el tejido adiposo se revela, capturarlo con un par de pinzas y tijeras curvas 14 cm.
10. Corte y retire aproximadamente 1 g de tejido adiposo.
11. Después del retiro de tejido, coloque gasas estériles sobre la incisión para conseguir la hemostasia.
12. Cuando se confirma la hemostasia, capturar la 4.0 sutura con una aguja de 14 cm y la piel con un par de pinzas quirúrgicas hasta el tejido subcutáneo.
13. Insertar la aguja de sutura en la piel, hacia el tejido subcutáneo, mientras que la piel y subcutáneo están estrechamente alineados.
14. Con la aguja de sutura, seguir una técnica en continuo zig-zag en el tejido subcutáneo hasta que impulsado desde el exterior de la piel. Continúe hasta que se cierra la incisión de la piel.
15. Externamente atar la sutura.
16. Limpiar la zona de la incisión con solución salina y cubrir con una gasa estéril adhesivo.

4. La deposición del tejido

1. separar el tejido adiposo recogido en tres piezas: 150, 350 y 500 mg.
2. Posición de las piezas de magnesio 150 y 350 del tejido de la muestra en tubos de microcentrífuga.
3. Tubos de microcentrífuga de sumergir los dos en el pequeño recipiente con nitrógeno líquido a-190 ° C hasta la deposición final en un congelador a -80 ° C.
   Nota: por adelantado, use una aguja estéril para perforar un pequeño agujero en los tubos de microcentrífuga para evitar fracaso de Copa durante la inmersión de los tubos de microcentrífuga en nitrógeno líquido a -190 ° C.
4. Sumergir la pieza de 500 mg de tejido de la muestra-que se utilizará para el análisis histológico-en un tubo que contenga 5 mL de formalina al 10%.
   Nota: Use las pinzas de mosquito sólo en casos de sangrado excesivo durante la cirugía. En tales casos, capturar la nave con las pinzas de mosquito para ligar y cerrar hasta logra hemostasia.

Resultados

Las características de los participantes se proporcionan en la tabla 1. Los puntos de sutura en la zona de la incisión se cayeron en los próximos días 8-12. Completamos un total de 115 biopsias de tejido adiposo subcutáneo mediante el método de diatermia no biopsia quirúrgica abdominal en hombres adultos sanos (edad: 35,2 ± 6,9 años, índice de masa corporal: 27,3 ± 4.4; y porcentaje de grasa corporal: 27,0 ± 9.0%). Sangrado excesivo después de la biopsia fue ...

Discusión

El objetivo de este estudio fue estandarizar una técnica quirúrgica para la biopsia de tejido adiposo abdominal subcutáneo, realizada bajo anestesia local con un método no-diatermia en hombres sanos. La diatermia se utiliza comúnmente en la sala de operaciones; sin embargo, pueden ocurrir efectos secundarios (es decir, fogonazos y toxicidad ambiental)⁹ y retrasos en la curación de¹⁰ . Estos efectos no deseados de la diatermia pueden generar riesgos para la sa...

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Disinfected surgical field	Hartmann	23516-00
Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo)	Medical Device Depot Inc.	32000
Operating Scissors straight 15 cm	Karl Storz	791903
Scalpel No 11	Swann-Morton	203	Bipolar, catalog number 429011
Scarpel handle No 3	Karl Storz	488090
Scissors curved 14 cm	Karl Storz	511514, 752918
Mosquito forceps	Karl Storz	535012
Tweezers Kocher	Karl Storz	530416	Bipolar, catalog number 830316
Surgical tweezers	Karl Storz	793216	Bipolar, catalog number 831016
Povidone-iodine	Various	Not applicable
Suture 4.0 Vicryl	Johnsons	V4970H
Scissors straight 11 cm	Karl Storz	512511 DS
Needle holder 15 cm	Karl Storz	515515	Bipolar, catalog number 213015
Sterile gauzes	Hartmann	3021
Αdhesive sterile gauze	Digas medical equipment	2889
10 mL syringe with disinfected needle	Alpha medical solutions	10310-55-0010
2%-xylocaine (no adrenaline)	Various	Not applicable
Sterile surgical gloves	Sempermed	10001
Eppendorf tubes	Kartell	16283
10% formalin	Alpha medical solutions	11016-30-2909
Tubes 120 mL	Digas medical equipment	9025
Liquid nitrogen at -190°C	Revival	Not applicable