Uma técnica para biopsia de tecido adiposo Abdominal subcutâneo através de um método não-diatermia

Resumo

Nós padronizada uma biópsia abdominal tecido adiposo usando um método não-diatermia realizado sob anestesia local. Ocorreram três casos de excessiva pós operação sangrando 115 operações (2,61%). Podemos concluir que uma biópsia cirúrgica abdominal tecido adiposo usando um método não-diatermia pode ser aplicada com segurança para homens saudáveis.

Resumo

Biópsias de tecido adiposo oferecem amostras de tecido que, após a análise, podem fornecer súmulas perspicazes dos mecanismos relacionados com o metabolismo e doença. Para obter biópsias do tecido adiposo subcutâneo na região abdominal, pesquisadores e médicos usam um cirúrgico ou uma técnica baseada na agulha. No entanto, a cirúrgicas biópsias de gordura subcutâneas podem oferecer amostras de tecido que podem fornecer uma visão mais abrangente das complexidades de índices biológicos no tecido adiposo branco. Geralmente, uma biópsia cirúrgica de tecido adiposo inclui um tratamento de diatermia para cauterização dos vasos sanguíneos evitar sangramento excessivo. No entanto, efeitos colaterais, tais como o flash dispara e lesões de pele, no tecido, têm sido relatados após diatermia. Portanto, tivemos como objetivo padronizar uma biópsia cirúrgica abdominal adiposo tecido realizada sob anestesia local, usando um método não-diatermia. Realizamos 115 biópsias do tecido adiposo subcutâneo em homens saudáveis, usando um método não-diatermia de biópsia cirúrgica abdominal. Nossos resultados mostraram três casos de excessiva pós operação sangrando 115 operações (2,61%). Em conclusão, nossa biópsia cirúrgica de tecido adiposo subcutâneo abdominal de padronizado usando um método não-diatermia pode ser aplicada com segurança para homens saudáveis ao lado do cama, com efeitos colaterais mínimos.

Introdução

Biópsias de tecido adiposo oferecem amostras de tecido que, após a análise, podem fornecer uma visão perspicaz dos mecanismos relacionados com o metabolismo e doença. Por exemplo, eles são utilizados para pesquisas sobre doenças metabólicas e hormonais importantes vias³, identificação tumor de câncer de mama-¹e ácido graxo composição exame². Para obter biópsias do tecido adiposo subcutâneo na região abdominal, pesquisadores e médicos usam um cirúrgico ou uma técnica baseada na agulha. No entanto, a cirúrgicas biópsias de gordura subcutâneas podem oferecer amostras de tecido que podem fornecer uma visão mais abrangente de mecanismos biológicos complexos [expressão de ácido ribonucleico (mRNA)por exemplo, mensageiro, análise histológica, etc]⁴ . Eles foram usados anteriormente em adultos saudáveis⁴ e podem ser realizados com segurança no cabeceira⁵.

A técnica baseada em agulha biópsia requer intensa lipoaspiração que pode destruir a integridade do tecido, e ele geralmente recupera uma pequena quantidade de tecido (100-500 mg)⁶. Estas amostras de tecido podem não ser apropriadas para pesquisas complexas. Além disso, em comparação com a técnica de agulha-baseado, biópsias de gordura subcutâneas cirúrgicas podem oferecer amostras de tecido que podem extrair uma imagem mais completa de vários índices inflamatórios (por exemplo, sinalização de células B e T); Regulamento do citoesqueleto; vias de celulares; vias metabólicas de lipídios, carboidratos e aminoácidos; e fosforilação oxidativa caminhos⁴. Além disso, a técnica baseada na agulha inclui um maior risco de contaminação de células do sangue do que o cirúrgico one⁴, enquanto fornece pouca informação sobre as regiões fibróticas do tecido^4,7,8 .

Geralmente, uma biópsia cirúrgica de tecido adiposo inclui um tratamento de diatermia para cauterização de vasos sanguíneos para evitar sangramento excessivo⁹. A diatermia é também usada para queimar e destruir os tecidos afetados por tumores e verrugas ou tecidos que são infectados pela doença⁹. Esta técnica é especialmente aplicável em neurocirurgia e olho cirurgia⁹.

O uso excessivo de diatermia pode levar à formação de tecido necrótico, causando infecções e retardar a cicatrização do processo¹⁰. De fato, efeitos secundários tais como o flash dispara e lesões de pele, no tecido já foram relatados após diatermia⁹. Além disso, as preocupações têm sido levantadas sobre a toxicidade do fumo cirúrgico lançado pela diatermia no ambiente de cirurgia, que podem ser inaladas pelo participante/paciente e o pessoal operacional⁹. Na verdade, o uso de diatermia pode causar toxicidade do ar na sala de operação igual àquela produzida por fumar seis cigarros¹¹ e, apesar de salas de cirurgia, geralmente, têm sistemas de boa ventilação, a contaminação pode durar pelo menos 20 min¹² . No entanto, em pacientes a realização de uma cirurgia de amigdalectomia, o método de diatermia mostrou menos, mas a dor pós-operatória, não-significativas¹³ e sangramento¹⁴ que o método de hemostasia clássico da ligadura. Em geral, existem evidências relativas diferenças na dor pós-operatória e sangramento taxas após biópsias de tecido adiposo em indivíduos saudáveis, mal. Dada a falta de provas e os efeitos colaterais da diatermia, padronização de um método não-diatermia para biopsia de tecido adiposo é garantida. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi padronizar uma técnica cirúrgica para biópsia de tecido adiposo abdominal subcutâneo, realizada sob anestesia local, usando um método não-diatermia em homens saudáveis. Além disso, descrevem os procedimentos para coleta de tecido para determinar a expressão de RNAm e concentração de proteína e realizar análises histológicas.

Protocolo

o estudo em conformidade com as normas estabelecidas pela declaração de Helsinque e foi aprovado pela Universidade de Tessália, departamento de ciência do exercício, Βiοethics Comissão.

1. preparação da cirurgia equipamentos e consumíveis

1. posicionar um campo cirúrgico desinfectado em um carrinho 4 rodas de Mayo cirúrgico.
2. Posicionar os seguintes consumíveis e equipamentos cirúrgicos em um carrinho 4 rodas de Mayo cirúrgico:
   Um par de tesouras de funcionamento em linha reta (15 cm)
   um bisturi (n. º 11)
   pega um bisturi
   um par de tesouras curvas (14 cm)
   pinça um mosquito
   um par de pinças de Kocher
   uma pinça cirúrgica
   iodo-povidona (em uma estéril gaze)
   uma sutura (4.0)
   um par de tesouras reta (11 cm)
   de uma agulha (15 cm)
   cinco gazes estéreis
   uma gaze estéril adesivo
   uma seringa de 10 mL com uma agulha desinfectada
   10 mL de xilocaína 2% (sem adrenalina)
   um par de luvas cirúrgicas desinfectadas
3. posicionar os seguintes materiais num banco separado:
   dois tubos microcentrifuga
   um tubo contendo 5 mL de formol a 10%
   um pequeno recipiente contendo 50-100 mL de nitrogênio líquido a-190 ° C.

2. Preparação dos participantes

1. ter os participantes seguem um rápido 8 h ¹⁵ antes do procedimento de biópsia.
2. Tem participantes abster-se de exercício físico, estresse excessivo, álcool e ativo e tabagismo passivo 72 h antes da biópsia ^{16 , 17}.

3. Realizar a biópsia de tecido adiposo subcutâneo

1. posicionar o participante na cama cirúrgica em posição supina.
2. Desinfectar a região da incisão utilizando iodo-povidona.
3. Injetar 10 mL de xilocaína 2% (sem adrenalina) lentamente e firmemente ¹⁸ na região selecionada para servir como anestesia local.
4. Posicionar um campo cirúrgico estéril sobre a área a cobrir o corpo do participante, excluindo a região da incisão.
5. Pelo menos 3-5 min depois, aplique pressão com um par de pinças para a área de anestesia local e perguntar o participante se ele sente alguma dor ¹⁹ para garantir que a anestesia local foi alcançada.
6. Anexar o bisturi n º 11 para a alça para bisturi.
7. Criar uma incisão de 2 a 2,5 cm de comprimento, 3 a 5 cm para a esquerda ou direita do umbigo.
8. Remover o tecido subcutâneo com um par de reta 15 cm, funcionamento tesoura.
9. Uma vez que o tecido adiposo é revelado, capturá-lo com um par de pinças e um par de tesouras curvas 14 cm.
10. Cortar e remover cerca de 1 g de tecido adiposo.
11. Após a remoção de tecido, coloque gazes estéreis sobre a incisão para obter hemostasia.
12. Quando a hemostasia é confirmada, capturar a sutura 4.0 com uma agulha 14 cm e a pele com um par de pinças cirúrgicas até o tecido subcutâneo é visível.
13. Inserir a agulha de sutura da pele, se movendo em direção ao tecido subcutâneo, enquanto a pele e subcutâneo estão alinhados.
14. Com a agulha de sutura, siga uma técnica de zig-zag contínuo para o tecido subcutâneo até expulsos externamente a pele. Continue até que a incisão da pele é fechada.
15. Externamente amarrar a sutura.
16. Limpar a área da incisão com soro fisiológico e cobri-lo com uma gaze estéril adesivo.

4. Deposição do tecido

1. separar o tecido adiposo coletado em três partes: 150, 350 e 500 mg.
2. Posicionar as peças de mg 150 e 350 de tecido de amostra em tubos microcentrifuga.
3. Tubos de microcentrifuga mergulhar os dois no recipiente pequeno com o nitrogênio líquido a-190 ° C, até a deposição final em um congelador a -80 ° C.
   Nota: com antecedência, usar uma agulha estéril para perfurar um furo pequeno em tubos de microcentrifuga para evitar o fracasso da Copa durante a imersão dos tubos microcentrifuga no nitrogênio líquido a -190 ° C.
4. Mergulhe a peça de 500 mg de tecido de amostra-a ser usado para análise histológica-em um tubo contendo 5 mL de formol a 10%.
   Nota: Use a pinça mosquito apenas em casos de sangramento excessivo durante a cirurgia. Em tais casos, capturar o navio com a pinça mosquito ligate e fechar até alcançar a hemostasia.

Resultados

As características dos participantes são fornecidas na tabela 1. Os pontos na área da incisão caiu dentro dos próximos dias 8-12. Nós completamos um total de 115 biópsias do tecido adiposo subcutâneo utilizando o método não-diatermia de biópsia cirúrgica abdominal em homens adultos saudáveis (idade: 35,2 ± 6,9 anos; índice de massa corporal: 27,3 ± 4,4; e percentual de gordura corporal: 27,0 ± 9,0%). Pós-biópsia de sangramento excessivo foi observada em...

Discussão

O objetivo deste estudo foi padronizar uma técnica cirúrgica para biópsia de tecido adiposo abdominal subcutâneo, realizada sob anestesia local com um método não-diatermia em homens saudáveis. Diatermia é comumente usada na sala de cirurgia; no entanto, podem ocorrer efeitos secundários possíveis (ou seja, flash dispara e toxicidade ambiental)⁹ e atrasos na cura¹⁰ . Estes efeitos indesejados de diatermia podem gerar riscos para a saúde para o pessoal ope...

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
Disinfected surgical field	Hartmann	23516-00
Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo)	Medical Device Depot Inc.	32000
Operating Scissors straight 15 cm	Karl Storz	791903
Scalpel No 11	Swann-Morton	203	Bipolar, catalog number 429011
Scarpel handle No 3	Karl Storz	488090
Scissors curved 14 cm	Karl Storz	511514, 752918
Mosquito forceps	Karl Storz	535012
Tweezers Kocher	Karl Storz	530416	Bipolar, catalog number 830316
Surgical tweezers	Karl Storz	793216	Bipolar, catalog number 831016
Povidone-iodine	Various	Not applicable
Suture 4.0 Vicryl	Johnsons	V4970H
Scissors straight 11 cm	Karl Storz	512511 DS
Needle holder 15 cm	Karl Storz	515515	Bipolar, catalog number 213015
Sterile gauzes	Hartmann	3021
Αdhesive sterile gauze	Digas medical equipment	2889
10 mL syringe with disinfected needle	Alpha medical solutions	10310-55-0010
2%-xylocaine (no adrenaline)	Various	Not applicable
Sterile surgical gloves	Sempermed	10001
Eppendorf tubes	Kartell	16283
10% formalin	Alpha medical solutions	11016-30-2909
Tubes 120 mL	Digas medical equipment	9025
Liquid nitrogen at -190°C	Revival	Not applicable