Una tecnica per la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo addominale tramite un metodo Non-diatermia

Riepilogo

Abbiamo standardizzato una biopsia del tessuto adiposo addominale utilizzando un metodo non-diatermia eseguito in anestesia locale. Tre casi di eccessivo post-operazione sanguinamento fuori 115 operazioni (2,61%) si è verificato. Concludiamo che una biopsia chirurgica di tessuto adiposo addominale utilizzando un metodo non-diatermia può essere tranquillamente applicata agli uomini sani.

Abstract

Le biopsie del tessuto adiposo di offrire campioni di tessuto che, al momento dell'analisi, possono fornire panoramiche penetranti dei meccanismi relativi al metabolismo e malattia. Per ottenere le biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo nella zona addominale, i ricercatori e i medici utilizzano un chirurgica o una tecnica basata su ago. Tuttavia, le biopsie grasse sottocutanee chirurgiche in grado di offrire campioni di tessuto che possono fornire una panoramica più completa delle complessità di indici biologici nel tessuto adiposo bianco. Di solito, una biopsia chirurgica del tessuto adiposo comprende un trattamento di diatermia per cauterizzatori vasi sanguigni prevenire il sanguinamento eccessivo. Tuttavia, sono stati segnalati effetti collaterali, come il flash si attiva e le lesioni cutanee nel tessuto, dopo la diatermia. Di conseguenza, abbiamo mirato a standardizzare una biopsia del tessuto adiposo addominale chirurgica eseguita in anestesia locale utilizzando un metodo non-diatermia. Abbiamo condotto 115 biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo in uomini in buona salute usando un metodo non-diatermia addominale biopsia chirurgica. I nostri risultati hanno mostrato tre casi di eccessivo post-operazione sanguinamento fuori 115 operazioni (2,61%). In conclusione, il nostro biopsia chirurgica standardizzata del tessuto adiposo sottocutaneo addominale utilizzando un metodo non-diatermia può applicarsi sicuro per uomini sani al capezzale, con effetti collaterali minimi.

Introduzione

Le biopsie del tessuto adiposo di offrire campioni di tessuto che, al momento dell'analisi, possono fornire una panoramica penetrante dei meccanismi relativi al metabolismo e malattia. Per esempio, essi sono utilizzati per seno cancro tumore identificazione¹, acido grasso composizione esame²e ricerca sulle malattie metaboliche ed ormonali importanti vie³. Per ottenere le biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo nella zona addominale, i ricercatori e i medici utilizzano un chirurgica o una tecnica basata su ago. Tuttavia, le biopsie grasse sottocutanee chirurgiche in grado di offrire campioni di tessuto che possono fornire una panoramica più completa dei complessi meccanismi biologici [ad es., espressione dell'acido ribonucleico (mRNA) di messenger, l'analisi istologica, ecc.]⁴ . Essi sono stati utilizzati in precedenza in adulti sani⁴ e possono essere effettuate sicuro al comodino⁵.

La tecnica basata su ago biopsia richiede intensa liposuzione che può distruggere l'integrità del tessuto, e di solito recupera una piccola quantità di tessuto (100-500 mg)⁶. Questi campioni di tessuto possono non essere appropriati per studi di ricerca complessa. Inoltre, rispetto alla tecnica basata su ago, biopsie grasse sottocutanee chirurgiche possono offrire campioni di tessuto che possono disegnare un quadro più completo di parecchi indici infiammatori (per esempio, B - e T-cell signaling); regolazione del citoscheletro; vie cellulari; vie metaboliche di lipidi, carboidrati e aminoacidi; e vie di fosforilazione ossidativa⁴. Inoltre, la tecnica basata su ago include un elevato rischio per contaminazione delle cellule del sangue che chirurgico one⁴, fornendo poche informazioni sulle regioni fibrotiche del tessuto^4,7,8 .

Di solito, una biopsia chirurgica del tessuto adiposo comprende un trattamento di diatermia per cauterizzazione vasi sanguigni per evitare eccessivo sanguinamento⁹. Una diatermia è anche utilizzato per bruciare e distruggere i tessuti colpiti da neoplasie e verruche o tessuti che sono infettati da malattia⁹. Questa tecnica è particolarmente applicabile in neurochirurgia e occhio chirurgia⁹.

L'uso eccessivo della diatermia può portare alla formazione di tessuto necrotico, che causano infezioni e ritardando il processo curativo¹⁰. Infatti, sono stati segnalati effetti collaterali quali flash scatta e lesioni cutanee nel tessuto seguito diatermia⁹. Inoltre, sono state sollevate preoccupazioni circa la tossicità dei fumi chirurgici rilasciata dalla diatermia l'ambiente della chirurgia, che può essere inalata dal partecipante/paziente e il personale operativo⁹. Infatti, l'uso della diatermia può causare la tossicità di aria in sala operatoria pari a quella prodotta dai fumatori sigarette sei¹¹ e, anche se sale operatorie in genere hanno buona ventilazione sistemi, la contaminazione può durare per almeno 20 min¹² . Tuttavia, in pazienti di intraprendere un intervento chirurgico di tonsillectomia, il metodo di diatermia ha mostrato meno, ma non significativo dolore post-operatorio¹³ e spurgo¹⁴ rispetto al metodo di emostasi di legatura classico. Nel complesso, la prova per quanto riguarda le differenze nel dolore post-operatorio e sanguinamento tariffe dopo le biopsie di tessuto adiposo in individui in buona salute a malapena esiste. Data la mancanza di prove e gli effetti collaterali di diatermia, è opportuna una standardizzazione di un metodo non-diatermia per biopsia del tessuto adiposo. Di conseguenza, lo scopo di questo studio era di standardizzare una tecnica chirurgica per la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo addominale, eseguita in anestesia locale utilizzando un metodo non-diatermia in uomini in buona salute. Inoltre, abbiamo delineare le procedure per la raccolta di tessuto per determinare l'espressione di mRNA e concentrazione nella proteina e per eseguire analisi istologiche.

Protocollo

lo studio conformi agli standard stabiliti dalla dichiarazione di Helsinki ed è stato approvato dall'Università della Tessaglia, dipartimento di scienze motorie, Βiοethics Comitato.

1. preparazione della chirurgia attrezzature e consumabili

1. posizionare un campo chirurgico disinfettato su un basamento di Mayo chirurgico 4 ruote.
2. Posizionare i seguenti materiali di consumo e apparecchiature chirurgiche su un basamento di Mayo chirurgico 4 ruote:
   Un paio di Forbici rette operative (15cm)
   un bisturi (n. 11)
   manico per uno bisturi
   un paio di forbici curve (14 cm)
   forcipe una zanzara
   un paio di pinzette Kocher
   una pinzetta chirurgica
   Povidone-iodio (su una sterile garza)
   una sutura (4.0)
   un paio di Forbici rette (11 cm)
   un ago titolare (15cm)
   cinque garze sterili
   una garza sterile adesivo
   una siringa 10 mL con un ago disinfettato
   10 mL di lidocaina 2% (senza adrenalina)
   uno paio di guanti chirurgici disinfettati
3. i seguenti materiali di posizione su un banco separato:
   due provette per microcentrifuga
   una provetta contenente 5 mL di formalina al 10%
   un piccolo contenitore contenente 50-100 mL di azoto liquido a-190 ° C.

2. La preparazione dei partecipanti

1. chiedere ai partecipanti di seguire un veloce 8 h ¹⁵ prima della procedura di biopsia.
2. Avere partecipanti astenersi da esercizio fisico, stress eccessivo, alcool e attivo e fumo passivo 72 h prima la biopsia ^{16 , 17}.

3. Eseguire la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo

1. posizionare il partecipante sul letto chirurgico in posizione supina.
2. Disinfettare la regione dell'incisione con povidone-iodio.
3. Iniettare 10 mL di lidocaina 2% (senza adrenalina) lentamente e costantemente ¹⁸ nella regione selezionata per servire come anestesia locale.
4. Posizionare un campo chirurgico sterile sull'area per coprire il corpo del partecipante, escluse la regione dell'incisione.
5. Almeno 3-5 min in seguito, applicare pressione con un paio di pinzette per l'area di anestesia locale e chiedere il partecipante se si sente alcun dolore ¹⁹ per garantire che l'anestesia locale è stato raggiunto.
6. Allegare il bisturi n. 11 al manico bisturi.
7. Creare un'incisione di 2-2.5 cm di lunghezza, 3-5 cm a sinistra o destra dell'ombelico.
8. Rimuovere il tessuto sottocutaneo con un paio di cm 15 dritti forbici di funzionamento.
9. Una volta che il tessuto adiposo viene rivelato, catturarlo con un paio di pinzette e un paio di forbici curve 14 cm.
10. Tagliare e rimuovere circa 1 g di tessuto adiposo.
11. a seguito di rimozione del tessuto, posizionare garze sterili sopra l'incisione per ottenere l'emostasi.
12. Quando l'emostasi è confermato, catturare la sutura 4.0 con un ago di 14 cm e la pelle con un paio di pinzette chirurgiche fino a rendere visibile il tessuto sottocutaneo.
13. Inserire l'ago di sutura nella pelle, in movimento verso il tessuto sottocutaneo mentre la pelle e sottocutaneo sono strettamente allineati.
14. Con l'ago di sutura, seguire una tecnica continua a zig-zag nel tessuto sottocutaneo fino a guidato esternamente fuori la pelle. Continuare fino a quando l'incisione cutanea è chiuso.
15. Esternamente legare la sutura.
16. Pulire la zona dell'incisione con soluzione salina e coprirlo con una garza sterile adesiva.

4. Deposizione del tessuto

1. separare il tessuto adiposo raccolto in tre pezzi: 150, 350 e 500 mg.
2. Situare i 150 e 350 mg di tessuto campione di microcentrifuga.
3. Microcentrifuga immergere i due nel piccolo contenitore con l'azoto liquido a-190 ° C fino a deposizione finale in un congelatore a -80 ° C.
   Nota: In anticipo, usi un ago sterile per perforare un piccolo foro nei tubi del microcentrifuge per evitare il fallimento di Coppa durante l'immersione delle provette microcentrifuga nell'azoto liquido a -190 ° C.
4. Immergere il pezzo di 500 mg di campione tessuto-da utilizzare per l'analisi istologica-in una provetta contenente 5 mL di formalina al 10%.
   Nota: Utilizzare il forcipe di zanzara solo in caso di eccessivo sanguinamento durante l'intervento chirurgico. In tali casi, catturare la nave con il forcipe di zanzara per legare e chiudere fino a quando emostasi.

Risultati

Le caratteristiche dei partecipanti sono fornite nella tabella 1. I punti di sutura nella zona dell'incisione è caduto entro i prossimi 8-12 giorni. Abbiamo completato un totale di 115 biopsie di tessuto adiposo sottocutaneo, utilizzando il metodo di non-diatermia biopsia chirurgica addominale in uomini adulti sani (età: 35,2 ± 6,9 anni; indice di massa corporea: 27,3 ± 4.4; e percentuale di grasso corporeo: 27,0 ± 9,0%). Eccessivo sanguinamento post-biopsia è stato...

Discussione

Lo scopo di questo studio era di standardizzare una tecnica chirurgica per la biopsia del tessuto adiposo sottocutaneo addominale, eseguita in anestesia locale con un metodo non-diatermia in uomini in buona salute. Diatermia è comunemente usato in sala operatoria; Tuttavia, possono verificarsi ritardi nella guarigione¹⁰ e possibili effetti collaterali (cioè, flash scatta e tossicità ambientale)⁹ . Questi effetti indesiderati di diatermia possono generare rischi ...

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Disinfected surgical field	Hartmann	23516-00
Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo)	Medical Device Depot Inc.	32000
Operating Scissors straight 15 cm	Karl Storz	791903
Scalpel No 11	Swann-Morton	203	Bipolar, catalog number 429011
Scarpel handle No 3	Karl Storz	488090
Scissors curved 14 cm	Karl Storz	511514, 752918
Mosquito forceps	Karl Storz	535012
Tweezers Kocher	Karl Storz	530416	Bipolar, catalog number 830316
Surgical tweezers	Karl Storz	793216	Bipolar, catalog number 831016
Povidone-iodine	Various	Not applicable
Suture 4.0 Vicryl	Johnsons	V4970H
Scissors straight 11 cm	Karl Storz	512511 DS
Needle holder 15 cm	Karl Storz	515515	Bipolar, catalog number 213015
Sterile gauzes	Hartmann	3021
Αdhesive sterile gauze	Digas medical equipment	2889
10 mL syringe with disinfected needle	Alpha medical solutions	10310-55-0010
2%-xylocaine (no adrenaline)	Various	Not applicable
Sterile surgical gloves	Sempermed	10001
Eppendorf tubes	Kartell	16283
10% formalin	Alpha medical solutions	11016-30-2909
Tubes 120 mL	Digas medical equipment	9025
Liquid nitrogen at -190°C	Revival	Not applicable