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Dans cet article

  • Résumé
  • Résumé
  • Introduction
  • Protocole
  • Résultats
  • Discussion
  • Déclarations de divulgation
  • Remerciements
  • matériels
  • Références
  • Réimpressions et Autorisations

Résumé

Nous avons standardisé une biopsie de tissu adipeux à l’aide d’une méthode non-diathermie réalisée sous anesthésie locale. Trois cas de post-opération excessive saignements hors de 115 opérations (2,61 %) s’est produite. Nous concluons qu’une biopsie chirurgicale de tissu adipeux à l’aide d’une méthode non-diathermie peut être appliquée en toute sécurité à des hommes en bonne santé.

Résumé

Des biopsies de tissu adipeux offrent des échantillons de tissus qui, après analyse, peuvent fournir un aperçu perspicace des mécanismes relatifs au métabolisme et à la maladie. Pour obtenir des biopsies de tissu adipeux sous-cutané dans la région abdominale, chercheurs et médecins utilisent soit une chirurgie ou une technique axée sur l’aiguille. Toutefois, biopsies de graisse sous-cutanée chirurgicales peuvent offrir des échantillons de tissus qui peuvent fournir un aperçu plus complet de la complexité des indices biologiques dans le tissu adipeux blanc. Habituellement, une biopsie chirurgicale du tissu adipeux comprend un traitement de diathermie pour cautérisation des vaisseaux sanguins prévenir les saignements excessifs. Néanmoins, les effets secondaires, tels que le flash se déclenche et lésions de la peau dans les tissus, ont été signalés après la diathermie. Donc, nous avons cherché à normaliser une biopsie de tissu adipeux chirurgicale réalisée sous anesthésie locale à l’aide d’une méthode non-diathermie. Nous avons effectué des biopsies de tissu adipeux sous-cutané 115 chez les hommes en bonne santé en utilisant une méthode de biopsie chirurgicale abdominale non-diathermie. Nos résultats ont montré trois cas de post-opération excessive saignements hors de 115 opérations (2,61 %). En conclusion, notre biopsie chirurgicale standardisée du tissu adipeux sous-cutané abdominal à l’aide d’une méthode non-diathermie peut être en toute sécurité appliquée à des hommes en bonne santé au chevet des patients, avec des effets secondaires minimaux.

Introduction

Des biopsies de tissu adipeux offrent des échantillons de tissus qui, après analyse, peuvent donner un aperçu perspicace des mécanismes relatifs au métabolisme et à la maladie. Par exemple, ils sont utilisés pour breast cancer tumeur identification1acide gras composition examen2et recherche sur les maladies métaboliques et hormonales importantes voies3. Pour obtenir des biopsies de tissu adipeux sous-cutané dans la région abdominale, chercheurs et médecins utilisent soit une chirurgie ou une technique axée sur l’aiguille. Toutefois, les biopsies de graisse sous-cutanée chirurgicales peuvent offrir des échantillons de tissus qui peuvent fournir un aperçu plus complet des mécanismes biologiques complexes [p. ex., les expression de l’acide ribonucléique (ARNm) Messager, l’analyse histologique, etc.]4 . Ils avaient déjà été utilisés dans les adultes en bonne santé4 et peuvent être effectuées en toute sécurité au chevet5.

La technique de l’aiguille de biopsie nécessite liposuccion intense qui peut détruire l’intégrité du tissu, et il récupère généralement une petite quantité de tissu (100-500 mg)6. Ces échantillons de tissus peuvent ne pas convenir pour les études de recherche complexes. En outre, par rapport à la technique axée sur l’aiguille, biopsies de graisse sous-cutanée chirurgicales peuvent offrir des échantillons de tissus qui peuvent dessiner un tableau plus complet de plusieurs indices inflammatoires (p. ex. signalisation de cellules B et T) ; Règlement du cytosquelette ; voies cellulaires ; voies métaboliques des lipides, des glucides et des acides aminés ; et la phosphorylation oxydative voies4. La technique axée sur l’aiguille comprend aussi un risque accru de contamination de cellules sanguines que le chirurgicale un4, tout en offrant peu d’informations sur les régions fibreuses du tissu4,7,8 .

Habituellement, une biopsie chirurgicale du tissu adipeux comprend un traitement de diathermie pour cautérisation des vaisseaux sanguins pour prévenir les saignements excessifs9. Une diathermie est également utilisé pour brûler et détruire les tissus touchés par les tumeurs et les verrues ou les tissus qui sont infectés par la maladie,9. Cette technique est particulièrement applicable à la neurochirurgie et des yeux chirurgie9.

L’utilisation excessive de diathermie peut conduire à la formation des tissus nécrosés, provoquant des infections et retarder la guérison de processus10. En effet, les effets secondaires tels que le flash se déclenche et lésions de la peau dans le tissu ont été signalés suite diathermie9. En outre, des préoccupations ont été soulevées concernant la toxicité de la fumée chirurgicale libérée par diathermie dans l’environnement de la chirurgie, qui peut-être être inhalée par le participant/patient et le fonctionnement du personnel9. En effet, diathermie peut entrainer une toxicité de l’air au bloc opératoire égale à celle produite par fumer des cigarettes six11 et, bien que les salles d’opération ont généralement des systèmes de ventilation bonne, la contamination peut durer pendant au moins 20 min12 . Cependant, chez les patients entreprendre une chirurgie de l’amygdalectomie, la méthode de diathermie a montré moins, mais non significative la douleur post-opératoire13 et saignements14 que la méthode d’hémostase ligature classique. Dans l’ensemble, il existe des preuves en ce qui concerne les différences dans la douleur postopératoire et taux des saignements après biopsies de tissus adipeux chez les individus sains à peine. Compte tenu de l’absence de preuves et les effets secondaires de diathermie, normalisation d’une méthode non-diathermie pour la biopsie de tissu adipeux est justifiée. Par conséquent, le but de cette étude était de normaliser une technique chirurgicale pour la biopsie de tissu adipeux sous-cutané, réalisée sous anesthésie locale en utilisant une méthode non-diathermie chez les hommes en bonne santé. En outre, nous exposons les modalités de prélèvement tissulaire afin de déterminer l’expression de l’ARNm et la concentration de protéines et d’effectuer des analyses histologiques.

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Protocole

l’étude soient conformes aux normes définies par la déclaration d’Helsinki et a été approuvée par l’Université de Thessalie, Département des sciences de l’exercice, Βiοethics Comité.

1. préparation du matériel de chirurgie et de consommables

  1. positionner un champ opératoire désinfecté sur un stand de Mayo chirurgical de 4 roues.
  2. Placer les consommables suivants et matériel chirurgical sur un stand de Mayo chirurgical 4 roues :
    Une paire de ciseaux d’exploitation droites (15 cm)
    un scalpel (n11)
    poignée un bistouri
    une paire de ciseaux courbes (14 cm)
    forceps un moustique
    une paire de pinces de Kocher
    une pince chirurgicale
    Povidone-iode (sur une solution stérile gaze)
    une suture (4.0)
    une paire de ciseaux droites (11 cm)
    un porte-aiguille (15 cm)
    cinq gazes stériles
    une gaze stérile adhésive
    une seringue de 10 mL avec une aiguille désinfectée
    10 mL de xylocaïne 2 % (pas d’adrénaline)
    un paire de gants chirurgicaux désinfectés
  3. positionner les matériaux suivants sur un banc séparé :
    deux tubes de microcentrifuge
    un tube contenant 5 mL de formol 10 %
    un petit récipient contenant 50 à 100 mL d’azote liquide à-190 ° C.

2. Préparation des Participants

  1. demandez aux participants de suivre un rapide 8 h 15 avant la procédure de biopsie.
  2. Ont les participants de s’abstenir de l’exercice physique, des facteurs de stress excessifs, l’alcool et active et tabagisme passif 72 h avant la biopsie 16 , 17.

3. Effectuer la biopsie de tissu adipeux sous-cutané

  1. positionner le participant sur le lit chirurgical dans une position en décubitus dorsal.
  2. Désinfecter la région de l’incision à l’aide de povidone-iode.
  3. Injecter 10 mL de xylocaïne 2 % (pas d’adrénaline) lentement et régulièrement 18 dans la région sélectionnée pour servir d’anesthésie locale.
  4. Placer un champ opératoire stérile sur la zone à couvrir le corps de l’adhérent, à l’exclusion de la région de l’incision.
  5. Au moins 3-5 min après, appliquer une pression avec une paire de pinces sur le domaine de l’anesthésie locale et demander au participant si il sent toute douleur 19 pour s’assurer que l’anesthésie locale est parvenu à.
  6. Fixez le bistouri n ° 11 sur le manche de bistouri Swann-Morton.
  7. Créer une incision de 2 à 2,5 cm de longueur, 3 à 5 cm à gauche ou à droite de l’ombilic.
  8. Enlever les tissus sous-cutanés avec une paire de droite 15 cm ciseaux de fonctionnement.
  9. Une fois que le tissu adipeux se révèle, le capturer avec une paire de pinces à épiler et une paire de ciseaux courbes 14 cm.
  10. Couper et enlever environ 1 g de tissu adipeux.
  11. Après le retrait de tissu, placez des gazes stériles sur l’incision pour atteindre l’hémostase.
  12. Lorsque l’hémostase est confirmée, capturer la suture 4.0 avec une aiguille de 14 cm et la peau avec une paire de pinces chirurgicales jusqu'à ce que le tissu sous-cutané est visible.
  13. Insérer l’aiguille à suture de la peau, se déplaçant vers le tissu sous-cutané, tandis que le cutanées et sous-cutanées sont étroitement liés.
  14. Avec l’aiguille à suture, suivre une technique continu zig-zag dans le tissu sous-cutané jusqu'à ce que repoussés à l’extérieur de la peau. Continuer jusqu'à la fermeture de l’incision cutanée.
  15. Cravate extérieurement la suture.
  16. Nettoyer la zone de l’incision avec du sérum physiologique et le recouvrir d’une gaze stérile adhésive.

4. Déposition du tissu

  1. séparer le tissus adipeux prélevés en trois morceaux : 150, 350 et 500 mg.
  2. Placer les morceaux de mg 150 et 350 du tissu de l’échantillon dans des tubes de microcentrifuge.
  3. Plonger les deux tubes de microcentrifuge dans le petit récipient avec l’azote liquide à-190 ° C jusqu’au dépôt final dans un congélateur à -80 ° C.
    Remarque : À l’avance, utilisez une aiguille stérile pour percer un petit trou dans des microtubes à centrifuger pour éviter les pannes de la tasse au cours de l’immersion des tubes de microcentrifuge dans l’azote liquide à -190 ° C.
  4. Immerger la pièce de 500 mg de tissu échantillon-à utiliser pour l’analyse histologique-dans un tube contenant 5 mL de 10 % de formol.
    Remarque : Utiliser la pince de moustiques qu’en cas de saignements excessifs pendant la chirurgie. Dans ce cas, saisir le navire avec la pince de moustique pour ligaturer et fermer jusqu'à l’obtention d’hémostase.

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Résultats

Les caractéristiques des participants sont fournis dans le tableau 1. Les points de suture dans la zone de l’incision est tombé dans les prochains jours 8-12. Nous avons réalisé un total de 115 biopsies de tissu adipeux sous-cutané, à l’aide de la méthode de biopsie chirurgicale abdominale non-diathermie chez l’homme adulte en bonne santé (âge : 35,2 ± 6,9 ans ; indice de masse corporelle : 27,3 ± 4,4 ; et le taux de graisse corporelle : 27,0 ± 9,0 ...

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Discussion

Le but de cette étude était de normaliser une technique chirurgicale pour la biopsie de tissu adipeux sous-cutané, réalisée sous anesthésie locale avec une méthode non-diathermie chez les hommes en bonne santé. Diathermie est couramment utilisé dans la salle d’opération ; Cependant, les effets secondaires possibles (p. ex., flash se déclenche et toxicité environnementale)9 et les retards dans la guérison de10 peuvent se produire. Ces effets indésir...

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont aucun intérêt financier concurrentes.

Remerciements

Ce travail a reçu des fonds de Horizon 2020 (subvention, contrat n° 645710) et la 7e programme-cadre de l’Union européenne (subvention accords no 612547 et 319010) des Programmes. Les auteurs tiennent à remercier Dr Fotini Sourli-Chasioti pour l’aide à la procédure de biopsie. Les auteurs remercient également M. Yiorgos Paterakis pour son aide précieuse dans la préparation de la vidéo.

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matériels

NameCompanyCatalog NumberComments
 Disinfected surgical field Hartmann23516-00
Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo)Medical Device Depot Inc.32000
Operating Scissors straight 15 cmKarl Storz791903
Scalpel No 11 Swann-Morton203Bipolar, catalog number 429011
Scarpel handle No 3Karl Storz488090
Scissors curved 14 cmKarl Storz511514, 752918
Mosquito forcepsKarl Storz535012
Tweezers Kocher Karl Storz530416Bipolar, catalog number 830316
Surgical tweezersKarl Storz793216Bipolar, catalog number 831016
Povidone-iodine VariousNot applicable
Suture 4.0 VicrylJohnsonsV4970H 
Scissors straight 11 cmKarl Storz512511 DS
Needle holder 15 cmKarl Storz515515Bipolar, catalog number 213015
 Sterile gauzesHartmann3021
Αdhesive sterile gauze Digas medical equipment2889
10 mL syringe with disinfected needleAlpha medical solutions10310-55-0010
2%-xylocaine (no adrenaline)VariousNot applicable
Sterile surgical gloves Sempermed10001
Eppendorf tubesKartell16283
10% formalin Alpha medical solutions11016-30-2909
Tubes 120 mLDigas medical equipment9025
Liquid nitrogen at -190°CRevivalNot applicable

Références

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  3. Wang, Y., et al. Muscle and adipose tissue biopsy in older adults with type 2 diabetes . J Diabetes Mellitus. 1, 27-35 (2011).
  4. Mutch, D. M., et al. Needle and surgical biopsy techniques differentially affect adipose tissue gene expression profiles. Am J Clin Nutr. 89, 51-57 (2009).
  5. Ikeda, S., Sekijima, Y., Tojo, K., Koyama, J. Diagnostic value of abdominal wall fat pad biopsy in senile systemic amyloidosis. Amyloid. 18, 211-215 (2011).
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  9. Fitzgerald, J. E., Malik, M., Ahmed, I. A single-blind controlled study of electrocautery and ultrasonic scalpel smoke plumes in laparoscopic surgery. Surg Endosc. 26, 337-342 (2012).
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