Adipose-Derived Stem Cell Differentiation to the Adipogenic Lineage

Comience sembrando una placa de seis pocillos con 10, 000 células madre derivadas de tejido adiposo por centímetro cuadrado. Una vez que las células se vuelven 60 a 80% confluentes, agregue el medio de diferenciación. El día 12, lavar las células con PBS e incubarlas con 500 microlitros de formalina al 4% durante una hora a temperatura ambiente.

Una vez que las células se lavan con agua destilada, lávelas con isopropanol al 60% durante cinco minutos y déjelas secar. Agregue 500 microlitros de colorante rojo O al 0,5% de aceite diluido en 60% de alcohol. Después de la incubación a temperatura ambiente, lave los pocillos dos veces con un mililitro de agua destilada y observe la placa bajo un microscopio invertido.

Las células madre derivadas de tejido adiposo se diferenciaron hacia el linaje adipogénico mostrando un tamaño celular reducido y una forma redondeada en 48 horas. Después de siete días, las vesículas lipídicas eran visibles, que fueron positivas para la tinción de rojo aceite 12 días después de la diferenciación.