Comience administrando 0,3 miligramos por mililitro de buprenorfina por vía subcutánea a la rata anestesiada. Monta la rata en el marco estereotáxico. A continuación, usa una navaja de afeitar para afeitar el pelaje de la cabeza.
Desinfecte la piel con tres rondas alternas de povidona yodada al 10% y alcohol, utilizando hisopos de algodón estériles, frotando en diferentes direcciones durante tres a cinco segundos cada vez. Aplique ungüento para los ojos para prevenir la sequedad. Ahora, haga una incisión de dos centímetros a lo largo de la línea media de la cabeza con un bisturí estéril, luego limpie el cráneo meticulosamente con hisopos estériles y solución salina.
Identifique el bregma con una aguja de jeringa Hamilton de 10 microlitros montada en el dispositivo estereotáxico y configúrela en 00. Mueva el dispositivo en coordenadas antero, posteriores y laterales. Crea un agujero de rebaba de un milímetro con un taladro dental.
Cargue cuatro microlitros del cóctel de liberación en la jeringa Hamilton de 10 microlitros, luego baje con cuidado la aguja con un borde romo o cónico para hacer contacto con la duramadre. Inserte la aguja a la profundidad deseada de 3,5 milímetros. Infundir dos microlitros del cóctel de liberación a razón de un microlitro por minuto.
Deje la aguja en su lugar durante dos minutos más, luego recupérela lentamente para evitar que salga a la superficie el cóctel de liberación. Suturar la incisión con nylon 5/0 y limpiar el área suturada con un antiséptico. A continuación, transfiera al animal al área de monitoreo posterior a la operación.
La inyección de más de tres microlitros del cóctel de liberación provocó lesiones mecánicas inespecíficas. La inyección de dos microlitros del cóctel condujo a la aparición de grupos inmunopositivos de doble cortina que fueron visibles incluso después de ocho meses. La inmunotinción cerebral reveló sitios de denudación en la capa ependimaria, cerca del nivel de las inyecciones.
Se observó una disminución gradual de las perturbaciones de la capa ependimaria en las áreas más posteriores y anteriores de la zona subependimaria.
