JoVE Journal

Bioengineering

Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido.

Reconstitución del canal receptor de glutamato bacteriano mediante encapsulación de un sistema de expresión libre de células

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

815 Views

•

07:14 min

•

March 8th, 2024

DOI :

10.3791/66595-v

March 8th, 2024

•

Kyle J. Loi*¹^,², Hossein Moghimianavval*³, Allen P. Liu²^,³^,⁴^,⁵

¹Neuroscience Program, University of Michigan, Ann Arbor, ²Cellular and Molecular Biology Program, University of Michigan, Ann Arbor, ³Department of Mechanical Engineering, University of Michigan, Ann Arbor, ⁴Department of Biomedical Engineering, University of Michigan, Ann Arbor, ⁵Department of Biophysics, University of Michigan, Ann Arbor

Transcribir

Nuestro protocolo aborda la reconstitución de una proteína de membrana dentro de la bicapa lipídica de una célula sintética elaborada mediante el método de emulsión de gota invertida. La ventaja de utilizar el método de emulsión de gotas invertidas es su capacidad para generar células sintéticas que proporcionan un entorno estable para la expresión libre de células de proteínas de membrana. Nuestro protocolo ofrece un método robusto para que los investigadores en el campo sinteticen proteínas de membrana dentro de células sintéticas utilizando un sistema de expresión libre de células.

Mi laboratorio está trabajando en la reconstitución de varios canales iónicos en células sintéticas a través de la reconstitución del potencial de acción por un conjunto bien definido de canales iónicos.

Resumen

Este protocolo describe el método de emulsión invertida utilizado para encapsular un sistema de expresión libre de células (CFE) dentro de una vesícula unilaminar gigante (GUV) para la investigación de la síntesis e incorporación de una proteína de membrana modelo en la bicapa lipídica.

Explorar más videos

Palabras clave Expresi n libre de c lulas

reconstituci n de prote nas de membrana

receptor de glutamato

ves culas unilamelares gigantes

p ptido se al de proteorrodopsina

c lulas sint ticas

Capítulos en este video

0:00

Introduction

0:49

Bulk Cell‐Free Expression Reactions with Small Unilamellar Vesicles (SUVs) for Synthetic Cell Applications