Para comenzar, tome las células de músculo liso esofágico cultivadas una vez que alcancen el 80% de fluidez. Aspirar el medio y lavar las células del músculo liso endotelial con cinco mililitros de PBS. A continuación, añadir dos mililitros de tripsina-EDTA al 0,2% al matraz e incubar durante dos minutos para digerir las células.
Agregue dos mililitros de DMEM para terminar el proceso de digestión y transfiera la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 mililitros. Centrifugar el tubo a 675 G durante tres minutos. Aspire cuidadosamente el sobrenadante y vuelva a suspender el pellet celular en las biotintas compuestas de metacrilato de gelatina y metacriloilo de fibroína de seda.
Después de la bioimpresión y el lavado de la capa muscular esofágica 3D con PBS, aspire cuidadosamente el PBS y reemplácelo con tres mililitros de DMEM, suplementado con 10% de FBS y 1% de penicilina o estreptomicina.