Monitorización a largo plazo de las tasas de consumo de oxígeno en cultivos epiteliales de pigmento retiniano altamente diferenciados y polarizados

La degeneración del EPR, o epitelio pigmentario de la retina, subyace a muchas causas de la pérdida de la visión. La disfunción mitocondrial subyace a esta degeneración del EPR en muchos casos. Podemos medir la función mitocondrial observando las tasas de consumo de oxígeno, o OCR.

Aquí presentamos un nuevo método para medir el OCR en el RPE. Gracias al trabajo de múltiples laboratorios, ahora está bien establecido, el EPR requiere actividad mitocondrial para mantener su salud y función. La investigación se centra ahora más en los nutrientes que utiliza preferentemente el EPR, y si eso cambia bajo estrés.

Los métodos anteriores para evaluar el OCR en el RPE tienen limitaciones. O bien el EPR se cultivó en condiciones no ideales, o bien no se pudo evaluar durante largos períodos de tiempo. Por lo tanto, la medición del OCR en cultivos de alta fidelidad que mantienen características in vivo es uno de los principales desafíos.

El método de monitorización del OCR presentado en este manuscrito nos permite medir el OCR durante una semana mientras manipulamos el RPE bajo múltiples retos experimentales. Todo esto se hace mientras el RPE se encuentra en condiciones de cultivo ideales que le permiten imitar el RPE ideal in vivo. Recipher es un dispositivo novedoso para el control a largo plazo del consumo de oxígeno en cultivos celulares, como el epitelio pigmentario de la retina.

A diferencia de los métodos a corto plazo como el analizador de caballito de mar, recipher admite la monitorización prolongada en condiciones estándar, lo que permite un perfil bioenergético detallado durante semanas mientras se preserva la salud celular.