Monitoramento de longo prazo das taxas de consumo de oxigênio em culturas epiteliais pigmentares retinianas altamente diferenciadas e polarizadas

A degeneração do EPR, ou epitélio pigmentar da retina, está subjacente a muitas causas de perda de visão. A disfunção mitocondrial está subjacente a essa degeneração do EPR em muitos casos. Podemos medir a função mitocondrial observando as taxas de consumo de oxigênio, ou OCR.

Aqui apresentamos um novo método para medir o OCR no RPE. Graças ao trabalho de vários laboratórios, agora está bem estabelecido, o RPE requer atividade mitocondrial para manter sua saúde e função. A pesquisa agora está mais focada em quais nutrientes o RPE usa preferencialmente e se isso muda sob estresse.

Métodos anteriores para avaliar o OCR no EPR têm limitações. Ou o EPR foi cultivado em condições não ideais ou não pôde ser avaliado por longos períodos de tempo. Portanto, medir o OCR em culturas de alta fidelidade que mantêm recursos in vivo é um dos principais desafios.

O método de monitoramento do OCR introduzido neste manuscrito nos permite medir o OCR ao longo de uma semana enquanto manipulamos o RPE sob vários desafios experimentais. Tudo isso é feito enquanto o EPR está em condições ideais de cultura que permitem imitar o EPR ideal in vivo. Recipher é um novo dispositivo para monitoramento de longo prazo do consumo de oxigênio em culturas de células, como o epitélio pigmentar da retina.

Ao contrário dos métodos de curto prazo, como o analisador de cavalos-marinhos, a recipher suporta monitoramento estendido em condições padrão, permitindo perfis bioenergéticos detalhados ao longo de semanas, preservando a saúde celular.