Para empezar, obtenga las tiras de retina de ratones y lávelas cinco veces en tampón de cacodilato de sodio 0,1 molar durante 15 minutos. A continuación, incubar las tiras con ferrocianuro de potasio y solución de tetróxido de osmio en la oscuridad sobre hielo durante 1,5 horas. Lavar las tiras tres veces en agua bidestilada e incubarlas con tio-carbohidrazida al 1%.
Después de enjuagar con agua destilada doble, trate secuencialmente las tiras de retina con tetróxido de osmio, acetato de uranilo y nitrato de plomo. Deshidratar las tiras de retina con concentraciones crecientes de etanol. Luego, trate las tiras de retina con una solución que contenga etanol y acetona en partes iguales durante 20 minutos, seguido de dos lavados con acetona durante 20 minutos cada uno.
Incubar secuencialmente las tiras de retina en mezclas de resina de acetona en la oscuridad a temperatura ambiente. Ininfiltrar las tiras de retina con resina pura durante 24 horas a 45 grados centígrados, seguido de resina fresca durante 48 horas a 60 grados centígrados. La microscopía electrónica de barrido con haz de iones focalizado de los terminales de los fotorreceptores de la retina que utiliza este método conserva la estructura de la membrana celular y los contornos de las vesículas con mayor claridad que el método tradicional de doble fijación.
