Investigación en el laboratorio de MT es apoyado por becas de la National Science Foundation (DBI-0820610 y IOS 1022102) y el Departamento de Salud de Nueva York (NYSTEM-C024308). CM recibió becas postdoctorales del Ministerio español de Educación y Ciencia (2007-0937) y la Fundación Rafael del Pino, España.

<ol>
	<li>Rensink, W. A., Buell, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+expression+profiling+resources+for+plant+genomics.">Microarray expression profiling resources for plant genomics.</a> Trends. Plant. Sci. 10, 603-609 (2005).</li><li>Li, P., Ponnala, L., Gandotra, N., Wang, L., Si, Y., Tausta, S. L., Kebrom, T. H., Provart, N., Patel, R., Myers, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+developmental+dynamics+of+the+maize+leaf+transcriptome.">The developmental dynamics of the maize leaf transcriptome.</a> Nat. Genet. 42, 1060-1067 (2010).</li><li>Lister, R., O'Malley, R. C., Tonti-Filippini, J., Gregory, B. D., Berry, C. C., Millar, A. H., Ecker, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+integrated+single-base+resolution+maps+of+the+epigenome+in+Arabidopsis.">Highly integrated single-base resolution maps of the epigenome in Arabidopsis.</a> Cell. 133, 523-536 (2008).</li><li>Brady, S. M., Orlando, D. A., Lee, J. Y., Wang, J. Y., Koch, J., Dinneny, J. R., Mace, D., Ohler, U., Benfey, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-resolution+root+spatiotemporal+map+reveals+dominant+expression+patterns.">A high-resolution root spatiotemporal map reveals dominant expression patterns.</a> Science. 318, 801-806 (2007).</li><li>Brooks, L., Strable, J., Zhang, X., Ohtsu, K., Zhou, R., Sarkar, A., Hargreaves, S., Elshire, R. J., Eudy, D., Pawlowska, T., Ware, D., Janick-Buckner, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdissection+of+shoot+meristem+functional+domains.">Microdissection of shoot meristem functional domains.</a> PLoS. Genet. 5, e1000476-e1000476 (2009).</li><li>Galbraith, D. W., Birnbaum, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+studies+of+cell+type-specific+gene+expression+in+plants.">Global studies of cell type-specific gene expression in plants.</a> Annu. Rev. Plant. Biol. 57, 451-475 (2006).</li><li>Ohtsu, K., Smith, M., Emrich, S., Borsuk, L., Zhou, R., Chen, T., Zhang, X., Timmermans, M., Beck, J., Buckner, B., Janick-Buckner, D., Nettleton, D., Scanlon, M., Schnable, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+gene+expression+analysis+of+the+shoot+apical+meristem+of+maize+(Zea+mays+L.).">Global gene expression analysis of the shoot apical meristem of maize (Zea mays L.).</a> Plant. J. 52, 391-404 (2007).</li><li>Juarez, M. T., Kui, J. S., Thomas, J., Heller, B. A., Timmermans, M. C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=microRNA-mediated+repression+of+rolled+leaf1+specifies+maize+leaf+polarity.">microRNA-mediated repression of rolled leaf1 specifies maize leaf polarity.</a> Nature. 428, 84-88 (2004).</li><li>Kramer, E. M., Irish, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+genetic+mechanisms+controlling+petal+development.">Evolution of genetic mechanisms controlling petal development.</a> Nature. 399, 144-148 (1999).</li><li>Stuurman, J., Jäggi, F., Kuhlemeier, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shoot+meristem+maintenance+is+controlled+by+a+GRAS-gene+mediated+signal+from+differentiating+cells.">Shoot meristem maintenance is controlled by a GRAS-gene mediated signal from differentiating cells.</a> Genes Dev. 16, 2213-2218 (2002).</li><li>Kim, M., McCormick, S., Timmermans, M., Sinha, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+domain+of+PHANTASTICA+determines+leaflet+placement+in+compound+leaves.">The expression domain of PHANTASTICA determines leaflet placement in compound leaves.</a> Nature. 424, 438-443 (2003).</li><li>Kramer, E. M., Holappa, L., Gould, B., Jaramillo, M. A., Setnikov, D., Santiago, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elaboration+of+B+gene+function+to+include+the+identity+of+novel+floral+organs+in+the+lower+eudicot+Aquilegia.">Elaboration of B gene function to include the identity of novel floral organs in the lower eudicot Aquilegia.</a> Plant Cell. 19, 750-766 (2007).</li><li>Lippman, Z. B., Cohen, O., Alvarez, J. P., Abu-Abied, M., Pekker, I., Paran, I., Eshed, Y., Zamir, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+making+of+a+compound+inflorescence+in+tomato+and+related+nightshades.">The making of a compound inflorescence in tomato and related nightshades.</a> PLoS Biol. 6, e288-e288 (2008).</li><li>Kidner, C., Timmermans, M. C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+as+a+tool+to+study+the+role+of+microRNAs+in+plant+development.">In situ hybridization as a tool to study the role of microRNAs in plant development.</a> Methods. Mol. Biol. 342, 159-179 (2006).</li><li>Jackson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double+labeling+of+KNOTTED1+mRNA+and+protein+reveals+multiple+potential+sites+of+protein+trafficking+in+the+shoot.">Double labeling of KNOTTED1 mRNA and protein reveals multiple potential sites of protein trafficking in the shoot.</a> 129, 1423-1429 (2002).</li><li>Jensen, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Botanical Histochemistry. , 408-408 (1962).</li><li>Jackson, D., Bowles, D. J., Gurr, S. J., McPherson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+in+plants.">In situ hybridization in plants.</a> Molecular Plant Pathology: A Practical Approach. , 163-174 (1991).</li><li>Chitwood, D. H., Nogueira, F. T., Howell, M. o. n. t. g. o. m. e. r. y., Carrington, T. A., C, J., Timmermans, M. C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pattern+formation+via+small+RNA+mobility.">Pattern formation via small RNA mobility.</a> Genes. Dev. 23, 549-554 (2009).</li><li>Piette, D., Hendrickx, M., Willems, E., Kemp, C. R., Leyns, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+optimized+procedure+for+whole-mount+in+situ+hybridization+on+mouse+embryos+and+embryoid+bodies.">An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies.</a> Nat. Protoc. 3, 1194-1201 (2008).</li><li>Blilou, I., Xu, J., Wildwater, M., Willemsen, V., Paponov, I., Friml, J., Heidstra, R., Aida, M., Palme, K., Scheres, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+PIN+auxin+efflux+facilitator+network+controls+growth+and+patterning+in+Arabidopsis+roots.">The PIN auxin efflux facilitator network controls growth and patterning in Arabidopsis roots.</a> Nature. 433, 39-44 (2005).</li><li>Jackson, D., Hake, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+phyllotaxy+in+maize+by+the+abphyl1+gene.">Control of phyllotaxy in maize by the abphyl1 gene.</a> Development. , 126-315 (1999).</li><li>Chuck, G., Whipple, C., Jackson, D., Hake, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+maize+SBP-box+transcription+factor+encoded+by+tasselsheath4+regulates+bract+development+and+the+establishment+of+meristem+boundaries.">The maize SBP-box transcription factor encoded by tasselsheath4 regulates bract development and the establishment of meristem boundaries.</a> Development. 137, 1243-1250 (2010).</li><li>Long, J. A., Barton, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+apical+embryonic+pattern+in+Arabidopsis.">The development of apical embryonic pattern in Arabidopsis.</a> Development. 125, 3027-3035 (1998).</li><li>Nogueira, F. T., Chitwood, D. H., Madi, S., Ohtsu, K., Schnable, P. S., Scanlon, M. J., Timmermans, M. C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+small+RNA+accumulation+in+the+maize+shoot+apex.">Regulation of small RNA accumulation in the maize shoot apex.</a> PLoS Genet. 5, e1000320-e1000320 (2009).</li></ol>

No hay conflictos de interés declarado.

El método de hibridación in situ descrito aquí permite la visualización directa del patrón de expresión espacio-temporal de cualquier gen de interés con gran resolución celular, alta sensibilidad y especificidad. El protocolo no permite una comparación cuantitativa de los niveles de expresión entre los genes. Sin embargo, la alta sensibilidad del método y la resolución puede revelar los gradientes de expresión de los genes dentro de un tejido 8, 18, ​​que no es posible con la mayoría de los otros métodos de análisis de expresión génica. El protocolo incluye varios pasos, que pueden hacer que la solución de problemas problemática. Los pasos más críticos del protocolo son la fijación de los tejidos y la selección y el etiquetado de la sonda. Tejidos poco infiltrada y las sondas con la incorporación de DIG baja dará señales muy débiles que podrían ser difíciles de detectar por encima del fondo. Para cada nuevo gen de interés, es recomendable intentar unas cuantas sondas diferentes derivados de difealquiler regiones de la transcripción. Ocasionalmente, dos o tres sondas dirigidas a diferentes regiones más pequeñas del gen puede ser necesario combinar para obtener una señal de hibridación fuerte y específica. Además, las condiciones de hibridación, tales como la temperatura y la composición del tampón de hibridación, se puede optimizar para cada gen o tejidos para disminuir o aumentar el rigor de la hibridación. También la etapa de tratamiento de la proteasa es una variable y se puede cambiar para adaptar el protocolo de diferentes especies de plantas o para la detección de las transcripciones con muy escasa. La inclusión de las dos sondas de control positivo y negativo será útil para identificar los puntos problemáticos del protocolo. El procedimiento ha sido optimizado para parafina secciones de tejidos de plantas, pero con pequeñas modificaciones se puede utilizar también para todo el montaje hibridación in situ. Aunque se utiliza mucho en la investigación con animales, 19 de monte se hibridación in situ se limited a los tejidos vegetales que pueden ser fácilmente infiltrados, como los embriones, las raíces o los jóvenes tejidos meristemáticos 20,21. El protocolo también se puede modificar fácilmente para detectar simultáneamente dos ARNm diferentes transcripciones o localizar junto a las proteínas 15,22,23. Finalmente, es posible extender la aplicación de este método para la visualización de patrones de expresión de ARN pequeños en plantas. los patrones de expresión de miRNA se han determinado utilizando este protocolo, tanto en maíz y Arabidopsis 8,14. Más recientemente, el de las sondas in vitro transcritas han sido sustituidos por comercialmente disponibles marcada con DIG ácido nucleico cerrado (LNA) sondas oligo que aumentan la sensibilidad de la señal 18, 24.

<table border="1"><tbody><tr><th> Producto </th><th> Empresa </th><th> Número de catálogo </th><th> Comentarios </th></tr><tr><td> Cytoseal 60 4 oz </td><td> Pescador </td><td> 23-244-256 </td><td> A base de tolueno 8310-4 </td></tr><tr><td> Histoclear </td><td> Pescador </td><td> 50-899-90147 </td><td></td></tr><tr><td> Ruta de los tejidos Paraplast Plus </td><td> Pescador </td><td> 23-021-400 </td><td></td></tr><tr><td> N + membrana de nylon Hybond-N + </td><td> GE Healthcare </td><td> RPN203B </td><td></td></tr><tr><td> RNasa OUT; 40 U / l </td><td> Invitrogen </td><td> 10777019 </td><td></td></tr><tr><td> RQ1 RNasa libre de DNasa, 1 U / l </td><td> Promega </td><td> M6101 </td><td></td></tr><tr><td> DIG-etiquetados control ARN </td><td> Roche </td><td> 11585746910 </td><td></td></tr><tr><td> DIG RNA etiquetado mezcla </td><td> Roche </td><td> 11277073910 </td><td></td></tr><tr><td> SP6 RNA polimerasa 1.000 U </td><td> Roche </td><td> 10810274001 </td><td&gt; </td></tr><tr><td> T3 RNA polimerasa 1.000 U </td><td> Roche </td><td> 11031163001 </td><td></td></tr><tr><td> T7 RNA polimerasa 1.000 U </td><td> Roche </td><td> 10881767001 </td><td></td></tr><tr><td> RNasa A </td><td> Roche </td><td> 109142 </td><td> se disuelven en 50% de glicerol 100 mM Tris pH 8,0 </td></tr><tr><td> El bloqueo de los reactivos </td><td> Roche </td><td> 1 096 176 </td><td> Calentar a 70 º C en tampón TBS </td></tr><tr><td> Anti-digoxigenina-AP, fragmentos Fab de oveja 150 U </td><td> Roche </td><td> 1 093 274 </td><td></td></tr><tr><td> NBT / BCIP de la solución madre </td><td> Roche </td><td> 1 681 451 </td><td></td></tr><tr><td> Un paseo rápido mini-ARN Columnas </td><td> Roche </td><td> 11814427001 </td><td></td></tr><tr><td> tRNA de E. coli </td><td> Roche </td><td> 109541 </td><td></td></tr><tr><td> Triton ® X-100 </td><td> Sigma </td><td> T8787 </td><td></td></tr><tr><td> Tween-20</td><td> Sigma </td><td> P9416 </td><td></td></tr><tr><td> Formamida desionizada </td><td> Sigma </td><td> F9037 </td><td></td></tr><tr><td> Proteasa de Streptomyces griseus Tipo XIV </td><td> Sigma </td><td> P5147 </td><td> Diluir en agua y milliQ predigieren 4 horas a 37 ° C </td></tr><tr><td> Trietanolamina </td><td> Sigma </td><td> 90279 </td><td> Diluir en agua, llevar a pH 8,0 con HCl </td></tr><tr><td> El anhídrido acético </td><td> Sigma </td><td> A6404 </td><td></td></tr><tr><td> Sulfato de dextrano sal de sodio de Leuconostoc spp. </td><td> Sigma </td><td> D8906-5G </td><td> Sulfato de dextrano se debe calentar a 80 º C para disolver. </td></tr><tr><td> Solución de Denhardt 50x Concentrate </td><td> Sigma </td><td> D2532 </td><td></td></tr><tr><td> Albúmina de suero bovino - ≥ 98% </td><td> Sigma </td><td> A7906 </td><td></td></tr><tr><td> Eosina sal disódica </td><td> Sigma </td><td> E4382 </td><td> Se disuelven en 96 a 100% de etanol hasta saturación </td></tr><tr><td> Paraformaldehído </td><td> Sigma </td><td> P6148 </td><td></td></tr><tr><td> Etanol absoluto prueba 200 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fenol / cloroformo </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Base de los moldes </td><td> Electrónica Microsocpy Ciencia </td><td> 62352-15 </td><td></td></tr><tr><td> Incorporación de los anillos </td><td> Pescador </td><td> 22-038-197 </td><td></td></tr><tr><td> Viales de centelleo de 20 ml desechables, con tapas </td><td> VWR </td><td> 66020-326 </td><td></td></tr><tr><td> Sonda en más de diapositivas </td><td> Pescador </td><td> 22-230-900 </td><td></td></tr><tr><td> Micro cubreobjetos 24x50 mm </td><td> VWR </td><td> 48404-452 </td><td></td></tr><tr><td> Papel Whatman 3mm </td><td> VWR </td><td> 89022-360 </td><td></td></tr><tr><td> Tres platos de cristal y un staialvo bastidor de acero de diapositivas </td><td> Electrónica Microsocpy Ciencia </td><td> 71420-25 </td><td> Dos de vidrio cóncavo son necesarios para el tratamiento histoclear y el último se utiliza para el tratamiento de anhídrido acético </td></tr><tr><td> 18 recipientes limpios de plástico </td><td> Electrónica Microsocpy Ciencia </td><td> 71402 </td><td></td></tr><tr><td> 2 o 3 grandes cajas planas de plástico con tapa precintable </td><td></td><td></td><td> necesarios para los pasos de hibridación y de anticuerpos </td></tr><tr><td> Pinceles finos </td><td></td><td></td><td> Ayudar a entregar cintas de cera </td></tr><tr><td> Micrótomo </td><td></td><td></td><td> Leica </td></tr><tr><td> Sistema de autolimpieza de vacío en seco </td><td> Welch </td><td> 2025 </td><td></td></tr><tr><td> Deslice más cálido </td><td> Pescador </td><td></td><td></td></tr><tr><td> El bloque de calentamiento </td><td></td><td></td><td> necesarios a los 60 ° C y 85 ° C</td></tr><tr><td> Incubadora a 58-60 ° C </td><td> Pescador </td><td></td><td> Para ver los pasos con Paraplast fundido </td></tr><tr><td> Hornos o baños de agua de 55 ° C y 37 ° C </td><td> Pescador </td><td></td><td> Debido a la necesidad de un cambio rápido de temperatura entre dos </td></tr><tr><td> Centrífuga (4 ° C - 20 ° C) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Campana extractora de humos </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

in situ hybridization for the precise localization of transcripts in plants

Con los avances en la investigación genómica de la década pasada, la biología vegetal ha sido testigo de la presentación de numerosos estudios a gran escala análisis cuantitativo de la expresión génica. Microarrays y la próxima generación de métodos de secuenciación se utilizan para investigar los procesos de respuesta de desarrollo, fisiología y el estrés, diseccionar las vías de ARN epigenético y pequeños, y construir grandes redes de genes reguladores 1.3. Si bien estas técnicas facilitan el análisis simultáneo de grandes conjuntos de genes, por lo general ofrecen una resolución espacio-temporal muy limitado de cambios de expresión génica. Esta limitación puede superarse parcialmente usando perfiles método junto con lasermicrodissection o fluorescencia de células activadas por la clasificación 7.4. Sin embargo, para comprender plenamente el papel biológico de un gen, el conocimiento de su patrón espacio-temporal de la expresión a una resolución celular es esencial. En particular, cuando se estudia el desarrollo o los efectos ambientales de las ITSmuli y mutantes pueden el análisis detallado del patrón de expresión de un gen es esencial. Por ejemplo, sutiles diferencias cuantitativas en los niveles de expresión de los genes reguladores clave puede dar lugar a fenotipos dramática cuando se asocia con la pérdida o ganancia de expresión en tipos celulares específicos. Varios métodos se utilizan habitualmente para el examen detallado de los patrones de expresión génica. Una de ellas es a través del análisis de las líneas transgénicas reportero. Este análisis puede, sin embargo, se convierten en mucho tiempo en el análisis de múltiples genes o de trabajo en las plantas recalcitrantes a la transformación. Por otra parte, una validación independiente para asegurarse de que el patrón de expresión de los transgenes imita a la de los genes endógenos que normalmente se requiere. Localización de la proteína del ARNm inmunohistoquímica o hibridación in situ presentar alternativas relativamente rápido para la visualización directa de la expresión génica en las células y tejidos. Este último tiene la ventaja de que puede ser fácilmente used en cualquier gen de interés. La hibridación in situ permite la detección de ARNm diana en las células por hibridación con una etiqueta anti-sentido sonda de ARN obtenido mediante transcripción in vitro del gen de interés. Aquí resumimos un protocolo para la localización in situ de la expresión génica en las plantas que es altamente específica y sensibilidad. Está optimizado para su uso con paraformaldehído fijo, incluidos en parafina secciones, que dan una excelente conservación de la histología, y las sondas DIG-etiquetados que se visualizan por inmuno-detección y fosfatasa alcalina reacción colorimétrica. Este protocolo se ha aplicado con éxito a una serie de tejidos a partir de una amplia gama de especies de plantas, y puede ser utilizado para analizar la expresión de ARNm y ARN pequeños 8-14.

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In Situ Hybridization for the Precise Localization of Transcripts in Plants

La<em&gt; In situ</em&gt; Protocolo de hibridación aquí descrito permite una localización directa de los ARNm y la expresión de ARN pequeños en el nivel celular con alta sensibilidad y especificidad. El procedimiento ha sido optimizado para parafina secciones de tejidos vegetales, es aplicable a una amplia gama de plantas y tejidos, y puede ser completado dentro de los diez días.

Hibridación in situ para la localización precisa de las transcripciones de las plantas

With the advances in genomics research of the past decade, plant biology has seen numerous studies presenting large-scale quantitative analyses of gene ...

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JoVE Journal

Biology

In Situ Hybridization for the Precise Localization of Transcripts in Plants

51.0K vistas.  Cold Spring Harbor Laboratory. La In situ Protocolo de hibridación aquí descrito permite una localización directa de los ARNm y la expresión de ARN pequeños en el nivel celular con alta sensibilidad y especificidad. El procedimiento ha sido optimizado para parafina secciones de tejidos vegetales, es aplicable a una amplia gama de plantas y tejidos, y puede ser completado dentro de los diez días.