This work was supported by the Interdisciplinary Center for Clinical Research (IZKF) M&#252;nster (SEED 03/12, SB), Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB TR128, TP B6 to S.G.M. ME3283/2-1 to S.G.M.) and by Innovative Medizinische Forschung, M&#252;nster (I-BI111316, SB and SGM).

Todos los experimentos con ratones se deben realizar de acuerdo con las directrices del respectivo comité de cuidado de los animales y el uso institucional. 1. Comentarios generales para experimentos con ratones <ol><li> Mantenga los ratones en condiciones libres de patógenos y les permitirá el acceso a alimentos y agua ad libitum. NOTA: Es importante la utilización de ratones por edad y sexo en los grupos experimentales porque los patrones inmunológicos pueden variar con la edad y el género. </li></ol> 2. Las células T específicas de OVA Preparación y activación de CD8 + (OT-I) <ol><li> Realice la estimulación de las células T OT-I como se describe a continuación 5 días antes de la preparación de cortes de cerebro. NOTA: 5 x 10 5 efectoras CD8 + activadas OT-I células T (células T CD8 + de ratones transgénicos que reconocen sólo el OVA 257-264 péptido en el contexto de moléculas MHC-I) se necesitan por rebanada La concentración 5 x 10 5 fue elegido experimentoaliado como uno óptima para favorecer una buena interacción célula-célula una vez que las células comienzan a migrar a la rebanada y, al mismo tiempo, la cantidad de células no es demasiado alta para inducir una reacción exagerada de una sola célula lo que permite contar 8,18. </li><li> Preparar el medio para el cultivo de células T OT-I. Suplemento 500 ml de DMEM con 5% de suero de ternera fetal (FCS), 10 mM HEPES, 2 mM L-glutamina, 50 micras 2-mercaptoetanol, 1% de aminoácidos no esenciales y 25 mg / ml de gentamicina. Almacenar el medio a 4 ° C hasta su uso. </li><li> Retirar el bazo de OT-I ratones transgénicos como por referencia 16. Transferirlos al medio preparado. </li><li> Generar suspensión de células individuales por maceración bazos a través de un filtro de 70 micras y se centrifuga la suspensión a 300 xg durante 5 min, 4 ° C. </li><li> Incubar suspensión de células con 5 ml de amonio-cloruro de potasio (ACK) tampón (150 mM NH 4 Cl, 10 mM KHCO3, EDTA 0,1 mM, pH 7,3) durante 5 min para lisar las células rojas de la sangre. </li><li> Deje de incubatien 10 ml con medio y se centrifuga de nuevo como se describió anteriormente. </li><li> Diluir la suspensión celular en medio y calcular números. Células de la placa a una densidad de 3 x 10 7 células / pocillo en una placa de 12 pocillos y se les prime por incubación con OVA 257-264 (SIINFEKL; 1 nM) y la interleucina 2 (IL-2) (500 UI / ml) durante 5 días. </li><li> Después de 4 días, añadir IL-2 a una concentración de 500 UI / mL de nuevo. </li><li> Después de la estimulación, purificar OT-I células T de suspensión celular mediante el uso de un ratón basado selección negativa kit de aislamiento de células T CD8 +, siguiendo las instrucciones del fabricante. La purificación se basa en el agotamiento de todas las células no-CD8 + mediante el uso de un cóctel de anticuerpos contra CD4, CD11b, CD11c, CD19, CD45R (B220), CD49b (DX5), CD105, MHC Clase II, Ter-119, y TCRγ / δ que luego son desechados por el uso de columnas magnéticas para la elución de las células T CD8 + purificados. NOTA: Los pasos críticos en este procedire se indican por los fabricantes: es importante que la reacción implica sólo células individuales debido a la presencia de grupos podría bloquear la columna durante la etapa de elución; contando de la celda antes de añadir el cóctel Byotin es importante para el grado de pureza de la muestra y el procedimiento se debe realizar en hielo para minimizar los enlaces de anticuerpos no específicos. </li></ol> 3. Preparación de rodajas de cerebro agudo y co-cultivo con células T OT-I <ol><li> Antes de la preparación de cerebral aguda rebana 19, preparar la solución salina placedine fisiológica enfriada con hielo usando sacarosa 200 mM, tubos de 20 mm, 2,5 mM de KCl, 1,25 mM de dextrosa NaH 2 PO 4, 10 mM MgSO 4, 0.5 CaCl 2 y 10 mM y el líquido cefalorraquídeo artificial (ACSF) utilizando NaCl 125 mM, 2,5 KCl, 1,25 NaH 2 PO 4, 24 mM NaHCO 3, 2 mM MgSO 4, 2 mM CaCl 2, 10 mM de dextrosa. Ajuste el pH de cada solución a 7,35 por using NaOH. Antes de ajustar el pH de ACSF, solución debe burbujeó con una mezcla de 95% O 2 y 5% de CO 2. </li><li> Pre-enfriar las soluciones. </li><li> Anestesie 8 - 10 semanas de edad ratones (por ejemplo, ratones C57BL / 6 como control o ratones transgénicos ODC-OVA 17 con la inhalación usando 5,0% de isoflurano, 5,0% de halotano o inyectar 100 mg / kg de ketamina y 10 mg / kg de peso corporal a través de xilazina ip Espere para la anestesia y utilizar una pizca dedo del pie para evaluar el nivel de anestesia y decapitar a la vez. La eutanasia a los ratones como por el cuidado de animales institucional y utilizar criterios del comité para la eutanasia. </li><li> Ponga el ratón en posición ventral. Desinfectar y cortar el cuero cabelludo sagital. Abra el hueso craneal sagital, retire el cerebro rápidamente con la ayuda de una cuchara y fijarlo en el plato de un vibratome utilizando pegamento. </li><li> Llene la placa con la solución salina preparada placedine enfriado con hielo fisiológica. </li><li> Cortar 300 micras cortes coronales con la vibratome. NOTA: Este procedimiento se conocen para producir muestras de tejido intactas viables adecuados para estudios celulares funcionales dentro de un intervalo de tiempo de al menos 8 hr 19-21. En efecto, después de este período de tiempo, ya partir después de las 6 horas, la preparación muestra una menor calidad, es decir, cambios en las propiedades básicas y funcionales como la acción potencial de generación y propagación. </li><li> Después de seccionar, transferir una rebanada de inmediato en cada pocillo de una placa de 12 pocillos lleno de ACSF. </li><li> Añadir con cuidado 5 x 10 5 células OT-I T por rebanada. </li><li> Incubar las rebanadas para un máximo de 8 horas en una incubadora (37 ° C, 5% de CO 2). </li><li> Después del período de incubación, las rebanadas de cosecha e integrarlos mediante OCT compuesto tejido-tek y congelarlos en nitrógeno líquido. Almacenar a -20 ° C para otros estudios histológicos a por ejemplo, evaluar la estructura neuronal (por ejemplo, usando anti-MAPII o anticuerpos anti-sinaptofisina) o apoptosis (por ejemplo, utilizando anti caspasa-3-anticuerpos y anti-NeuN contracuerpos) de acuerdo con procedimientos estándar. </li></ol>

<ol>
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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+analysis+of+the+cellular+infiltrate+in+multiple+sclerosis+lesions.">Immunohistochemical analysis of the cellular infiltrate in multiple sclerosis lesions.</a> Ann Neurol. 19 (6), 578-587 (1986).</li><li>Hoftberger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+major+histocompatibility+complex+class+I+molecules+on+the+different+cell+types+in+multiple+sclerosis+lesions.">Expression of major histocompatibility complex class I molecules on the different cell types in multiple sclerosis lesions.</a> Brain Pathol. 14 (1), 43-50 (2004).</li><li>G&#246;bel, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collateral+neuronal+apoptosis+in+CNS+gray+matter+during+an+oligodendrocyte-directed+CD8(+)+T+cell+attack.">Collateral neuronal apoptosis in CNS gray matter during an oligodendrocyte-directed CD8(+) T cell attack.</a> Glia. 58, 469-480 (2010).</li><li>Melzer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitotoxic+neuronal+cell+death+during+an+oligodendrocyte-directed+CD8++T+cell+attack+in+the+CNS+gray+matter.">Excitotoxic neuronal cell death during an oligodendrocyte-directed CD8+ T cell attack in the CNS gray matter.</a> J Neuroinflammation. 10, 121 (2013).</li><li>Huseby, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pathogenic+role+for+myelin-specific+CD8(+)+T+cells+in+a+model+for+multiple+sclerosis.">A pathogenic role for myelin-specific CD8(+) T cells in a model for multiple sclerosis.</a> J Exp Med. 194 (5), 669-676 (2001).</li><li>McPherson, S. W., Heuss, N. D., Roehrich, H., Gregerson, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bystander+killing+of+neurons+by+cytotoxic+T+cells+specific+for+a+glial+antigen.">Bystander killing of neurons by cytotoxic T cells specific for a glial antigen.</a> Glia. 53 (5), 457-466 (2006).</li><li>Hogquist, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+receptor+antagonist+peptides+induce+positive+selection.">T cell receptor antagonist peptides induce positive selection.</a> Cell. 76 (1), 17-27 (1994).</li><li>Cao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+in+transgenic+mice+expressing+ovalbumin+in+oligodendrocytes.">Induction of experimental autoimmune encephalomyelitis in transgenic mice expressing ovalbumin in oligodendrocytes.</a> Eur J Immunol. 36 (1), 207-215 (2006).</li><li>G&#246;bel, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD4(+)+CD25(+)+FoxP3(+)+regulatory+T+cells+suppress+cytotoxicity+of+CD8(+)+effector+T+cells:+implications+for+their+capacity+to+limit+inflammatory+central+nervous+system+damage+at+the+parenchymal+level.">CD4(+) CD25(+) FoxP3(+) regulatory T cells suppress cytotoxicity of CD8(+) effector T cells: implications for their capacity to limit inflammatory central nervous system damage at the parenchymal level.</a> J Neuroinflammation. 9, 41 (2012).</li><li>Edwards, F. A., Konnerth, A., Sakmann, B., Takahashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+thin+slice+preparation+for+patch+clamp+recordings+from+neurones+of+the+mammalian+central+nervous+system.">A thin slice preparation for patch clamp recordings from neurones of the mammalian central nervous system.</a> Pflugers Arch. 414 (5), 600-612 (1989).</li><li>Meuth, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+TWIK-related+acid-sensitive+K++channel+1+(TASK1)+and+TASK3+channels+to+the+control+of+activity+modes+in+thalamocortical+neurons.">Contribution of TWIK-related acid-sensitive K+ channel 1 (TASK1) and TASK3 channels to the control of activity modes in thalamocortical neurons.</a> J Neurosci. 23 (16), 6460-6469 (2003).</li><li>Misgeld, U., Frotscher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dependence+of+the+viability+of+neurons+in+hippocampal+slices+on+oxygen+supply.">Dependence of the viability of neurons in hippocampal slices on oxygen supply.</a> Brain Res Bull. 8 (1), 95-100 (1982).</li><li>Ling, C., Verbny, Y. I., Banks, M. I., Sandor, M., Fabry, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+activation+of+antigen-specific+CD8++T+cells+in+the+presence+of+antigen+in+organotypic+brain+slices.">In situ activation of antigen-specific CD8+ T cells in the presence of antigen in organotypic brain slices.</a> J Immunol. 180, 8393-8399 (2008).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Diferentes modelos animales se han descrito en las últimas décadas para abordar las características patológicas de trastornos desmielinizantes inflamatorias como la esclerosis múltiple. En vivo modelos de ratón y de rata son ampliamente utilizados para imitar las características fisiopatológicas de la enfermedad, es decir, el análisis de las consecuencias de los procesos de desmielinización y remielinización y de episodios entremezcladas de inflamación y neurodegeneración. Sin embargo, sólo un enf...

Death of oligodendrocytes and destruction of the myelin sheath accompanied by loss of neurons and axons are typical pathological findings in grey matter lesions in individuals suffering from multiple sclerosis (MS)1,2. Cortical lesions can be divided so far in three different subtypes2: subpial, intracortical and leukocortical lesions. In comparison to white matter plaques, infiltrates are characterized by a predominance of CD8+ T-cells, suggesting their possible decisive role in grey matter inflammation3. Furthermore, oligoclonal expansions in blood, cerebrospinal fluid (CSF) and within inflammatory lesions can be found for CD8+ T-cells themselves4-6. 
In line with this, it is assumed that CD8+ T-cells may be specific for different myelin proteins7,8. Indeed, CD8+ T-cells are found near oligodendrocytes and myelin sheaths9,10 that show MHC I expression11 and might therefore be responsible for the loss of the myelin sheath. This process is often seen together with extensive &#8216;&#8216;collateral&#8217;&#8217; neuronal and axonal damage within the central nervous system (CNS) grey matter1,2. In fact, direct and indirect death of oligodendrocytes and neurons is induced by CD8+ T-cells via two different mechanism: (i) cell membrane swelling and rupture due to the formation of cytotoxic granules following the release of perforins and granzymes and (ii) ligation to the Fas receptors or exposition of FasL on their surface8,12,13.
Different types of animal models are established to study the underlying mechanism of the mentioned processes. In this respect, primed CD8+ T-cells specific for autoantigens with induced expression in CNS glial cells, like oligodendrocytes or astrocytes, can be adoptively transferred to analyse &#8216;&#8216;collateral&#8217;&#8217; neuronal and axonal death in grey matter subsequently14,15. To perform such in vivo experiments is a big help to mimic some pathophysiological aspects of MS, however, this approach is not suited to resolve the underlying mechanism and kinetics of axonal damage and neuronal apoptosis.
To overcome these restrictions, an ex vivo approach was established to study the mechanisms and time course of neuronal cell death following a oligondendrocytes-directed CD8+ T-cell attack. Since only oligodendrocytes and therefore myelin sheath production should be targeted by immune cells, MHC class-I-restricted, ovalbumin (OVA)-reactive OT-I Tcells are used16. These cells are subsequently transferred into brain slices obtained from mice selectively expressing OVA in oligodendrocytes (ODC-OVA mice)17.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="786">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:187px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:264px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">12-Well-plate</td>
			<td style="width:187px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">2-Mercaptoethanol</td>
			<td style="width:187px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">31350-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">2-Methylbutan</td>
			<td style="width:187px;">Roth</td>
			<td style="width:119px;">3927.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">70 &#181;m strainer</td>
			<td style="width:187px;">Falcon</td>
			<td style="width:119px;">352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:216px;">CaCl2</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.02382.0500</td>
			<td>calcium chloride</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:216px;">CD8+-isolation kit</td>
			<td style="width:187px;">Miltenyi Biotech</td>
			<td style="width:119px;">130-090-859</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">D(+)-glukose</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.08337.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">DMEM</td>
			<td style="width:187px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">31966-021</td>
			<td>warm in 37 &#176;C water bath before use</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">EDTA</td>
			<td style="width:187px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">E5134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">FCS</td>
			<td style="width:187px;">PAA Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">A15-151</td>
			<td>fetal calve serum</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">gentamicin</td>
			<td style="width:187px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">15750-060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">HEPES 1M</td>
			<td style="width:187px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">15630-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">IL-2</td>
			<td style="width:187px;">Peprotech</td>
			<td style="width:119px;">212-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">Isofluran</td>
			<td style="width:187px;">Abbott</td>
			<td style="width:119px;">05260-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">KCl</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.04933.0500</td>
			<td>potassium chloride</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">KHCO3</td>
			<td style="width:187px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P9144</td>
			<td>potassium hydrogen carbonate</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">L-Glutamine</td>
			<td style="width:187px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">35050-038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">MgSO4</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.05886.0500</td>
			<td>magnesium sulfate</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:187px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">31434</td>
			<td>sodium chloride</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">NaH2PO4 * H2O</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.06346.0500</td>
			<td>sodium hydrogen phosphate</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">NaHCO3</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.06329.0500</td>
			<td>sodium hydrogen carbonate</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">NaOH</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.09137.1000</td>
			<td>sodium hydroxide</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">NH4Cl</td>
			<td style="width:187px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">213330</td>
			<td>ammonium chloride</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Non Essential Amino Acid</td>
			<td style="width:187px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">11140-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">OVA (257-264)</td>
			<td style="width:187px;">Genscript</td>
			<td style="width:119px;">RP10611</td>
			<td>ovalbumin</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">PIPES</td>
			<td style="width:187px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P6757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">Sukrose</td>
			<td style="width:187px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.07687.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">Tissue-Tek OCT</td>
			<td style="width:187px;">Sakura</td>
			<td style="width:119px;">4583</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an ex vivo model of an oligodendrocyte-directed t-cell attack in acute brain slices

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter lesions in inflammatory demyelinating disorders like multiple sclerosis (MS). In these disorders, mainly CD8+ T-cells of putative specificity for myelin- and oligodendrocyte-related antigens are found, so that neuronal apoptosis in grey matter lesions may be a collateral effect of these cells. Different types of animal models are established to study the underlying mechanisms of the mentioned pathophysiological processes. However, although they mimic some aspects of MS, it is impossible to dissect the exact mechanism and time course of &#8216;&#8216;collateral&#8217;&#8217; neuronal cell death. To address this course, here we show a protocol to study the mechanisms and time response of neuronal damage following an oligodendrocyte-directed CD8+ T cell attack. To target only the myelin sheath and the oligodendrocytes, in vitro activated oligodendrocyte-specific CD8+ T-cells are transferred into acutely isolated brain slices. After a defined incubation period, myelin and neuronal damage can be analysed in different regions of interest. Potential applications and limitations of this model will be discussed.

Después de la incubación de secciones de cerebro con células T de oligodendrocitos dirigida CD8 +, oligodendrocitos, así como las neuronas sufren apoptosis (Figuras 2A y 1C, respectivamente). Signos histológicos de la apoptosis (por ejemplo, la caspasa-3, Tunel) pueden ser detectados más temprano después de 3 horas de incubación. El período de incubación no debe ser de más de 8 horas con el fin de garantizar una buena calidad de la preparación y resultados reproducibles. ...

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An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

To address mechanisms of demyelination and neuronal apoptosis in cortical lesions of inflammatory demyelinating disorders, different animal models are used. We here describe an ex vivo approach by using oligodendrocyte-specific CD8+ T-cells on brain slices, resulting in oligodendroglial and neuronal death. Potential applications and limitations of the model are discussed.

Una<em&gt; Ex vivo</em&gt; Modelo de un ataque de células T Oligodendrocyte dirigida en Rebanadas cerebral agudo

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

6.8K vistas.  University of Münster. To address mechanisms of demyelination and neuronal apoptosis in cortical lesions of inflammatory demyelinating disorders, different animal models are used. We here describe an ex vivo approach by using oligodendrocyte-specific CD8+ T-cells on brain slices, resulting in oligodendroglial and neuronal death. Potential applications and limitations of the model are discussed.