The authors would like to acknowledge contributions from the entire Gereau Lab for manuscript editing. This work is supported by NINDS funds 1F31NS078852 to DSB and NINDS fund NS42595 to RWG.

Todos los protocolos de ratón estaban de acuerdo con los Institutos Nacionales de Salud y fueron aprobados por el Comité de Estudios Animal de la Facultad de Medicina de la Universidad de Washington (St. Louis, MO). 1. Preparación de la Bandeja de Pruebas y Cajas <ol><li> Limpie la superficie del cristal. </li><li> Fije la sonda de termopar de tipo T filamento a la superficie en el medio de la placa de vidrio con cinta de laboratorio. </li><li> Coloca los recintos de los animales sobre la placa de vidrio en una sola línea a lo largo del centro de la placa. </li><li> Pase la sonda termopar a través del centro recinto de animales y enchufe en el registrador de datos. Gire el registrador de datos en tiempo de desactivar la función de apagado automático, y conecte el registrador de datos al ordenador con el cable suministrado. <ol><li> Si el registro de la temperatura de la placa durante el experimento, abra el software de registro de datos para comenzar a registrar temperaturas de placas. </li><li> Si es necesario, ajustar el software para volvercable de la temperatura de la placa una vez por segundo. </li><li> Comience a registrar temperaturas utilizando el software incluido con el registrador de datos térmica. </li></ol></li><li> Separar el recinto con inserciones en negro para evitar la interacción visual entre ratones. </li><li> Posición refleja debajo del vidrio de tal manera que la parte inferior de los recintos es visible desde una posición sentada cómoda. </li></ol> 2. El calentamiento / enfriamiento de la placa de vidrio <ol><li> Llenar cajas de aluminio con agua calentada, hielo húmedo, o hielo seco y la posición apropiada sobre la placa de vidrio (paquetes de papel de aluminio lleno de hielo seco se pueden utilizar también para enfriar el vidrio; Figura 1) 2. <ol><li> Para la prueba a 30 ° C, colocar las cajas de aluminio de aproximadamente 0,25 &#39;&#39; fuera de los recintos de los animales (Figura 2 B) 2. <ol><li> Establecer un circulador de agua caliente a cada lado de la placa de vidrio. Ajuste el termostato a 45 - 60 ° C, y nose para llenar las cajas de aluminio con un flujo constante de agua caliente (Figura 1 C) 2. </li><li> Coloque los circuladores de tal manera que el agua caliente de las cajas de aluminio drena directamente de vuelta al depósito de la bomba de circulación en cada lado (Figura 1 C) 2. </li></ol></li><li> Para la prueba a temperatura ambiente, deje los cuadros vacíos (Figura 2) 2. </li><li> Para la prueba a los 17 ° C, colocar las cajas de aproximadamente 0,25 &#39;&#39; fuera de los recintos de los animales de cada lado y se llenan de hielo húmedo (Figura 2) 2. </li><li> Para la prueba a 12 ° C, colocar las cajas de aproximadamente 1,25 &#39;&#39; fuera de los recintos de cualquier lado y se llenan de hielo seco (Figura 2) 2. </li><li> Para la prueba a 5 ° C, coloque las cajas de aproximadamente 0,25 &#39;&#39; fuera de los recintos de cualquier lado y se llenan de hielo seco (Figura 2) 2.<ol><li> Al enfriar el vaso con hielo seco, asegúrese de que haya suficiente ventilación para evitar la acumulación de CO 2 en la habitación. </li></ol></li></ol></li><li> Espere a que el vidrio para alcanzar el rango de temperatura deseado. </li><li> Añadir los ratones a los recintos de la placa. NOTA: un generador de ruido blanco puede ser utilizado para disminuir las perturbaciones de ruido. </li><li> Espere a que los ratones se aclimate. NOTA: En nuestras instalaciones de esto toma aproximadamente 2,5 horas, pero esto puede variar de forma significativa sobre la base de alojamiento de los animales y las condiciones de manejo. </li><li> Mantener el vidrio en el intervalo de temperatura deseado, garantizando que las cajas se mantienen llenas de agua caliente, hielo húmedo, o hielo seco. NOTA: Con nuestro aparato de las cajas necesita ser rellenado con hielo aproximadamente cada 90 min. NOTA: Para obtener la condición de 17 ° C, es útil para vaciar la mayor parte del agua de las cajas de aluminio a través de los orificios de drenaje antes de rellenar con hielo. Esto estabilizará la temperatura mejor, y prdesbordamiento evento NOTA: La cantidad exacta del hielo seco variará según la temporada, pero en general mantener las cajas de más de ¼ completo a lo largo de toda la longitud de la caja va a mantener la temperatura constante. </li></ol> 3. Prueba de los ratones a temperaturas fijas <ol><li> Fuera de la sala de comportamiento, llenar un cubo de hielo alrededor de la mitad llena de hielo seco. </li><li> Con un martillo o mazo, machacar el hielo seco en un polvo fino. NOTA: Si sobrecarga el cubo hará que sea difícil para aplastar por completo el hielo seco en polvo. </li><li> Utilizando una hoja de afeitar recta o tijeras, corte la parte superior de una jeringa de 3 ml. </li><li> Utilizando una aguja de 21 G, meter 3 agujeros en los lados opuestos de la jeringa (total de 6 hoyos). NOTA: Estos agujeros se reducirá la presión generada por la sublimación mientras comprime el hielo seco. La jeringa de corte puede ser reutilizado para múltiples experimentos. </li><li> Tome la jeringa, polvo de hielo seco, y un cronómetro de mano en la sala de comportamiento. </li><li> Llene la cámara de la jeringa medio lleno de polvo de hielo seco. Mantenga el extremo cortado de la jeringa contra un objeto plano, y comprimir firmemente el polvo utilizando el émbolo. Ten cuidado; el émbolo de plástico puede doblarse o romperse por la presión. Si esto ocurre, vuelva a colocar el émbolo de una jeringa nueva. </li><li> Extender la punta de la pastilla de hielo seco comprimido más allá del borde de la jeringa. </li><li> Ratones de prueba que son totalmente en reposo. <ol><li> A 30 ° C, 23 ° C y 17 ° C, los ratones de prueba que tengan todas las 4 patas en el vidrio y no se mueve, pero no completamente dormido 19. </li><li> A los 12 ° C y 5 ° C, los ratones de prueba que se encuentran en 2 patas o 4 patas y no se mueven o saltan. </li></ol></li><li> El uso de los espejos para la orientación, con suavidad pero con firmeza, presione el rubor pellet plana contra la superficie de cristal debajo de la pata trasera del ratón (Figura 1) 2. Inicie la mano automático. </li><li> Detener el temporizador y retirar el sedimento cuando el ratón se aleja del vidrio enfriado. NOTA: El movimiento de retroceso puede ser vertical u horizontal. <ol><li> Si el ratón se mueve muy brevemente la pata y luego devuelve a la superficie de enfriamiento, continúe sincronización y la estimulación hasta que el ratón hace un movimiento permanente de distancia. NOTA: Nuestro laboratorio utiliza un tiempo máximo estímulo de 20 seg para ratones en la mayoría de los casos. </li></ol></li><li> Repita este procedimiento de prueba hasta que se recogen al menos 3 valores en cada pata de cada animal. Ensayos separados de prueba patas opuestas en el mismo ratón por al menos 7 min, y los ensayos consecutivos separados en una sola pata por al menos 15 min. </li><li> Si es necesario, utilizar diferentes espesores de vidrio para generar diferentes tasas de enfriamiento (Figura 3) 1. NOTA: La velocidad de enfriamiento se correlaciona inversamente con el espesor del vidrio. </li></ol> 4. Prueba de la Ratones Durante Fría Adaptación NOTA: Este es un protocolo alternativo que permite realizar pruebas como la plataforma de cristale enfría, en lugar de una vez que la placa se ha estabilizado y los ratones se han adaptado plenamente al ambiente frío. <ol><li> Siga las instrucciones que figuran en la Sección 1 para configurar el aparato. </li><li> Siga las instrucciones que figuran en la Sección 3 para tomar mediciones de referencia a RT (Figura 7A) 2. </li><li> Pre-enfriar las cajas de aluminio con hielo seco. </li><li> Una vez que se han medido las latencias de retirada de línea de base, coloque las cajas preenfriados en la placa de aproximadamente 1,25 &#39;&#39; fuera de los recintos de cualquier lado (Figura 7A, flecha etiquetada como &quot;hielo seco añadió&quot;) 2. </li><li> Siga las instrucciones que figuran en la Sección 3 para tomar medidas como la placa de vidrio se enfría, tomando medidas tan a menudo como sea posible. </li></ol>

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	<li>Brenner, D. S., Golden, J. P., Gereau, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Behavioral+Assay+for+Measuring+Cold+Sensation+in+Mice.">A Novel Behavioral Assay for Measuring Cold Sensation in Mice.</a> Plos ONE. 7 (6), 8 (2012).</li><li>Brenner, D. S., Vogt, S. K., Gereau, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+to+measure+cold+adaptation+in+freely+behaving+mice.">A technique to measure cold adaptation in freely behaving mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. , (2014).</li><li>Choi, Y., Yoon, T. W., Na, H. S., Kim, S. H., Chung, J. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+manifestations+of+an+experimental+model+for+peripheral+neuropathy+produced+by+spinal+nerve+ligation+in+the+primate.">Behavioral manifestations of an experimental model for peripheral neuropathy produced by spinal nerve ligation in the primate.</a> Pain. 56 (2), 155-166 (1994).</li><li>Pizziketti, R. J., Pressman, N. S., Geller, E. B., Cowan, A., Adler, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+cold+water+tail-flick:+A+novel+analgesic+test+that+distinguishes+opioid+agonists+from+mixed+agonist-antagonists.">Rat cold water tail-flick: A novel analgesic test that distinguishes opioid agonists from mixed agonist-antagonists.</a> European Journal of Pharmacology. 119 (1-2), 23-29 (1985).</li><li>Pinto-Ribeiro, F., Almeida, A., Pego, J. M., Cerqueira, J., Sousa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+unpredictable+stress+inhibits+nociception+in+male+rats.">Chronic unpredictable stress inhibits nociception in male rats.</a> Neuroscience letters. 359 (1-2), 73-76 (2004).</li><li>Karashima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRPA1+acts+as+a+cold+sensor+in+vitro+and+in+vivo.">TRPA1 acts as a cold sensor in vitro and in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (4), 1273-1278 (2009).</li><li>Knowlton, W. M., Bifolck-Fisher, A., Bautista, D. M., McKemy, D. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+menthol+receptor+TRPM8+is+the+principal+detector+of+environmental+cold.">The menthol receptor TRPM8 is the principal detector of environmental cold.</a> Nature. 448 (7150), 204-208 (2007).</li><li>Obata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TrpA1+induced+in+sensory+neurons+contributes+to+cold+hyperalgesia+after+inflammation+and+nerve+injury.">TrpA1 induced in sensory neurons contributes to cold hyperalgesia after inflammation and nerve injury.</a> The Journal of Clinical Investigation. 115 (9), 2393-2401 (2005).</li><li>Tang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pirt+functions+as+an+endogenous+regulator+of+TRPM8.">Pirt functions as an endogenous regulator of TRPM8.</a> Nature communications. 4, 2179 (2013).</li><li>Lee, H., Iida, T., Mizuno, A., Suzuki, M., Caterina, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+thermal+selection+behavior+in+mice+lacking+transient+receptor+potential+vanilloid+4.">Altered thermal selection behavior in mice lacking transient receptor potential vanilloid 4.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 25 (5), 1304-1310 (2005).</li><li>Pogorzala, L. A., Mishra, S. K., Hoon, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cellular+code+for+Mammalian+thermosensation.">The cellular code for Mammalian thermosensation.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 33 (13), 5533-5541 (2013).</li><li>Yalcin, I., Charlet, A., Freund-Mercier, M. -. J., Barrot, M., Poisbeau, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiating+thermal+allodynia+and+hyperalgesia+using+dynamic+hot+and+cold+plate+in+rodents.">Differentiating thermal allodynia and hyperalgesia using dynamic hot and cold plate in rodents.</a> The journal of pain official journal of the American Pain Society. 10 (7), 767-773 (2009).</li><li>Callahan, B. L., Gil, A. S., Levesque, A., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+mechanical+and+thermal+nociceptive+sensitivity+in+the+laboratory+mouse+by+behavioral+state.">Modulation of mechanical and thermal nociceptive sensitivity in the laboratory mouse by behavioral state.</a> The journal of pain: official journal of the American Pain Society. 9 (2), 174-184 (2008).</li><li>Brenner, D. 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M., Michailidis, I., Logothetis, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PI(4,5)P2+regulates+the+activation+and+desensitization+of+TRPM8+channels+through+the+TRP+domain.">PI(4,5)P2 regulates the activation and desensitization of TRPM8 channels through the TRP domain.</a> Nature neuroscience. 8 (5), 626-634 (2005).</li><li>Daniels, R. L., Takashima, Y., McKemy, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity+of+the+neuronal+cold+sensor+TRPM8+is+regulated+by+phospholipase+C+via+the+phospholipid+phosphoinositol+4,5-bisphosphate.">Activity of the neuronal cold sensor TRPM8 is regulated by phospholipase C via the phospholipid phosphoinositol 4,5-bisphosphate.</a> The Journal of biological chemistry. 284 (3), 1570-1582 (2009).</li><li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurokinin-1+receptor+enhances+TRPV1+activity+in+primary+sensory+neurons+via+PKCepsilon:+a+novel+pathway+for+heat+hyperalgesia.">Neurokinin-1 receptor enhances TRPV1 activity in primary sensory neurons via PKCepsilon: a novel pathway for heat hyperalgesia.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 27 (44), 12067-12077 (2007).</li><li>Wang, H., Zylka, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mrgprd-expressing+polymodal+nociceptive+neurons+innervate+most+known+classes+of+substantia+gelatinosa+neurons.">Mrgprd-expressing polymodal nociceptive neurons innervate most known classes of substantia gelatinosa neurons.</a> The Journal of neuroscience the official journal of the Society for Neuroscience. 29 (42), 13202-13209 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose

The CPA can be used to assess cold sensitivity and cold adaptation in mice. It provides an affordable, efficient way to measure cold responses in unrestrained, acclimated animals at a wide variety of temperature ranges. It also provides an unambiguous behavioral response with an easily quantified and analyzed output variable. It has already been used to assess changes in cold sensitivity induced by inflammation1, neuropathic injury1, analgesics1, genetic knockouts20, and ge...

Medición de la capacidad de respuesta frío en roedores es importante para mejorar la comprensión de los mecanismos potenciales de sensibilidad al frío en los seres humanos, tanto en condiciones normales y patológicas. El Plantar Ensayo Fría (CPA), originalmente desarrollado hace varios años 1, está diseñado para generar respuestas reproducibles, sin ambigüedades murinos de comportamiento a un estímulo frío entregado a temperatura ambiente. Más recientes mejoras de este ensayo han permitido la medición reproducible de sensibilidad al frío en una amplia gama de temperaturas de 2. Ambas versiones también están diseñados para ser relativamente de alto rendimiento, y barato de usar. Una gran parte de los avances se han logrado en la comprensión de los mecanismos de la sensibilidad al frío utilizando otros métodos de comportamiento. Un método es la prueba de la evaporación de acetona, que implica frotando o pulverización acetona en la pata del ratón y midiendo la cantidad de tiempo que gasta el ratón agitando el 3,4 pata. Desafortunadamente,las respuestas a la evaporación de acetona son confundidos por la sensación de humedad y el olor de la acetona. Además, el estímulo frío que se aplica en la prueba de la evaporación de acetona puede variar en función de la cantidad de acetona aplicado, y es difícil de cuantificar. Finalmente, los ratones no lesionados tienen respuestas mínimas a acetona al inicio del estudio, por lo que es imposible medir la analgesia en ausencia de hipersensibilidad con este método. Otro ensayo clásico para las respuestas frías es el ensayo de retirada de la cola, donde se mide la latencia a la retirada después de la cola se encuentra inmersa en 5,6 agua fría. Mientras que las respuestas de comportamiento en este ensayo son inequívocos y el ensayo mide las respuestas a una temperatura específica, los animales deben estar sujetos durante la prueba, lo que puede alterar la capacidad de respuesta fría a través de bien descritos mecanismos analgésicos inducidos por el estrés 7. Otra herramienta comúnmente usada es la prueba de la placa fría, que mide el comportamientorespuestas de los ratones después de que se colocan en una placa Peltier enfriado 8-10. Mientras que esta herramienta proporciona información sobre respuestas de los animales a temperaturas específicas, también se ha utilizado de manera incompatible; diferentes grupos han medido diferentes tipos de respuestas, incluyendo el número de saltos 8,11, la latencia hasta la primera respuesta 8,11- 13, y el número de la pata ascensores 11,13,14 con resultados muy diferentes. El ensayo de placa de frío es también relativamente bajo rendimiento, ya que sólo un animal puede ser probado a la vez, y requiere un dispositivo peltier caros y frágiles. La prueba de preferencia la temperatura de la placa 2 es un derivado de uso común de la prueba de la placa fría que mide la cantidad relativa de tiempo que los animales pasan en 2 placas conectadas de diferentes temperaturas 9,15- 17. Otro ensayo comúnmente utilizado similar es el ensayo de gradiente térmico, donde la cantidad de tiempo que los ratones que pasan en diferentes zonas de temperaturaque oscila entre 5 ° C y 45 ° C en una placa de metal larga se mide 16. Si bien estos ensayos permiten la comparación de temperaturas, no está claro si el comportamiento representa la temperatura o la aversión a la preferencia de la temperatura. Por último, el ensayo de placa fría dinámica ha sido utilizado para medir cómo los ratones responden a los cambios de temperatura ambiente 18. Este método consiste en colocar los ratones en un dispositivo peltier RT y el aumento gradual de abajo a 1 ° C, mientras que la medición de la cantidad de los ratones saltan o se lamen las patas a diferentes temperaturas de la placa. Si bien esta prueba cómo los ratones adaptarse a un entorno de enfriamiento, que no proporciona una forma de probar cómo los ratones responden a un estímulo frío en la configuración de un refrigerador de temperatura ambiente. Adicionalmente, se requiere un equipo costoso para llevar a cabo y no proporciona una manera para aclimatarse a los ratones el equipo de prueba antes de medir su sensibilidad al frío. Para complementar estos ensayos, el CPA pone a prueba la ACCLIMAted respuestas a un estímulo frío bien definido en una variedad de rangos de temperatura, o durante el proceso de adaptación a climas fríos. Se puede probar hasta 14 ratones a la vez con nuestro aparato actual, con el potencial de ser económicamente a escala para ensayos de alto rendimiento.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1209">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:233px;">Name</td>
			<td style="width:320px;">Company</td>
			<td style="width:353px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:303px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">T-type thermocouple probe</td>
			<td>Physitemp</td>
			<td>IT-24p</td>
			<td>Used to measure the surface temperature of the glass (http://www.physitemp.com/products/probesandwire/)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass plate</td>
			<td>Local glass company (in St. Louis, Stemmerich Inc)</td>
			<td>N/A</td>
			<td>We use pyrex glass (borosilicate float). Our lab generally uses 1/4&#39;&#39;, but 3/16&#39;&#39; and 1/8&#39;&#39; are also useful</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermal Data logger</td>
			<td>Extech</td>
			<td>EA15</td>
			<td>Thermologger to keep track of glass temperature (http://www.extech.com/instruments/product.asp?catid=64&#38;prodid=408)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td align="right">309657</td>
			<td>The top is cut off, and dry ice is compressed in the syringe to generate a cold probe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Computer</td>
			<td>If using Extech logger, any Pcwill work</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Aluminum boxes</td>
			<td>Washington University in St. Louis machine shop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>boxes are 3&#39; long, 4.5&#39;&#39; wide, and 3&#39;&#39; tall with a sealed lid.&#160; There is a 1/2&#39;&#39; hole drilled into one short side of each box, near the bottom. These holes are filled with rubber stopcocks when the boxes are filled with wet ice or hot water.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Heated water circulator</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td>Any water circulator model with a pump will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">21 gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td align="right">305165</td>
			<td>The exact needle size is not important</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hand timer</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
			<td>Any hand timer will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mirror</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
			<td>Any flat mirror will work</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple and inexpensive method for determining cold sensitivity and adaptation in mice

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life. The cold plantar assay allows the objective and inexpensive assessment of cold sensitivity in mice, and can quantify both analgesia and hypersensitivity. Mice are acclimated on a glass plate, and a compressed dry ice pellet is held against the glass surface underneath the hindpaw. The latency to withdrawal from the cooling glass is used as a measure of cold sensitivity.
Cold sensation is also important for survival in regions with seasonal temperature shifts, and in order to maintain sensitivity animals must be able to adjust their thermal response thresholds to match the ambient temperature. The Cold Plantar Assay (CPA) also allows the study of adaptation to changes in ambient temperature by testing the cold sensitivity of mice at temperatures ranging from 30 &#176;C to 5 &#176;C. Mice are acclimated as described above, but the glass plate is cooled to the desired starting temperature using aluminum boxes (or aluminum foil packets) filled with hot water, wet ice, or dry ice. The temperature of the plate is measured at the center using a filament T-type thermocouple probe. Once the plate has reached the desired starting temperature, the animals are tested as described above.
This assay allows testing of mice at temperatures ranging from innocuous to noxious. The CPA yields unambiguous and consistent behavioral responses in uninjured mice and can be used to quantify both hypersensitivity and analgesia. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

Las respuestas de comportamiento inducidos a partir de ratones a partir de 30 ° C, 23 ° C, 17 ° C, y 12 ° C son altamente reproducible (Figura 4A) 20. Con el fin de medir el estímulo frío que se genera bajo la pata trasera, los ratones fueron anestesiados con una mezcla de ketamina / xilazina / acepromazina cóctel y sus patas fueron asegurados en el cristal en la parte superior de un termopar de tipo T filamento (Figura 4B) 20. El vidrio se enfría o se cali...

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A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 &#176;C and 5 &#176;C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

Un método simple y barato para la Determinación de la sensibilidad al frío y Adaptación en ratones

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

14.6K vistas.  Washington University in St. Louis. The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 °C and 5 °C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.