Los autores no tienen ninguna agradecimientos.

El protocolo sigue las directrices de la Universidad Hospital Zurich humano investigación Comité de ética.
1. diagnósticos de neuromas y selección de pacientes
<ol><li>Realizar preoperatorios bloqueos nerviosos proximales del neuroma para confirmar los diagnósticos. Evaluar los bloques en el tercio medio del antebrazo y excluir a potenciales desencadenantes de las zonas de inervación superpuestas de SBRN, como el nervio cutáneo antebrachial lateral (LACN), nervio interosseous posterior (PIN) y una rama dorsal del nervio cubital 10.</li>
	<li>Realizar cirugía en pacientes con dolor considerable reducción (por lo menos 5 puntos en la escala de análogo Visual (VAS) para el dolor)11.</li>
</ol>2. quirúrgico preparación
<ol><li>Prohibir al paciente cualquier ingesta de alimentos o líquidos 6 horas antes de la cirugía.</li>
	<li>Colocar al paciente en el centro de la suite quirúrgica sobre una mesa operativa universal en una posición de silla de playa.</li>
	<li>Coloque el brazo o mano afectada en un resto del brazo.</li>
	<li>Pedir los anestesistas para realizar anestesia endotraqueal (fentanilo 2 μg/kg, rocuronio 0,6 mg/kg, propofol 150-250 mg).</li>
	<li>Desinfectar la piel con povidona yodada en la zona de la liposucción (por ejemplo, muslos o abdomen superior e inferior) y el sitio de la escisión de neuroma.</li>
	<li>Cubrir al paciente con cortinas quirúrgicas estériles, dejando expuesto el sitio de la liposucción y el sitio quirúrgico.</li>
</ol>3. tumescent Liposuction
<ol><li>Hacer varias incisiones pequeñas punzantes (pinchazos) de aproximadamente 3-5 mm de diámetro con un bisturí hoja #11 en el área de la liposucción. Haga una incisión como se llega a la capa subcutánea.</li>
	<li>Inyectar la solución tumescente con una diluida lidocaína y epinefrina (solución de lactato de Ringer 500 mL, 20 mL de lidocaína al 1% y epinefrina 1 mg) vía el infiltrado de calibre 14 (cánula de infiltración) en la capa de grasa subcutánea (3 mm de profundidad) en la región de recolección de grasa.</li>
	<li>Espere por lo menos 20 minutos permitiendo que la solución tumescente para tomar efecto.</li>
	<li>Gancho de 3 mm-recogiendo cánula (diámetro externo de 3 mm, largo 26 cm) a una jeringa de Toomey de 60 mL y empezar a cosechar adiposo a través de las incisiones punzantes. Nota: La mano no dominante controla continuamente la colocación y el curso de la cánula.</li>
	<li>Tire hacia atrás el émbolo de la jeringa de Toomey a la marca de 60 mL y coloque una pinza de mosquito por el émbolo retirado con el fin de mantener la presión negativa en la jeringa y evitar una continua creación de vacío de la mano dominante.</li>
	<li>Cosechar un mínimo de 220 mL de tejido adiposo colocando las jeringas Toomey en una posición vertical en el soporte proporcionado de jeringa de Toomey; Esto permite la sedimentación de la grasa y la separación del líquido.</li>
	<li>Tenga especial cuidado para obtener un injerto de grasa de buena calidad sin cantidad considerable de sangre. Nota: Cambiar la región de liposucción cuando se nota el contenido de sangre aumentada.</li>
	<li>Suturar las incisiones punzantes con puntadas sencillas y aplique presión como sea necesario (por ejemplo, resistencia a la compresión correa).</li>
	<li>Transferencia de la lipoaspiración en un conjunto desechable estéril de un solo uso del sistema de aislamiento.</li>
	<li>Mantenga una jeringa de Toomey con lipoaspiración en el soporte proporcionado para obtener la fracción de grasa para lipofilling más adelante.</li>
</ol>4. tejido adiposo procesamiento
<ol><li>Cierre el conjunto consumible estéril. Nota: El sistema de aislamiento (véase Tabla de materiales) confirma la integridad mediante la realización de una prueba mojada.</li>
	<li>Siga las instrucciones en la pantalla. Nota: El proceso es en su mayoría software controlado y sólo requiere la confirmación manual para los pasos enumerados a continuación pulsando los botones "siguiente" o "back" en el panel de control. La lipoaspiración es transferido en el frasco de colección de tejido. En el frasco de colección de tejido, la lipoaspiración es pesado y automáticamente limpiar con solución de lactato de Ringer para eliminar las células residuales de la sangre y solución humectante.</li>
	<li>Añadir más grasa si es necesario. Nota: Dependiendo del peso del tejido adiposo cosechado el sistema de aislamiento le pide al usuario añadir más grasa o calcula la cantidad de reactivo enzimático adicional para agregar.</li>
	<li>Añada la cantidad necesaria de reactivo enzimático cuando se le pregunte por el sistema de aislamiento. Nota: Durante el proceso de digestión enzimática, se logra la separación de lípidos y el SVF. De tal modo, el tejido es en oscilante movimiento. Una vez finalizada la digestión enzimática, el SVF se transmite automáticamente en la cámara de la centrífuga para la concentración de células. En la cámara de la centrífuga, se concentra en un sedimento de celulares el SVF (velocidad de la centrífuga es aproximadamente 3.000 x g). Finalmente, el precipitado de células experimenta una serie de lavados con solución de lactato de Ringer para reducir los niveles de la enzima residual en la salida. Cuando se haya completado el proceso, se obtiene 5 mL de líquido claro (SVF).</li>
</ol>5. quirúrgico
<ol><li>Para abordar el neuroma, realice una incisión de piel sobre el sitio del neuroma previamente diagnosticado en el tercio distal del antebrazo.</li>
	<li>Bajo el uso de gafas de lupa lupas binoculares quirúrgicas (2.5-3.5 X), continuar disecar el tejido subcutáneo e identificar el nervio implicado proximal del neuroma.<ol>
<li>Posteriormente, seguir el nervio distal e identificar el neuroma (basado en la inspección visual).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Una vez que la extensión completa de la neuroma está clara, comenzar a suprimir el neuroma por un corte de tijera recta trans-de los nervios. Si no neuroma se identifica, se realiza sólo el neurolysis del nervio.</li>
	<li>Continuar con el neurolysis del muñón del nervio restante hasta 3 cm proximal a la muñeca. Nota: El extremo del muñón del nervio debe ser situado en el centro de la incisión principal.</li>
	<li>Organizar dos a cuatro pequeños pinchazos (stab) incisiones (1 mm de diámetro) con un bisturí a través de cutis epidérmicas y dérmicas en el enfoque principal.</li>
	<li>Colocar cánulas embotadas de dos a cuatro (longitud de calibre 16, 9 cm) por el stab incisiones perineural al tocón. Nota: La punta de las cánulas se debe dirigir hacia el muñón del nervio.</li>
	<li>Asegure las cánulas en lugar de vendaje adhesivo.</li>
	<li>Colocar los puntos de sutura alrededor de las cánulas y dejar el material de sutura in situ sin asegurar el nodo.</li>
	<li>Sutura de la incisión principal firmemente para prevenir la salida del injerto. Nota: Asegúrese de que las cánulas permanezcan en situ.</li>
</ol>6. aplicación de los injertos de grasa enriquecida con SVF
Nota: Después de aproximadamente 1,5 h de procesamiento, los 5 mL de la SVF procesado está listo para su uso posterior.
<ol><li>Aspirar 5 mL de SVF en comunicación jeringa de 10 mL.</li>
	<li>De la misma manera, aspirar 2 mL de la fracción lipídica sedimentados en la oposición jeringa de 10 mL.</li>
	<li>Mezcla los 5 mL de SVF con 2 mL de la fracción lipídica sedimentados por la alternancia tirando hacia atrás el émbolo de una jeringa y tirando hacia abajo el émbolo de la jeringa de comunicación, oposición hasta que se obtiene suficiente mezcla.</li>
	<li>Dividir el injerto de grasa enriquecida con SVF igualmente en dos a cuatro jeringas de 10 mL.</li>
	<li>Distribuir el injerto de grasa preparado enriquecido SVF uno después de otro igualmente alrededor del nervio del tocón al conectar las jeringas a las cánulas embotadas. Nota: Antes de aplicar el injerto, asegúrese de que las cánulas están aseguradas en la posición correcta y tener cuidado de no dislocarse las cánulas mientras se aplica el injerto de grasa.</li>
	<li>Retire con cuidado las cánulas.</li>
	<li>Luego, con cinta adhesiva las incisiones pequeñas de la puntura con steri-strips.</li>
	<li>Inmovilizar la mano mediante la aplicación de una férula en la intrínseca más posición (empalmes metacarpophalangeal (MCP) en 60-70° de flexión, interphalangeal empalmes (IP) completamente extendidos, pulgar en la proyección de puño, muñeca en flexión dorsal de 25°). Si sólo se realizaron la neurólisis del nervio, no es necesario férula y brazo y la muñeca se vende por 10 días.</li>
</ol>7. postoperatorio manejo paciente
<ol><li>Transferencia del paciente en el post-operatorio de la unidad de recuperación post anestésica y permitir control suficiente en la sala.</li>
	<li>Seguir inmovilizar la muñeca durante 10 días después de la cirugía.</li>
	<li>Realizar el primer cambio de vendas después de 48 h post cirugía y continuar a intervalos regulares (es decir, cada dos días hasta el alta).</li>
	<li>Retire las suturas 12-14 días después de la operación.</li>
	<li>Realizar evaluación clínica del dolor durante el seguimiento a los 2, 6, 12 y 36 meses.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Mackinnon, S. E., Dellon, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+treatment+of+recurrent+dorsoradial+wrist+neuromas.">Results of treatment of recurrent dorsoradial wrist neuromas.</a> Ann Plast Surg. 19 (1), 54-61 (1987).</li><li>Hazari, A., Elliot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+end-neuromas,+neuromas-in-continuity+and+scarred+nerves+of+the+digits+by+proximal+relocation.">Treatment of end-neuromas, neuromas-in-continuity and scarred nerves of the digits by proximal relocation.</a> J Hand Surg Br. 29 (4), 338-350 (2004).</li><li>Goldstein, S. A., Sturim, H. 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K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Celution+System:+Automated+Processing+of+Adipose-Derived+Regenerative+Cells+in+a+Functionally+Closed+System.">The Celution System: Automated Processing of Adipose-Derived Regenerative Cells in a Functionally Closed System.</a> Adv Wound Care (New Rochelle). 3 (1), 38-45 (2014).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+vascular+fraction:+A+regenerative+reality?+Part+2:+Mechanisms+of+regenerative+action.">Stromal vascular fraction: A regenerative reality? Part 2: Mechanisms of regenerative action.</a> J Plast Reconstr Aesthet Surg. 69 (2), 180-188 (2015).</li><li>Lutz, B. S., Ma, S. F., Chuang, D. C., Chan, K. H., Wei, F. 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A., Mian, S., Kendzerska, T., French, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measures+of+adult+pain:+Visual+Analog+Scale+for+Pain+(VAS+Pain),+Numeric+Rating+Scale+for+Pain+(NRS+Pain),+McGill+Pain+Questionnaire+(MPQ),+Short-Form+McGill+Pain+Questionnaire+(SF-MPQ),+Chronic+Pain+Grade+Scale+(CPGS),+Short+Form-36+Bodily+Pain+Scale+(SF-36+BPS),+and+Measure+of+Intermittent+and+Constant+Osteoarthritis+Pain+(ICOAP).">Measures of adult pain: Visual Analog Scale for Pain (VAS Pain), Numeric Rating Scale for Pain (NRS Pain), McGill Pain Questionnaire (MPQ), Short-Form McGill Pain Questionnaire (SF-MPQ), Chronic Pain Grade Scale (CPGS), Short Form-36 Bodily Pain Scale (SF-36 BPS), and Measure of Intermittent and Constant Osteoarthritis Pain (ICOAP).</a> Arthritis Care Res (Hoboken). 63 Suppl. 63, S240-S252 (2011).</li><li>Stokvis, A., van der Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+neuroma+pain:+a+prospective+follow-up+study.">Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study.</a> Pain. 151 (3), 862-869 (2010).</li><li>Kolle, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enrichment+of+autologous+fat+grafts+with+ex-vivo+expanded+adipose+tissue-derived+stem+cells+for+graft+survival:+a+randomised+placebo-controlled+trial.">Enrichment of autologous fat grafts with ex-vivo expanded adipose tissue-derived stem cells for graft survival: a randomised placebo-controlled trial.</a> Lancet. 382 (9898), 1113-1120 (2013).</li><li>Zhu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+regeneration+after+free+fat+transplantation:+promotion+by+stromal+vascular+fraction+cells.">Adipocyte regeneration after free fat transplantation: promotion by stromal vascular fraction cells.</a> Cell Transplant. 24 (1), 49-62 (2015).</li><li>Eto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+human+adipose+tissue-resident+hematopoietic+cell+populations+reveals+a+novel+macrophage+subpopulation+with+CD34+expression+and+mesenchymal+multipotency.">Characterization of human adipose tissue-resident hematopoietic cell populations reveals a novel macrophage subpopulation with CD34 expression and mesenchymal multipotency.</a> Stem Cells Dev. 22 (6), 985-997 (2013).</li><li>Premaratne, G. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+vascular+fraction+transplantation+as+an+alternative+therapy+for+ischemic+heart+failure:+anti-inflammatory+role.">Stromal vascular fraction transplantation as an alternative therapy for ischemic heart failure: anti-inflammatory role.</a> J Cardiothorac Surg. 6, 43 (2011).</li><li>Paik, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+Fat+Grafting:+Part+V.+Cell-Assisted+Lipotransfer+to+Enhance+Fat+Graft+Retention+Is+Dose+Dependent.">Studies in Fat Grafting: Part V. Cell-Assisted Lipotransfer to Enhance Fat Graft Retention Is Dose Dependent.</a> Plast Reconstr Surg. 136 (1), 67-75 (2015).</li></ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

El propósito del presente estudio es ilustrar metódicamente los aspectos técnicos del SVF enriquecido injertos de grasa como un novedoso tratamiento para el final-neuromas sintomáticos.
Neuromas de la SBRN están asociados con una tasa de éxito quirúrgico de sólo 33%12. Vaienti et al presentan una serie de resultados favorables en el seguimiento temprano usando perineural injertos de grasa (PFG) sin agregar el SVF en 8 pacientes con Neuromas dolorosos del miembro superior5. Sin embargo, reducción del dolor resultó inconsistente después de 6 meses con dolor recidiva en el seguimiento de 12 meses5.
Mientras que la reducción del dolor no resultó para ser estadísticamente significativo en enriquecido SVF injertos de grasa de la SBRN, observó una clara tendencia hacia la reducción de dolor constante en todas las modalidades de dolor10. Por otra parte, la reducción del dolor fue continua desde 2 meses hasta 36 meses postoperatoriamente con sin dolor la recaída. Por lo tanto, la evaluación clínica en la cirugía después de 2 meses parece ser un predictor confiable en términos de futuro pronóstico a largo plazo. Sin embargo, una serie al azar más grande es necesaria para la detección de potencial significación estadística. Este resultado favorable puede ser visto en el contexto de un mayor volumen residual de los injertos de grasa. Estudios previos demostrados redujeron las tasas de reabsorción de grasa cuando injertos de grasa enriquecidos ADSC se aplicación en comparación con injertos no enriquecida13. Por otra parte, el potencial de regeneración del injerto de grasa enriquecida con SVF es impulsado por numerosos mecanismos a nivel celular, principalmente mejorar la angiogénesis, la inflamación y la fibrosis. ADSC como componente de la SVF disparadores angiogénesis por la expresión de factores de crecimiento tales como VEGF y bFGF en el nivel celular14. El sistema inmune está influenciado por las células hematopoyéticas como macrófagos del fenotipo M2 o T linfocitos y células de asesino naturales15. Señalización celular puede verse afectado por un número reducido de citoquinas proinflamatorias tales como TNF-α e IL-616. También tiene un efecto beneficioso sobre el tejido neuronal sí mismo reduciendo consecuencia de nervios desorganizados y posterior cicatrización cutánea dolorosa. Paik et al propone una concentración ideal de 10.000 células por μl 200 de tejido adiposo para la supervivencia del injerto óptimo y mecanismo de acción. Mayores cantidades de SVF se asociaron con tasas de reabsorción de grasa significativamente mayor17.
Múltiples técnicas quirúrgicas en el tratamiento de la dolorosas final-neuromas de la SBRN han sido publicadas ampliamente. La técnica de excisión de neuroma y transposición intramuscular del muñón restante del nervio en el músculo de los brachioradialis es aún popular y ampliamente realizado. Enriquecida con SVF injerto de grasa en comparación con transposición intramuscular no requiere de la preparación quirúrgica del músculo brachioradialis y se correlaciona con una menor inmovilización de la muñeca. Además, la técnica no se limita a la población presenta del nervio y se puede aplicar a cualquier neuroma en extremidades superiores o inferiores.
A pesar del nervio válido bloqueo que se realizó antes de la cirugía para confirmar el diagnóstico y excluir dolor de superposición de los nervios, no puede excluirse absolutamente una interferencia mutua. La superposición anatómica de la SBRN LACN podría causar postoperatorio consecuencia desorganizada de la LACN en el área de inervación denervado. Además, el presente estudio es limitado debido al número pequeño de pacientes. Aunque el estudio es el más grande hasta ahora para investigar los resultados a largo plazo e ilustrar los aspectos técnicos de grasa enriquecida con SVF en la población de un solo nervio, se necesitan más ensayos aleatorios con un mayor número de participantes para confirmar la favorable tendencia de esta nueva técnica.

La gestión de extremo-neuromas sintomáticos de la SBRN sigue siendo un reto con una multitud de tratamientos quirúrgicos existentes. Principalmente, el neuroma es suprimido y el muñón del nervio restantes se reubica en estructuras vecinas tales como los músculos1,2, hueso3o venas4. Esto se asume para evitar que el hacia fuera-surgimiento de los regeneración neurales fascículos imitando el ambiente de un órgano. Sin embargo, ninguna de estas técnicas demostró ser superior, como a menudo se observaron altas tasas de recidiva del dolor y reducción de dolor suficientes.
Recientemente, injertos de grasa alrededor del tocón restante de nervio rendido resultados prometedores y fue defendida como una nueva opción de tratamiento para el final-Neuromas dolorosos del miembro superior5. Además de actuar como una barrera mecánica para evitar el constante movimiento y toque de dolor, el aspecto beneficioso de injertos de grasa se atribuye más bien a nivel celular. Tejido humano adiposo contiene varios tipos celulares, incluyendo preadipocytes, células del mástil, pericitos, células endoteliales, células de músculo liso vascular, fibroblastos, y adiposo derivados de células madre (ADSCs) junto con las células madre hematopoyéticas6. Esta población celular heterogénea se denomina células de regeneración Adipose-Derived (ADRCs) o SVF y puede obtenerse de la lipoaspiración por un sistema de aislamiento (vea La tabla de materiales) y enzima aplicada reactivo (véase tabla de materiales de )7. El mecanismo exacto de acción no se entiende; sin embargo, se ha asociado con mejoras en la angiogénesis, inmunomodulación, diferenciación y secreción de matriz extracelular8SVF.
La población concentrada de células de la SVF se agrega a los injertos de grasa con el propósito de reducir la tasa de resorción y aumentar el potencial regenerativo de los injertos de grasa, como los estudios recientes revelan dolor recidiva después de 12 meses con injertos de grasa sin agregado SVF 5. por otra parte, la acción biológica también proporciona efectos beneficiosos sobre el nervio sí mismo reduce el brote axonal desordenado del tocón9 y adherencias de la cicatriz posterior que podrían dar lugar a atrapamiento del nervio.
El primer estudio clínico para describir el injerto de grasa enriquecida con SVF como una nueva opción quirúrgica para el tratamiento de neuromas de extremo sintomáticos de SBRN ha sido recientemente publicado10. En general, la técnica puede aplicarse a cualquier neuroma que ocurre después de lesión accidental o yatrogénica del nervio. El objetivo del presente estudio posterior es ilustrar metódicamente los aspectos técnicos de este procedimiento.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="688">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Cytori Celution System</td>
			<td style="width:71px;">Cytori</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">isolation system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Celase</td>
			<td style="width:71px;">Cytori</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>enyzme reagent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">liposuction system</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">tumescent solution (500 ml Lactated Ringers, 20 ml of 1% lidocaine and 1 mg epinephrine)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">14-gauge infiltrator</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3 mm-collecting cannula (15, 26, 32 cm)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60 mL Tommey syringes</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">mosquito clamp</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Toomey syringe stand</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">4 cannulas (fat injecting cannulas 1.5 mm, syringe NO.2, 90 mm)</td>
			<td style="width:71px;">Chalybs</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">10 mL syringes</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">connecting device for syringes</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">#11- and #15-blade scalpel</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">stevens scissors</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">pins pincette</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">bipolar electrocautery</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">suture material</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">adhesive dressing</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">binocular loupes magnifier glasses (2.5-3.5x)</td>
			<td style="width:71px;">Carl Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">Statistical Package for Social Sciences, version 22</td>
			<td>IBM</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

stromal vascular fraction-enriched fat grafting for the treatment of symptomatic end-neuromata

El propósito de este estudio fue metódicamente ilustrar y destacar los pasos cruciales de la fracción vascular estromal (SVF)-enriquecido de injerto de grasa como un novedoso tratamiento de sintomáticos final-neuromas de nervios sensoriales periféricos y en este estudio, específicamente de la rama superficial del nervio radial (SBRN). A pesar de una multitud de tratamientos existentes, dolor postoperatorio persistente y recidiva de dolor común siguen siendo muy común, independiente del procedimiento evaluado. El neuroma es suprimido microsurgically Protocolo por consiguiente a estandarizado. En lugar de la reubicación del muñón del nervio regeneradora en la vecina estructuras anatómicas, como músculo o hueso, un injerto de grasa es aplicada perifocally y actúa como una barrera mecánica. Con el fin de reducir la tasa de reabsorción de grasa y aumentar el potencial regenerativo del injerto, el SVF altamente concentrado se integra en el injerto. El SVF es aislada de grasa subcutánea por separación mecánica y enzimática de la lipoaspiración por un sistema de aislamiento comercial específico. El injerto de grasa enriquecida con SVF proporciona una barrera mecánica y varios efectos biológicos a nivel celular, incluyendo mejorar la angiogénesis, la inflamación y la fibrosis. Efectos mecánicos y biológicos ayudan a reducir la consecuencia axonal desordenada del muñón del nervio durante la regeneración del nervio y por lo tanto, prevenir la repetición de la final-Neuromas dolorosos.

Datos se analizaron utilizando el software estadístico y presentó como medios ± desviaciones. La prueba de Kolmogorov-Smirnov para comprobar la distribución no paramétrica de la población de estudio se aplicó y confirmó una distribución empírica negativa. Basado en la naturaleza no paramétrica de la población de estudio, prueba de Wilcoxon para muestras relacionadas se empleó para comparar los resultados preoperatorios y postoperatorios. Significación estadística fue considerada en los valores de p inferior a 0.0510.
Cinco pacientes con una edad media de 49,8 ± 16,6 años fueron incluidos en el estudio. La comparación de las puntuaciones de dolor antes y después de la cirugía se presentan en la tabla 1 para cada modalidad de dolor y el dolor general. El tratamiento con injerto de grasa enriquecida con SVF no podría demostrar reducción del dolor estadísticamente significativa. Sin embargo, una reducción relevante en todas las modalidades de dolor podría alcanzar desde 2 meses postoperatoriamente y demostró constante con ninguna recaída del dolor hasta los 36 meses de seguimiento (figura 1).
Dolor espontáneo podría reducirse de preoperatively 1,6 ± 0,55 a postoperatoriamente 1,2 ± 1.1 (p = 0.414), espigas de 2.2 ± 1,3 a 1,4 ± 1.34 (p = 0.180), hiperestesia de 1,6 ± 1,14 a 1,2 ± 1,64 (p = 0.713), grifo dolor de 2,8 ± 0.45 a 1,8 ± 1.3 (p = 0.197) y movimiento pa en de 2,8 ± 0.45 a 1.4 ± 1.34 (p = 0.066). En general podría lograrse una reducción del dolor de preoperatively 2,2 ± 0.97 postoperatoriamente 1,4 ± 1.26 36 meses después de la cirugía (p = 0.104).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55962/55962fig1.jpg"> Figura 1: la tendencia de las modalidades de dolor. La evaluación de las modalidades de dolor (media ± SD) fue realizada tanto preoperatoriamente como 2, 6, 12 y 36 meses postoperatoriamente. Esta figura ha sido modificada de una publicación anterior 10. <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55962/55962fig1large.jpg" target="_blank">haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="6">Tabla 1. Significa dolor ± desviaciones estándar (valor p) antes y después del injerto de grasa enriquecida con SVF</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>dolor espontáneo</td>
			<td>picos de</td>
			<td>hiperestesia</td>
			<td>dolor de grifo</td>
			<td>dolor de movimiento</td>
			<td>Puntuación total del dolor</td>
		</tr>
<tr>
<td>Puntuación preoperatoria</td>
			<td>1.6 ± 0,55</td>
			<td>2.2 ± 1.3</td>
			<td>1.6 ± 1.14</td>
			<td>2,8 ± 0.45</td>
			<td>2,8 ± 0.45</td>
			<td>2.2 ± 0.97</td>
		</tr>
<tr>
<td>2 meses</td>
			<td>0,8 ± 0.84 (0.102)</td>
			<td>1,4 ± 1.52 (0.285)</td>
			<td>1.2 ± 1,64 (0.713)</td>
			<td>1.6 ± 0,89 (0.083)</td>
			<td>1,4 ± 1.52 (0.102)</td>
			<td>± 1.28 1.24 (0.225)</td>
		</tr>
<tr>
<td>6 meses</td>
			<td>1.6 ± 1.52 (1.0)</td>
			<td>1.8 ± 1,64 (0,655)</td>
			<td>1,4 ± 1.52 (0.713)</td>
			<td>1.6 ± 1.52 (0.157)</td>
			<td>1.2 ± 1,64 (0.102)</td>
			<td>± 1.52 1.45 (0.345)</td>
		</tr>
<tr>
<td>12 meses</td>
			<td>1.6 ± 1.52 (1.0)</td>
			<td>1.8 ± 1,64 (0,655)</td>
			<td>1,4 ± 1.52 (0.713)</td>
			<td>1.8 ± 1.3 (0.180)</td>
			<td>1.6 ± 1.52 (0,109)</td>
			<td>1.64 ± 1.38 (0.345)</td>
		</tr>
<tr>
<td>36 meses</td>
			<td>1.2 ± 1.1 (0.414)</td>
			<td>1,4 ± 1.34 (0.180)</td>
			<td>1.2 ± 1,64 (0.713)</td>
			<td>1.8 ± 1.3 (0.197)</td>
			<td>1,4 ± 1.34 (0.066)</td>
			<td>1,4 ± 1.26 (0.104)</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="4">p-value muestra la diferencia entre las puntuaciones pre- y postoperatorias</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>Tabla 1: las modalidades diversas de dolor que afectan a la piel sobre el neuroma. Las modalidades diversas de dolor que afectan a la piel sobre el neuroma fueron calificadas por nuestros pacientes de 0 a 3 para cada modalidad de dolor [ninguno (0), leve (1), moderado (2) y dolor severo (3)]. El examen clínico fue realizado antes de la cirugía y durante el seguimiento en 2, 6, 12 y 36 meses post cirugía. Puntuaciones de dolor fueron evaluados postoperatoriamente en la ubicación original del dolor, así como sobre el sitio del injerto de grasa enriquecida con SVF. Esto ha sido modificado de una anterior publicación10.

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Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

Estroma Vascular fracción enriquecida Lipo para el tratamiento de neuromas de extremo sintomáticos

El propósito del estudio es ilustrar el procedimiento técnico de fracción vascular estromal (SVF)-enriquecido de injerto de grasa como un tratamiento nuevo de extremo-neuromas sintomáticos. Esta técnica proporciona las ventajas de la barrera mecánica y la acción biológica a nivel celular por el SVF procesado y concentrado.

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

stromal-vascular-fraction-enriched-fat-grafting-for-treatment

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

7.6K vistas.  University Hospital Zurich. El propósito del estudio es ilustrar el procedimiento técnico de fracción vascular estromal (SVF)-enriquecido de injerto de grasa como un tratamiento nuevo de extremo-neuromas sintomáticos. Esta técnica proporciona las ventajas de la barrera mecánica y la acción biológica a nivel celular por el SVF procesado y concentrado.

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Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of extracellular matrix (ECM) and a variety of mesenchymal cells, including fibroblasts, myofibroblasts, endothelial cells, pericytes and leukocytes 1-3.
The tumour-associated stroma is responsive to substantial paracrine signals released by neighbouring carcinoma cells. During the disease process, the stroma often becomes populated by carcinoma-associated fibroblasts (CAFs) including large numbers of myofibroblasts. These cells have previously been extracted from many different types of human carcinomas for their in vitro culture. A subpopulation of CAFs is distinguishable through their up-regulation of &alpha;-smooth muscle actin (&alpha;-SMA) expression4,5. These cells are a hallmark of 'activated fibroblasts' that share similar properties with myofibroblasts commonly observed in injured and fibrotic tissues 6. The presence of this myofibroblastic CAF subset is highly related to high-grade malignancies and associated with poor prognoses in patients.
Many laboratories, including our own, have shown that CAFs, when injected with carcinoma cells into immunodeficient mice, are capable of substantially promoting tumourigenesis 7-10. CAFs prepared from carcinoma patients, however, frequently undergo senescence during propagation in culture limiting the extensiveness of their use throughout ongoing experimentation. To overcome this difficulty, we developed a novel technique to experimentally generate immortalised human mammary CAF cell lines (exp-CAFs) from human mammary fibroblasts, using a coimplantation breast tumour xenograft model.
In order to generate exp-CAFs, parental human mammary fibroblasts, obtained from the reduction mammoplasty tissue, were first immortalised with hTERT, the catalytic subunit of the telomerase holoenzyme, and engineered to express GFP and a puromycin resistance gene. These cells were coimplanted with MCF-7 human breast carcinoma cells expressing an activated ras oncogene (MCF-7-ras cells) into a mouse xenograft. After a period of incubation in vivo, the initially injected human mammary fibroblasts were extracted from the tumour xenografts on the basis of their puromycin resistance 11.
We observed that the resident human mammary fibroblasts have differentiated, adopting a myofibroblastic phenotype and acquired tumour-promoting properties during the course of tumour progression. Importantly, these cells, defined as exp-CAFs, closely mimic the tumour-promoting myofibroblastic phenotype of CAFs isolated from breast carcinomas dissected from patients. Our tumour xenograft-derived exp-CAFs therefore provide an effective model to study the biology of CAFs in human breast carcinomas. The described protocol may also be extended for generating and characterising various CAF populations derived from other types of human carcinomas.

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

Carcinoma-associated fibroblasts (CAFs) rich in myofibroblasts present within the tumour stroma, play a major role in driving tumour progression. We developed a coimplantation tumour xengraft model for experimentally generating CAFs from human mammary fibroblasts. The protocol describes how to establish CAF myofibroblasts that acquire an ability to promote tumourigenesis.

Generación experimental de carcinoma asociada a los fibroblastos (CAF) a partir de fibroblastos humanos mamarios

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Investigación

Medicina

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

El trasplante ortotópico aórtica en los ratones para el Estudio de la Enfermedad Vascular

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

Aspectos técnicos de la aortocava Fístula Ratón

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal cells. The tumor microenvironment is comprised of a variety of cell types, such as fibroblasts, immune cells, vascular endothelial cells, pericytes and bone-marrow-derived cells, embedded in the extracellular matrix (ECM). Cancer-associated fibroblasts (CAFs) have a pro-tumorigenic role through the secretion of soluble factors, angiogenesis and ECM remodeling. The experimental models for cancer cell survival, proliferation, migration, and invasion have mostly relied on two-dimensional monocellular and monolayer tissue cultures or Boyden chamber assays. However, these experiments do not precisely reflect the physiological or pathological conditions in a diseased organ. To gain a better understanding of tumor stromal or tumor matrix interactions, multicellular and three-dimensional cultures provide more powerful tools for investigating intercellular communication and ECM-dependent modulation of cancer cell behavior. As a platform for this type of study, we present an experimental model in which cancer cells are cultured on collagen gels embedded with primary cultures of CAFs.

Here we present a protocol to co-culture in three-dimensions, which is useful for investigating multicellular interactions and extracellular matrix-dependent modulation of cancer cell behavior. In this experimental model, cancer cells are cultured on collagen gels embedded with human cancer-associated fibroblasts.

Tridimensional Modelo Co-cultura para la interacción tumor estromal

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic transplantation of ovarian surface and tubal epithelia include intraperitoneal and intrabursal administration of cells. The respective limitations of these methods include poorly defined location of injected cells and limited space volume. Furthermore, they are poorly suited for long-term structural preservation of transplanted organs. To address these challenges, we have developed an alternative approach, which is based on the introduction of cells and tissue fragments into the mouse fat pad. The mouse ovarian fat pad is located in the immediate vicinity of the ovary and uterine tube (aka oviduct, fallopian tube), and provides a familiar microenvironment for cells and tissues of these organs. In our approach fluorescence-labeled mouse and human cells, and fragments of the uterine tube are engrafted by using minimally traumatic dorsal incision surgery. Transplanted cells and their outgrowths are easily located in the ovarian fat pad for over 40 days. Long-term transplantation of the entire uterine tube allows correct preservation of all principle tissue components, and does not result in adverse side effects, such as fibrosis and inflammation. Our approach should be uniquely applicable for answering important biological questions such as differentiation, regenerative and neoplastic potential of specific cell populations. Furthermore, it should be suitable for studies of microenvironmental factors in normal development and cancer.

We describe an ovarian fad pad transplantation assay suitable for studies of normal and transformed epithelia of the female reproductive tract. The mouse fat pad allows transplantation of large tissue fragments, is easily accessible for surgery and imaging, and provides the most favorable native environment for tissues of M&#252;llerian origin.

Trasplante en la almohadilla del ratón de ovario grasa

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control seizures. However, a significant minority of patients continues to exhibit post-operative seizures, even in those cases in which the suspected source of seizures has been correctly localized and resected. The protocol presented here combines a clinical procedure routinely employed during the pre-operative evaluation of temporal lobe epilepsy (TLE) patients with a novel technique for network analysis. The method allows for the evaluation of the temporal evolution of mesial network parameters. The bilateral insertion of foramen ovale electrodes (FOE) into the ambient cistern simultaneously records electrocortical activity at several mesial areas in the temporal lobe. Furthermore, network methodology applied to the recorded time series tracks the temporal evolution of the mesial networks both interictally and during the seizures. In this way, the presented protocol offers a unique way to visualize and quantify measures that considers the relationships between several mesial areas instead of a single area.

This protocol describes a procedure to track the evolution of mesial network measures in temporal lobe epilepsy (TLE) patients. It is based on the combination of intracranial recordings with a novel numerical technique for data analysis. Specifically, we present a protocol for network analyses of foramen ovale recordings.

Análisis de la red de foramen oval de electrodos Grabaciones en epilepsia del lóbulo temporal pacientes resistentes a los medicamentos

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could interfere with the chemotherapeutic efficacy of the primary drugs. This is especially true for the drug cisplatin, whose anticancer actions are attenuated by antioxidants which provide adequate protection against hearing loss. Other current or potential otoprotective agents could pose a similar problem, if administered systemically. The application of various biologicals or protective agents directly to the cochlea would allow for high levels of these agents locally with limited systemic side effects. In this report, we demonstrate a trans-tympanic method of delivery of various drugs or biological reagents to the cochlea, which should enhance basic science research on the cochlea and provide a simple way of directing the use of otoprotective agents in the clinics. This report details a method of trans-tympanic drug delivery and provides examples of how this technique has been used successfully in experimental animals to treat cisplatin ototoxicity.

We present a technique for localized administration of drugs through the trans-tympanic route into the cochlea. Drug delivery through this route would not interfere with the anti-cancer efficacy of the chemotherapeutic drugs such as cisplatin.

Trans-timpánica fármaco para el tratamiento de la ototoxicidad

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could ...

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the knees by using different forms of mesenchymal stem cells (MSCs). In Korea, bone marrow concentrates and cord blood-derived stem cells have been approved by the Korean Food and Drug Administration (KFDA) for cartilage regeneration. In addition, an adipose tissue-derived stromal vascular fraction (SVF) has been allowed by the KFDA for joint injections in human patients. Autologous adipose tissue-derived SVF contains extracellular matrix (ECM) in addition to mesenchymal stem cells. ECM excretes various cytokines that, along with hyaluronic acid (HA) and platelet-rich plasma (PRP) activated by calcium chloride, may help MSCs to regenerate cartilage and improve knee functions. In this article, we presented a protocol to improve knee functions by regenerating cartilage-like tissue in human patients with OA. The result of the protocol was first reported in 2011 followed by a few additional publications. The protocol involves liposuction to obtain autologous lipoaspirates that are mixed with collagenase. This lipoaspirates-collagenase mixture is then cut and homogenized to remove large fibrous tissue that may clog up the needle during the injection. Afterwards, the mixture is incubated to obtain adipose tissue-derived SVF. The resulting adipose tissue-derived SVF, containing both adipose tissue-derived MSCs and remnants of ECM, is injected into knees of patients, combined with HA and calcium chloride activated PRP. Included are three cases of patients who were treated with our protocol resulting in improvement of knee pain, swelling, and range of motion along with MRI evidence of hyaline cartilage-like tissue.

Here, we present a protocol to produce an adipose tissue-derived stromal vascular fraction and its application to improve knee functions by regenerating cartilage-like tissue in human patients with osteoarthritis.

Protocolo clínico de producir fracción Vascular estromal derivadas de tejido adiposo para potencial regeneración del cartílago

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

Isolation of Adipose Derived Regenerative Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem cells can be obtained from different tissues and several methods for isolation have been described. The presented method for the isolation of adipose-derived regenerative cells (ADRCs) can be used within many therapeutic areas because the method is a general procedure and, therefore, not limited to erectile dysfunction (ED) therapy. ED is a common and serious side effect to radical prostatectomy (RP) since ED often is not well treated with conventional therapy. Using ADRC&#8217;s as treatment for ED has attracted great interest due to the initial positive results after a single injection of cells into the corpora cavernosum. The method used for the isolation of ADRC&#8217;s is a simple, automated process, that is reproducible and ensures a uniform product. Furthermore, the sterility of the isolated product is ensured because the entire process takes place in a closed system. It is important to minimize the risk of contamination and infection since the stem cells are used for injection in humans. The whole procedure can be done within 2.5-3.5 hours and does not require a classified laboratory which eliminates the need for shipping tissue to an off-site. However, the procedure has some limitations since the minimum amount of drained lipoaspirate for the isolation device to function is 100 g.

Precise disclosure of methods and protocols is crucial for large scale uptake of stem cell therapies. Here, we present a protocol to isolate adipose-derived regenerative cells, used for a single intracavernous injection as treatment of erectile dysfunction (ED) following radical prostatectomy (RP).

Aislamiento de células regenerativas derivadas de tejido adiposo para el tratamiento de la disfunción eréctil después de la prostatectomía radical

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem ...

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major causes of mortality and morbidity around the world. Cell-based therapies for cardiac repair and improvement of left ventricular function after MI have attracted considerable attention. Accordingly, the safety and efficacy of these cell transplantations should be tested in a preclinical large animal model of HF prior to clinical use. Pigs are widely used for cardiovascular disease research due to their similarity to humans in terms of heart size and coronary anatomy. Therefore, we sought to present an effective protocol for the establishment of a porcine chronic HF model using closed-chest coronary balloon occlusion of the left circumflex artery (LCX), followed by rapid ventricular pacing induced with pacemaker implantation. Eight weeks later, the stem cells were administered by intramyocardial injection in the peri-infarct area. Then the infarct size, cell survival, and left ventricular function (including echocardiography, hemodynamic parameters, and electrophysiology) were evaluated. This study helps establish a stable preclinical large animal HF model for stem cell treatment.

We sought to establish a swine model of heart failure induced by left circumflex artery blockage and rapid pacing to test the effect and safety of intramyocardial administration of stem cells for cell-based therapies.

Establecer un modelo porcino de infarto de infarto post-miocardio insuficiencia cardíaca para el tratamiento de células madre

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major ...