המחברים לא תודות לך

הפרוטוקול עוקב אחר הקווים המנחים של אוניברסיטת בית החולים ציריך האנושי מחקר ועדת האתיקה.
1. אבחנות של Neuromata, בחירת מטופלים:
<ol><li>לבצע בלוקים עצבים לפני הניתוח proximal כדי נירומה כדי לאשר את האבחונים. להעריך את אבני בשליש האמצעי של האמה ולהשמיט מפעילים פוטנציאליים של האזורים העצבוב חופפים SBRN, כגון העצב עורית antebrachial הלטראלי (LACN), עצב interosseous האחורי (PIN), ענף הגבי של עצב הגומד 10.</li>
	<li>לבצע ניתוח רק בחולים עם כאב ניכר צמצום (לפחות 5 נקודות על חזותי אנלוגי סולם (VAS) לכאב)11.</li>
</ol>2. ניתוח הכנה
<ol><li>וחלילה החולה כל צריכת מזון או נוזלים 6 שעות לפני הניתוח.</li>
	<li>המקום החולה באמצע חבילת כירורגית על שולחן פעיל אוניברסלי בעמדה כיסא חוף.</li>
	<li>במקום הזרוע/יד המושפעים על מנוחה לזרוע.</li>
	<li>תשאל את anesthetists כדי לבצע הרדמה אנדוטרכאליות (פנטניל 2 µg/kg, rocuronium 0.6 מ"ג/ק"ג, propofol 150-250 מ"ג).</li>
	<li>לחטא את העור עם povidone יוד בשטח של שאיבת שומן (למשל בירך הפנימית ו/או הבטן העליונה/התחתונה), האתר של נירומה כריתה.</li>
	<li>לכסות את המטופל עם וילונות כירורגי סטרילי, להשאיר חשוף האתר של שאיבת שומן, באתר כירורגית.</li>
</ol>3. שאיבת שומן בפוליצר
<ol><li>להפוך מספר חתכים קטנים דקירה (ניקוב) של 3-5 מ"מ קוטר עם איזמל #11-להב באזור של שאיבת שומן. פצעים וחתכים עד כמה נגיש את השכבה התת עורית.</li>
	<li>להזריק את הפתרון בפוליצר המכיל לידוקאין שתדללו של אפינפרין (לקטט פתרון 500 מ"ל רינגר, 20 מ"ל של לידוקאין 1%, 1 מ ג אפינפרין) באמצעות המסתנן-14 (שחדר בצינורית) לתוך שכבת השומן התת עורית (3 מ מ לעומק) ב- אזור של קצירת שמן.</li>
	<li>להמתין לפחות 20 דקות ומאפשר את הפתרון בפוליצר ייכנסו לתוקף.</li>
	<li>הוק 3 מ מ איסוף בצינורית (החיצונית בקוטר 3 מ מ, אורך 26 ס"מ) 60-mL טומיי המזרק ולהתחיל קציר שומן באמצעות חתכים דקירה. הערה: היד nondominant שולט ללא הרף והשמה כמובן הצינורית.</li>
	<li>למשוך בחזרה על הבוכנה של המזרק טומיי לסימן 60-mL ולמקם מלחציים נגד יתושים לאורך הבוכנה מופנמים על מנת לשמור על לחץ שלילי במזרק, למנוע יצירת ואקום רציפה עם היד הדומיננטית.</li>
	<li>הקציר מינימום של 220 מ של רקמת שומן על-ידי הצבת את טומי? המזרקים בצורה מאונכת בבסטה מזרק טומיי שסופקו; פעולה זו מאפשרת את שיקוע של שומן, ההפרדה מן הנוזל.</li>
	<li>לקחת טיפול מיוחד כדי לקבל השתלה שמן באיכות טובה ללא כמות משמעותית של דם. הערה: לשנות את האזור של שאיבת שומן כאשר תוכן augmented דם הוא הבחין.</li>
	<li>תפר את החתכים לדקור עם תפרים פשוטים והפעילו לחץ לפי הצורך (למשל compressive חגורה).</li>
	<li>להעביר את lipoaspirate לתוך ערכה סטרילית חד-פעמיים חד פעמיות של מערכת הבידוד.</li>
	<li>שמור מזרק אחד טומיי עם lipoaspirate העמדה שמוצגת על מנת לקבל את השבר שומן עבור lipofilling מאוחר יותר.</li>
</ol>4. רקמת שומן עיבוד
<ol><li>סגור את ערכת מתכלה סטרילי. הערה: מערכת הבידוד (ראה טבלה של חומרים) מאשרת את השלמות על ידי ביצוע מבחן רטוב.</li>
	<li>בצע את ההוראות על התצוגה. הערה: התהליך הוא בעיקר תוכנה מבוקר ולא רק דורש אישור ידני עבור הצעדים המפורטים להלן על ידי לחיצה על הלחצנים 'הבא' או 'חזרה' בלוח הבקרה. Lipoaspirate מועבר לתוך המיכל אוסף רקמה. את המכל אוסף של רקמות, lipoaspirate שקל, באופן אוטומטי לנקות עם תמיסת רינגר לקטט כדי להסיר את שאריות תאי הדם ואת פתרון הרטבה.</li>
	<li>להוסיף יותר שומן אם נדרש. הערה: בהתאם המשקל של רקמת שומן שנקטפו מערכת הבידוד מבקשת מהמשתמש להוסיף יותר שומן או הוא מחשב את הסכום של ריאגנט אנזימים נוספים כדי להוסיף.</li>
	<li>להוסיף את הכמות הנדרשת של אנזים ריאגנט כאשר תתבקש על-ידי מערכת הבידוד. הערה: במהלך התהליך של עיכול אנזימטי, הפרדת שומנים בדם את SVF מושגת. ובכך, הרקמה הוא נדנוד תנועה. לאחר השלמת עיכול אנזימטי, SVF מועברים באופן אוטומטי אל החדר צנטריפוגה תא ריכוז. בבית הבליעה צנטריפוגה, SVF הוא מרוכז כדי גלולה תא (מהירות צנטריפוגה היא כ 3000 g x). לבסוף, בגדר התא עובר סדרה של שוטף עם תמיסת רינגר לקטט כדי להפחית את רמות אנזים שיורית בפלט. כאשר התהליך יושלם, 5 מ של נוזל צלול (SVF) מתקבל.</li>
</ol>5. ניתוח
<ol><li>לפנות את נירומה, עושים חתך בעור מעל האתר נירומה שאובחנו בעבר בשליש הדיסטלי של האמה.</li>
	<li>תחת השימוש כירורגי המשקפת זכוכיות מגדלת זכוכית מגדלת משקפיים (2.5-3.5 X), להמשיך לנתח את הרקמה התת עורית ולזהות proximal כדי נירומה העצב המעורבים.<ol>
<li>לאחר מכן, בצע את העצב יש ולזהות את נירומה (בהתבסס על בדיקה ויזואלית).</li>
	</ol>
</li>
	<li>לאחר ההרחבה מלא של נירומה ברור, להתחיל לסלק את נירומה על ידי חתך ישר הטרנס-עצבי מספריים. אם אין נירומה מזוהה, מבוצע רק neurolysis של העצב.</li>
	<li>המשיכו עם neurolysis של העצב הגדם שנותר עד לפרק כף היד הפרוקסימלית של 3 ס מ. הערה: בסוף הגדם עצב צריך להיות ממוקם באמצע של החתך העיקרי.</li>
	<li>לארגן שניים עד ארבעה מקומות (דקירות) חתכים (1 מ מ קוטר) עם איזמל דרך cutis באפידרמיס, עורי סביב הגישה העיקרי.</li>
	<li>מקום קנולות בוטה שניים עד ארבעה (16-מד, באורך 9 ס מ) דרך perineural חתכים לדקור את הגדם. הערה: קצה קנולות צריכות להיות מופנות כלפי הגדם עצב.</li>
	<li>אבטח את קנולות במקום על ידי ההלבשה דבק.</li>
	<li>למקם את התפרים סביב קנולות ולהשאיר את חומר תפרים באתרו ללא מאבטחים את הצומת.</li>
	<li>תפר החתך העיקרי בחוזקה כדי למנוע זרימה יוצאת של הרכבה. הערה: ודא כי קנולות נשארים באתרו.</li>
</ol>6. יישום של השתל השמן מועשר SVF
הערה: לאחר כ 1.5 h של עיבוד, 5 מיליליטר SVF מעובד הוא מוכן לשימוש נוסף.
<ol><li>וביופסיה 5 מיליליטר SVF במזרק המקיימים תקשורת 10-mL.</li>
	<li>באותו אופן, תשאף 2 מ"ל של השבר השומנים sedimented במזרק 10-mL מנוגדות.</li>
	<li>מערבבים את 5 מיליליטר SVF עם mL 2 של השבר השומנים sedimented, לסירוגין למשוך בחזרה על הבוכנה של מזרק אחד ומושך את הבוכנה של המזרק בתקשורת, היריב עד ערבוב מספיק מתקבל.</li>
	<li>לחלק השתל השמן מועשר SVF באותה מידה במזרקים 10 מ ל 2-4.</li>
	<li>להפיץ מוכן מועשרת SVF השתל שמן אחד אחרי השני באותה מידה סביב העצב סטאמפ על-ידי חיבור של המזרקים קנולות בוטה. הערה: לפני החלת השתל, לוודא קנולות מאובטחים בתנוחה הנכונה להיזהר שלא לנקוע את קנולות תוך יישום השתל השמן.</li>
	<li>הסר את קנולות בקפידה.</li>
	<li>לאחר מכן, קלטת את החתכים ניקוב קטנים עם פלסטרים.</li>
	<li>לשתק את היד על-ידי החלה של סד ב מהותי פלוס מיקום (מפרקים metacarpophalangeal (MCP) מכופפות על 60-70 מעלות המפרקים (IP) interphalangeal מוארך, האגודל בדקו האגרוף, היד כיפוף הגבי של 25°). אם רק neurolysis של העצב מבוצע, סד אין צורך וחבש את היד, כף היד הם במשך 10 ימים.</li>
</ol>7. לאחר הניתוח החולה טיפול
<ol><li>להעביר את החולה יחידת הרדמה שלאחר השחזור לאחר הניתוח, ולאפשר לניטור מספיק במחלקה.</li>
	<li>להמשיך לשתק את כף היד במשך 10 ימים לאחר הניתוח.</li>
	<li>ביצוע השינוי הראשון של תחבושות לאחר 48 שעות לאחר הניתוח ולהמשיך במרווחי זמן קבועים (כלומר כל יום השני עד השחרור).</li>
	<li>הסרת התפרים 12-14 ימים במשככי.</li>
	<li>לבצע הערכה קלינית של כאב במהלך מעקב ב- 2, 6, 12, ו- 36 חודשים.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Mackinnon, S. E., Dellon, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+treatment+of+recurrent+dorsoradial+wrist+neuromas.">Results of treatment of recurrent dorsoradial wrist neuromas.</a> Ann Plast Surg. 19 (1), 54-61 (1987).</li><li>Hazari, A., Elliot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+end-neuromas,+neuromas-in-continuity+and+scarred+nerves+of+the+digits+by+proximal+relocation.">Treatment of end-neuromas, neuromas-in-continuity and scarred nerves of the digits by proximal relocation.</a> J Hand Surg Br. 29 (4), 338-350 (2004).</li><li>Goldstein, S. A., Sturim, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraosseous+nerve+transposition+for+treatment+of+painful+neuromas.">Intraosseous nerve transposition for treatment of painful neuromas.</a> J Hand Surg Am. 10 (2), 270-274 (1985).</li><li>Koch, H., Haas, F., Hubmer, M., Rappl, T., Scharnagl, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+painful+neuroma+by+resection+and+nerve+stump+transplantation+into+a+vein.">Treatment of painful neuroma by resection and nerve stump transplantation into a vein.</a> Ann Plast Surg. 51 (1), 45-50 (2003).</li><li>Vaienti, L., Merle, M., Battiston, B., Villani, F., Gazzola, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+fat+grafting+in+the+treatment+of+painful+end-neuromas+of+the+upper+limb:+a+pilot+study.">Perineural fat grafting in the treatment of painful end-neuromas of the upper limb: a pilot study.</a> J Hand Surg Eur. 38 (1), 36-42 (2013).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilineage+cells+from+human+adipose+tissue:+implications+for+cell-based+therapies.">Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies.</a> Tissue Eng. 7 (2), 211-228 (2001).</li><li>Fraser, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Celution+System:+Automated+Processing+of+Adipose-Derived+Regenerative+Cells+in+a+Functionally+Closed+System.">The Celution System: Automated Processing of Adipose-Derived Regenerative Cells in a Functionally Closed System.</a> Adv Wound Care (New Rochelle). 3 (1), 38-45 (2014).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+vascular+fraction:+A+regenerative+reality?+Part+2:+Mechanisms+of+regenerative+action.">Stromal vascular fraction: A regenerative reality? Part 2: Mechanisms of regenerative action.</a> J Plast Reconstr Aesthet Surg. 69 (2), 180-188 (2015).</li><li>Lutz, B. S., Ma, S. F., Chuang, D. C., Chan, K. H., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interposition+of+a+pedicle+fat+flap+significantly+improves+specificity+of+reinnervation+and+motor+recovery+after+repair+of+transected+nerves+in+adjacency+in+rats.">Interposition of a pedicle fat flap significantly improves specificity of reinnervation and motor recovery after repair of transected nerves in adjacency in rats.</a> Plast Reconstr Surg. 107 (1), 116-123 (2001).</li><li>Calcagni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+novel+treatment+of+SVF-enriched+fat+grafting+for+painful+end-neuromas+of+superficial+radial+nerve.">The novel treatment of SVF-enriched fat grafting for painful end-neuromas of superficial radial nerve.</a> Microsurgery. , (2016).</li><li>Hawker, G. A., Mian, S., Kendzerska, T., French, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measures+of+adult+pain:+Visual+Analog+Scale+for+Pain+(VAS+Pain),+Numeric+Rating+Scale+for+Pain+(NRS+Pain),+McGill+Pain+Questionnaire+(MPQ),+Short-Form+McGill+Pain+Questionnaire+(SF-MPQ),+Chronic+Pain+Grade+Scale+(CPGS),+Short+Form-36+Bodily+Pain+Scale+(SF-36+BPS),+and+Measure+of+Intermittent+and+Constant+Osteoarthritis+Pain+(ICOAP).">Measures of adult pain: Visual Analog Scale for Pain (VAS Pain), Numeric Rating Scale for Pain (NRS Pain), McGill Pain Questionnaire (MPQ), Short-Form McGill Pain Questionnaire (SF-MPQ), Chronic Pain Grade Scale (CPGS), Short Form-36 Bodily Pain Scale (SF-36 BPS), and Measure of Intermittent and Constant Osteoarthritis Pain (ICOAP).</a> Arthritis Care Res (Hoboken). 63 Suppl. 63, S240-S252 (2011).</li><li>Stokvis, A., van der Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+neuroma+pain:+a+prospective+follow-up+study.">Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study.</a> Pain. 151 (3), 862-869 (2010).</li><li>Kolle, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enrichment+of+autologous+fat+grafts+with+ex-vivo+expanded+adipose+tissue-derived+stem+cells+for+graft+survival:+a+randomised+placebo-controlled+trial.">Enrichment of autologous fat grafts with ex-vivo expanded adipose tissue-derived stem cells for graft survival: a randomised placebo-controlled trial.</a> Lancet. 382 (9898), 1113-1120 (2013).</li><li>Zhu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+regeneration+after+free+fat+transplantation:+promotion+by+stromal+vascular+fraction+cells.">Adipocyte regeneration after free fat transplantation: promotion by stromal vascular fraction cells.</a> Cell Transplant. 24 (1), 49-62 (2015).</li><li>Eto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+human+adipose+tissue-resident+hematopoietic+cell+populations+reveals+a+novel+macrophage+subpopulation+with+CD34+expression+and+mesenchymal+multipotency.">Characterization of human adipose tissue-resident hematopoietic cell populations reveals a novel macrophage subpopulation with CD34 expression and mesenchymal multipotency.</a> Stem Cells Dev. 22 (6), 985-997 (2013).</li><li>Premaratne, G. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+vascular+fraction+transplantation+as+an+alternative+therapy+for+ischemic+heart+failure:+anti-inflammatory+role.">Stromal vascular fraction transplantation as an alternative therapy for ischemic heart failure: anti-inflammatory role.</a> J Cardiothorac Surg. 6, 43 (2011).</li><li>Paik, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+Fat+Grafting:+Part+V.+Cell-Assisted+Lipotransfer+to+Enhance+Fat+Graft+Retention+Is+Dose+Dependent.">Studies in Fat Grafting: Part V. Cell-Assisted Lipotransfer to Enhance Fat Graft Retention Is Dose Dependent.</a> Plast Reconstr Surg. 136 (1), 67-75 (2015).</li></ol>

המחברים אין לחשוף.

מטרת המחקר הנוכחי היא להמחיש באופן שיטתי את ההיבטים הטכניים של מועשרת SVF הרכבה השמן לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata רומן.
Neuromata של SBRN קשורים עם שיעור הצלחה כירורגי של 33% רק12. . Vaienti et al. הציג שורה של תוצאות חיוביות בתחילת המעקב באמצעות perineural שומן הרכבה (PFG) ?...

הנהלת סימפטומטי סוף-neuromata של SBRN נותר מאתגר עם שפע של טיפולים כירורגיים הקיים. ב־1995, נירומה זה טוחנות, עצב הגדם שנותר פלשתין למבנים הסמוכים כגון שרירים1,2, עצם3או ורידים4. ההנחה היא כדי למנוע מחוץ לבלוב ההתחדשות fascicles עצבית על ידי מחקה את האווירה של איבר בסוף. עם זאת, אף אחת משיטות אלה הוכיח עליון, כפי שיעור גבוה של כאב נסיגה וצמצום כאב לא מספיקות נצפו לעתים קרובות.
לאחרונה, הרכבה שומן סביב עצב הגדם שנותר הניבו תוצאות מבטיחות, היה דגלו בתור אפשרות טיפול חדשה עבור סוף כואב-neuromata של הגפיים העליונות5. חוץ מתנהג כמו מחסום מכני כדי למנוע תנועה מתמשכת, הקש על כאב, ההיבט מועילות של הרכבה השמן מיוחס מעדיף מהרמה התאית. רקמת שומן אנושי מכיל סוגי תאים מרובים, כולל preadipocytes, תאי פיטום, pericytes, תאי אנדותל, תאי השריר החלק בכלי הדם, fibroblasts, אדיפוז נגזר תאי גזע (ADSCs) יחד עם תאי גזע hematopoietic6. אוכלוסייה הטרוגנית תא זו נחשבת Adipose-Derived התחדשות תאים (ADRCs) או SVF, ניתן להשיג את lipoaspirate על ידי מערכת הבידוד (ראה טבלה של החומרים), ריאגנט אנזים יישומית (ראה טבלה של חומרים )7. מנגנון הפעולה המדויק עדיין לא לגמרי מובנת; עם זאת, SVF שויכה שיפורים אנגיוגנזה, immunomodulation, בידול, הפרשת מטריצה חוץ-תאית8.
האוכלוסייה מרוכזת תא SVF מתווסף השתל שומן במטרה להקטין את קצב ספיגת וכדי להגדיל את פוטנציאל הרגנרציה של השתל השמן, כמו מחקרים שנעשו לאחרונה חשף relapse כאב לאחר 12 חודשים עם הרכבה שומן ללא SVF הוסיף 5. יתר על כן, הפעולה הביולוגית מספק גם השפעות מועילות על העצב עצמו על-ידי הפחתת עצב לא מאורגן הלבלוב של הגדם9 , adherences צלקת עוקבות אשר עלול לגרום עצב מלכוד.
המחקר הקליני הראשון לתאר מועשרת SVF הרכבה השמן האופציה הכירורגית חדשניים לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata של SBRN כבר פרסם לאחרונה10. באופן כללי, הטכניקה ניתן ליישם כל נירומה המתרחשים לאחר פגיעה בשוגג או iatrogenic עצב. מטרת המחקר הבאים הנוכחי היא להמחיש באופן שיטתי את ההיבטים הטכניים של הליך זה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="688">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Cytori Celution System</td>
			<td style="width:71px;">Cytori</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">isolation system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Celase</td>
			<td style="width:71px;">Cytori</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>enyzme reagent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">liposuction system</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">tumescent solution (500 ml Lactated Ringers, 20 ml of 1% lidocaine and 1 mg epinephrine)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">14-gauge infiltrator</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3 mm-collecting cannula (15, 26, 32 cm)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60 mL Tommey syringes</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">mosquito clamp</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Toomey syringe stand</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">4 cannulas (fat injecting cannulas 1.5 mm, syringe NO.2, 90 mm)</td>
			<td style="width:71px;">Chalybs</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">10 mL syringes</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">connecting device for syringes</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">#11- and #15-blade scalpel</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">stevens scissors</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">pins pincette</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">bipolar electrocautery</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">suture material</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">adhesive dressing</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">binocular loupes magnifier glasses (2.5-3.5x)</td>
			<td style="width:71px;">Carl Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">Statistical Package for Social Sciences, version 22</td>
			<td>IBM</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

stromal vascular fraction-enriched fat grafting for the treatment of symptomatic end-neuromata

מטרת מחקר זה הייתה להמחיש באופן שיטתי והצל את השלבים מכריע של השבר בכלי הדם סטרומה (SVF)-מועשר ושמן הארכת כטיפול הרומן של סוף סימפטומטי-neuromata של העצבים החישה היקפיים, במחקר זה, במיוחד הסניף שטחית של עצב רדיאלי (SBRN). למרות שפע של טיפולים קיימים, כאב לאחר הניתוח מתמשך relapse כאב נפוצים הם עדיין נפוץ מאוד, עצמאית של ההליך העריך. נירומה הוא פרוטוקול בהתאם ל מתוקננת נכרת מתחת ללשון. במקום המעבר של הגדם עצב ההתחדשות שכנות מבנים אנטומיים, כגון שרירים או עצמות, השתלה השמן הוא perifocally יישומית, משמש כמחסום מכני. על מנת להקטין את קצב ספיגת שומן, להגביר את פוטנציאל הרגנרציה של השתל, משולב של SVF מרוכז משתילים. SVF מופרד מן השומן התת עורית על ידי הפרדת lipoaspirate על-ידי מערכת הבידוד מסחריים ספציפיים אנזימטיות, מכונאי. השתל השמן מועשר SVF מספק מחסום מכני וגם השפעות ביולוגיות שונות ברמה התאית, כולל שיפור אנגיוגנזה, דלקת, פיברוזיס. אפקטים מכני וגם וחיסונים לעזור להפחית את תוצר עצב לא מאורגן של הגדם עצב במהלך התחדשות העצבים ולכן למנוע הישנות של סוף כואב-neuromata.

הנתונים נותחו באמצעות תוכנה סטטיסטית והציג כפי שאומר סטיות תקן ±. מבחן קולמוגורוב-סמירנוב הוחלה כדי לאמת את ההתפלגות nonparametric מאוכלוסיית המחקר ואישר התפלגות אמפירי שלילי. בהתבסס על האופי nonparametric של אוכלוסיית המחקר, לבדיקת של Wilcoxon דגימות קשורים הועסק כדי להשוות בין תוצאות...

Watch this Scientific Journal Video about Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata at JoVE.com

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

סטרומה כלי דם מועשר שבר השמן הרכבה לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata

מטרת המחקר היא כדי להמחיש את ההליך הטכני של השבר בכלי הדם סטרומה (SVF)-מועשר הרכבה שמנה כמו טיפול הרומן של סוף סימפטומטי-neuromata. טכניקה זו מספקת יתרונות של המכשול מכני וגם הפעולה ביולוגית ברמה התאית על ידי SVF מעובד ומרוכז.

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

stromal-vascular-fraction-enriched-fat-grafting-for-treatment

Research

JoVE Journal

Medicine

7.6K Views.  University Hospital Zurich. מטרת המחקר היא כדי להמחיש את ההליך הטכני של השבר בכלי הדם סטרומה (SVF)-מועשר הרכבה שמנה כמו טיפול הרומן של סוף סימפטומטי-neuromata. טכניקה זו מספקת יתרונות של המכשול מכני וגם הפעולה ביולוגית ברמה התאית על ידי SVF מעובד ומרוכז.

Video: Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of extracellular matrix (ECM) and a variety of mesenchymal cells, including fibroblasts, myofibroblasts, endothelial cells, pericytes and leukocytes 1-3.
The tumour-associated stroma is responsive to substantial paracrine signals released by neighbouring carcinoma cells. During the disease process, the stroma often becomes populated by carcinoma-associated fibroblasts (CAFs) including large numbers of myofibroblasts. These cells have previously been extracted from many different types of human carcinomas for their in vitro culture. A subpopulation of CAFs is distinguishable through their up-regulation of &alpha;-smooth muscle actin (&alpha;-SMA) expression4,5. These cells are a hallmark of 'activated fibroblasts' that share similar properties with myofibroblasts commonly observed in injured and fibrotic tissues 6. The presence of this myofibroblastic CAF subset is highly related to high-grade malignancies and associated with poor prognoses in patients.
Many laboratories, including our own, have shown that CAFs, when injected with carcinoma cells into immunodeficient mice, are capable of substantially promoting tumourigenesis 7-10. CAFs prepared from carcinoma patients, however, frequently undergo senescence during propagation in culture limiting the extensiveness of their use throughout ongoing experimentation. To overcome this difficulty, we developed a novel technique to experimentally generate immortalised human mammary CAF cell lines (exp-CAFs) from human mammary fibroblasts, using a coimplantation breast tumour xenograft model.
In order to generate exp-CAFs, parental human mammary fibroblasts, obtained from the reduction mammoplasty tissue, were first immortalised with hTERT, the catalytic subunit of the telomerase holoenzyme, and engineered to express GFP and a puromycin resistance gene. These cells were coimplanted with MCF-7 human breast carcinoma cells expressing an activated ras oncogene (MCF-7-ras cells) into a mouse xenograft. After a period of incubation in vivo, the initially injected human mammary fibroblasts were extracted from the tumour xenografts on the basis of their puromycin resistance 11.
We observed that the resident human mammary fibroblasts have differentiated, adopting a myofibroblastic phenotype and acquired tumour-promoting properties during the course of tumour progression. Importantly, these cells, defined as exp-CAFs, closely mimic the tumour-promoting myofibroblastic phenotype of CAFs isolated from breast carcinomas dissected from patients. Our tumour xenograft-derived exp-CAFs therefore provide an effective model to study the biology of CAFs in human breast carcinomas. The described protocol may also be extended for generating and characterising various CAF populations derived from other types of human carcinomas.

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

Carcinoma-associated fibroblasts (CAFs) rich in myofibroblasts present within the tumour stroma, play a major role in driving tumour progression. We developed a coimplantation tumour xengraft model for experimentally generating CAFs from human mammary fibroblasts. The protocol describes how to establish CAF myofibroblasts that acquire an ability to promote tumourigenesis.

הדור ניסויית של קרצינומה-Associated Fibroblasts (CAFs) מ Fibroblasts החלב אנוש

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

השתלת אב עורקים בעכברי orthotopic לחקר מחלת כלי דם

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

היבטים טכניים של מורסת Aortocaval מאוס

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal cells. The tumor microenvironment is comprised of a variety of cell types, such as fibroblasts, immune cells, vascular endothelial cells, pericytes and bone-marrow-derived cells, embedded in the extracellular matrix (ECM). Cancer-associated fibroblasts (CAFs) have a pro-tumorigenic role through the secretion of soluble factors, angiogenesis and ECM remodeling. The experimental models for cancer cell survival, proliferation, migration, and invasion have mostly relied on two-dimensional monocellular and monolayer tissue cultures or Boyden chamber assays. However, these experiments do not precisely reflect the physiological or pathological conditions in a diseased organ. To gain a better understanding of tumor stromal or tumor matrix interactions, multicellular and three-dimensional cultures provide more powerful tools for investigating intercellular communication and ECM-dependent modulation of cancer cell behavior. As a platform for this type of study, we present an experimental model in which cancer cells are cultured on collagen gels embedded with primary cultures of CAFs.

Here we present a protocol to co-culture in three-dimensions, which is useful for investigating multicellular interactions and extracellular matrix-dependent modulation of cancer cell behavior. In this experimental model, cancer cells are cultured on collagen gels embedded with human cancer-associated fibroblasts.

מודל שיתוף תרבות תלת-ממדי לגידול אינטראקציה-סטרומה

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic transplantation of ovarian surface and tubal epithelia include intraperitoneal and intrabursal administration of cells. The respective limitations of these methods include poorly defined location of injected cells and limited space volume. Furthermore, they are poorly suited for long-term structural preservation of transplanted organs. To address these challenges, we have developed an alternative approach, which is based on the introduction of cells and tissue fragments into the mouse fat pad. The mouse ovarian fat pad is located in the immediate vicinity of the ovary and uterine tube (aka oviduct, fallopian tube), and provides a familiar microenvironment for cells and tissues of these organs. In our approach fluorescence-labeled mouse and human cells, and fragments of the uterine tube are engrafted by using minimally traumatic dorsal incision surgery. Transplanted cells and their outgrowths are easily located in the ovarian fat pad for over 40 days. Long-term transplantation of the entire uterine tube allows correct preservation of all principle tissue components, and does not result in adverse side effects, such as fibrosis and inflammation. Our approach should be uniquely applicable for answering important biological questions such as differentiation, regenerative and neoplastic potential of specific cell populations. Furthermore, it should be suitable for studies of microenvironmental factors in normal development and cancer.

We describe an ovarian fad pad transplantation assay suitable for studies of normal and transformed epithelia of the female reproductive tract. The mouse fat pad allows transplantation of large tissue fragments, is easily accessible for surgery and imaging, and provides the most favorable native environment for tissues of M&#252;llerian origin.

השתלת לתוך כרית עכבר השחלות שומן

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control seizures. However, a significant minority of patients continues to exhibit post-operative seizures, even in those cases in which the suspected source of seizures has been correctly localized and resected. The protocol presented here combines a clinical procedure routinely employed during the pre-operative evaluation of temporal lobe epilepsy (TLE) patients with a novel technique for network analysis. The method allows for the evaluation of the temporal evolution of mesial network parameters. The bilateral insertion of foramen ovale electrodes (FOE) into the ambient cistern simultaneously records electrocortical activity at several mesial areas in the temporal lobe. Furthermore, network methodology applied to the recorded time series tracks the temporal evolution of the mesial networks both interictally and during the seizures. In this way, the presented protocol offers a unique way to visualize and quantify measures that considers the relationships between several mesial areas instead of a single area.

This protocol describes a procedure to track the evolution of mesial network measures in temporal lobe epilepsy (TLE) patients. It is based on the combination of intracranial recordings with a novel numerical technique for data analysis. Specifically, we present a protocol for network analyses of foramen ovale recordings.

ניתוח רשת של הקלטות אלקטרודה foramen ovale בחולים עמידים בפני תרופות Temporal Lobe אפילפסיה

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could interfere with the chemotherapeutic efficacy of the primary drugs. This is especially true for the drug cisplatin, whose anticancer actions are attenuated by antioxidants which provide adequate protection against hearing loss. Other current or potential otoprotective agents could pose a similar problem, if administered systemically. The application of various biologicals or protective agents directly to the cochlea would allow for high levels of these agents locally with limited systemic side effects. In this report, we demonstrate a trans-tympanic method of delivery of various drugs or biological reagents to the cochlea, which should enhance basic science research on the cochlea and provide a simple way of directing the use of otoprotective agents in the clinics. This report details a method of trans-tympanic drug delivery and provides examples of how this technique has been used successfully in experimental animals to treat cisplatin ototoxicity.

We present a technique for localized administration of drugs through the trans-tympanic route into the cochlea. Drug delivery through this route would not interfere with the anti-cancer efficacy of the chemotherapeutic drugs such as cisplatin.

משלוח סמים טרנס-Tympanic לטיפול Ototoxicity

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could ...

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the knees by using different forms of mesenchymal stem cells (MSCs). In Korea, bone marrow concentrates and cord blood-derived stem cells have been approved by the Korean Food and Drug Administration (KFDA) for cartilage regeneration. In addition, an adipose tissue-derived stromal vascular fraction (SVF) has been allowed by the KFDA for joint injections in human patients. Autologous adipose tissue-derived SVF contains extracellular matrix (ECM) in addition to mesenchymal stem cells. ECM excretes various cytokines that, along with hyaluronic acid (HA) and platelet-rich plasma (PRP) activated by calcium chloride, may help MSCs to regenerate cartilage and improve knee functions. In this article, we presented a protocol to improve knee functions by regenerating cartilage-like tissue in human patients with OA. The result of the protocol was first reported in 2011 followed by a few additional publications. The protocol involves liposuction to obtain autologous lipoaspirates that are mixed with collagenase. This lipoaspirates-collagenase mixture is then cut and homogenized to remove large fibrous tissue that may clog up the needle during the injection. Afterwards, the mixture is incubated to obtain adipose tissue-derived SVF. The resulting adipose tissue-derived SVF, containing both adipose tissue-derived MSCs and remnants of ECM, is injected into knees of patients, combined with HA and calcium chloride activated PRP. Included are three cases of patients who were treated with our protocol resulting in improvement of knee pain, swelling, and range of motion along with MRI evidence of hyaline cartilage-like tissue.

Here, we present a protocol to produce an adipose tissue-derived stromal vascular fraction and its application to improve knee functions by regenerating cartilage-like tissue in human patients with osteoarthritis.

פרוטוקול קליני של ייצור רקמת שומן-Derived השבר בכלי הדם סטרומה עבור פוטנציאל התחדשות הסחוס

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

Isolation of Adipose Derived Regenerative Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem cells can be obtained from different tissues and several methods for isolation have been described. The presented method for the isolation of adipose-derived regenerative cells (ADRCs) can be used within many therapeutic areas because the method is a general procedure and, therefore, not limited to erectile dysfunction (ED) therapy. ED is a common and serious side effect to radical prostatectomy (RP) since ED often is not well treated with conventional therapy. Using ADRC&#8217;s as treatment for ED has attracted great interest due to the initial positive results after a single injection of cells into the corpora cavernosum. The method used for the isolation of ADRC&#8217;s is a simple, automated process, that is reproducible and ensures a uniform product. Furthermore, the sterility of the isolated product is ensured because the entire process takes place in a closed system. It is important to minimize the risk of contamination and infection since the stem cells are used for injection in humans. The whole procedure can be done within 2.5-3.5 hours and does not require a classified laboratory which eliminates the need for shipping tissue to an off-site. However, the procedure has some limitations since the minimum amount of drained lipoaspirate for the isolation device to function is 100 g.

Precise disclosure of methods and protocols is crucial for large scale uptake of stem cell therapies. Here, we present a protocol to isolate adipose-derived regenerative cells, used for a single intracavernous injection as treatment of erectile dysfunction (ED) following radical prostatectomy (RP).

בידוד של תאים רגנרטיביים שמקורם בשומן לטיפול בבעיות זיקפה בעקבות כריתת ערמונית רדיקלית

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem ...

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major causes of mortality and morbidity around the world. Cell-based therapies for cardiac repair and improvement of left ventricular function after MI have attracted considerable attention. Accordingly, the safety and efficacy of these cell transplantations should be tested in a preclinical large animal model of HF prior to clinical use. Pigs are widely used for cardiovascular disease research due to their similarity to humans in terms of heart size and coronary anatomy. Therefore, we sought to present an effective protocol for the establishment of a porcine chronic HF model using closed-chest coronary balloon occlusion of the left circumflex artery (LCX), followed by rapid ventricular pacing induced with pacemaker implantation. Eight weeks later, the stem cells were administered by intramyocardial injection in the peri-infarct area. Then the infarct size, cell survival, and left ventricular function (including echocardiography, hemodynamic parameters, and electrophysiology) were evaluated. This study helps establish a stable preclinical large animal HF model for stem cell treatment.

We sought to establish a swine model of heart failure induced by left circumflex artery blockage and rapid pacing to test the effect and safety of intramyocardial administration of stem cells for cell-based therapies.

הקמת מודל חזירים של אי ספיקת לב לאחר שריר הלב לטיפול בתאי גזע

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major ...