Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de lesiones por quemaduras sobre el manejo de heridas de guerra o cómo tratar las heridas por quemaduras después de un accidente de incendio. La principal ventaja de este modelo de lesión por quemaduras porcina es el grado de similitud entre la estructura anatómica y la estructura fisiológica del tejido de la piel de cerdo y humano. Aunque este método puede proporcionar información sobre los efectos de los apósitos de polisacárido de alginato de calcio en la cicatrización de la herida por quemaduras, también se puede aplicar a estudios de manejo de quemaduras.
Antes de entregar la quemadura, afeita y humedad un área de piel de aproximadamente 25 centímetros de ancho desde la columna vertebral hasta la axila a ambos lados de la columna vertebral de un cerdo adulto anestesiado. Luego, frota la piel expuesta con povidona-yodo durante aproximadamente cinco minutos. Use gasa estéril húmeda para eliminar el jabón de yodo povidona y esterilizar la piel limpia con loción de povidona-yodo.
Y usa una pluma de marcado quirúrgico para demarcar el centro de seis lugares de la herida quemada en el dorso del animal. A continuación, cubra al animal con cortinas quirúrgicas estériles, cuidando que la distancia entre cada área sea al menos mayor que el radio de la zona. Cuando todas las áreas hayan sido marcadas, llene un soldador modificado equipado con un área plana de aproximadamente nueve centímetros cuadrados con 50 mililitros de glicerina, e inserte un termómetro electrónico en el hierro para monitorear la temperatura.
Después de calentar la plancha a 137 a 139 grados Celsius en una placa caliente, presione suavemente la plancha sobre cada área marcada durante 30 segundos por área para crear seis heridas de quemadura uniforme. Cuando el hierro calentado toque la piel, el calor se disipará inmediatamente a través de la superficie de la zona quemada, así que asegúrese de precalentar el hierro y la glicerina durante al menos 10 minutos antes de aplicar las quemaduras. A continuación, lave las heridas con una solución salina al 0,9%, y mida y registre las dimensiones de la herida por fotomicrografía.
Una vez medidas todas las heridas, aplicar los apósitos directamente sobre cada herida, seguido de la aplicación de una película impermeable sobre la capa de apósito interior para servir como barrera contra la penetración bacteriana. Luego, pegue una gasa de 5 centímetros de espesor sobre cada herida para servir como la capa media del apósito, y asegure la gasa con una capa externa de yeso adhesivo, extendiendo el yeso al torso para evitar el desplazamiento del apósito. Cambiar los apósitos clínicos cada dos días durante los primeros 10 días, luego dos veces por semana hasta el día 42, limpiando y midiendo las heridas de acuerdo con la Escala De Cicatrices de Vancouver antes de cada reaplicación de apósito.
Suéltar la herida para pruebas antibacterianas en los días de post-quemadura cero, siete, 21 y 42, y coloque los hisopos en 100 mililitros de 0.9% solución salina estéril. A vórtice suavemente los hisopos para obtener una suspensión homogénea y diluya en serie la solución celular resultante. A continuación, la placa 100 microlitros de cada dilución en medio selectivo o no selectivo, e incubar el cultivo de la herida en condiciones aeróbicas a 37 grados centígrados durante 24 a 72 horas.
Al final de la incubación, placa 10-microliter alícuotas de cada cultivo de dilución en triplicado sobre placas de agar de sangre complementadas con 5% de sangre de oveja para el cultivo nocturno a 37 grados centígrados. A la mañana siguiente, usa un marcador y una pequeña regla para dividir la parte inferior de cada plato en cuatro cuadrantes iguales, y determina el número de unidades formadoras de colonias en cada cuadrante bajo un microscopio de disección. En este experimento representativo, la ree epitelización de las heridas por quemaduras se evaluó mediante una inspección bruta en el día 42 posterior a la quemadura.
Se observó una reducción significativa en el área de la herida en comparación con el día cero. La tasa de curación se definió como la mayor distancia media del margen de la herida desde el centro de la herida dividida por el tiempo para completar el cierre de la herida, lo que demuestra más del 73% de cierre de la herida en el día 42 posterior a la quemadura. Las puntuaciones de la cicatriz de Vancouver alcanzaron su punto máximo en el día 21 posterior a la quemadura y disminuyeron a menos del tamaño inicial de la herida en el día 42 posterior a la quema.
El examen histológico de las muestras de piel cosechadas el día 42 confirmó que se lograron quemaduras de espesor total y que las heridas parecían estar completamente curadas. Se pudo observar necrosis resultante de quemaduras en la epidermis, la dermis y los componentes dérmicos de la herida sin afectar significativamente el músculo subyacente. El grosor debajo del apósito experimental era de 5,4 milímetros, y se observaron desprendimientos dérmicos e infiltración linfocítica.
Los cultivos bacterianos de hisopos de heridas recogidos en los días cero, siete, 21 y 42 post-quemado demostraron un ligero aumento en las unidades formadoras de colonias de los días cero a 21 que aumentaron significativamente el día 42, confirmando que este modelo porcino de lesión por quemaduras grave puede utilizarse para monitorear el rendimiento clínico de los apósitos experimentales. Al intentar este procedimiento, es importante recordar saber cómo manejar al animal y luego monitorear adecuadamente el signo vital del animal durante el período de evento. Después de este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como experimentos de crecimiento bacteriano para responder preguntas adicionales sobre cómo funcionan los materiales de polisacáridos naturales en casos de lesiones por quemaduras graves.
Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo de la cicatrización de la herida por quemaduras exploraran los efectos de los apósitos naturales de polisacárido de alginato de calcio en la cicatrización de la piel humana. No olvide que trabajar con hierro calentado y glicerina puede ser extremadamente peligroso y que las precauciones como el funcionamiento de los equipos siempre deben tomarse durante la realización del procedimiento.
