Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans le domaine des blessures par brûlure au sujet de la manipulation des plaies de guerre ou de la façon de traiter les brûlures après un accident d’incendie. Le principal avantage de ce modèle de lésion de brûlure de porc est le degré de similitude entre la structure anatomique et physiologique du porc et du tissu humain de peau. Bien que cette méthode puisse fournir un aperçu des effets des pansements de polysaccharide d’alginate de calcium sur la guérison de blessure de brûlure, elle peut également être appliquée aux études de gestion de brûlure.
Avant de livrer la brûlure, le rasage et l’humidité d’une zone d’environ 25 centimètres de large de la peau de la colonne vertébrale jusqu’à l’axilla des deux côtés de la colonne vertébrale d’un porc adulte anesthésié. Ensuite, frottez la peau exposée avec de la povidone-iode pendant environ cinq minutes. Utilisez de la gaze stérile humide pour enlever le savon povidone-iode, et stérilisez la peau propre avec de la lotion povidone-iode.
Et utilisez un stylo de marquage chirurgical pour délimiter le centre de six plaies brûlées sur le dorsum de l’animal. Ensuite, couvrez l’animal de rideaux chirurgicaux stériles, en prenant soin que la distance entre chaque zone est au moins supérieure au rayon de la zone. Lorsque toutes les zones ont été marquées, remplissez un fer à souiller modifié équipé d’une surface plate d’environ neuf centimètres carrés avec 50 millilitres de glycérine, et insérez un thermomètre électronique dans le fer pour surveiller la température.
Après avoir chauffé le fer à 137 à 139 degrés Celsius sur une plaque chauffante, appuyez doucement sur le fer sur chaque zone marquée pendant 30 secondes par zone pour créer six brûlures uniformes. Lorsque le fer chauffé touche la peau, la chaleur se dissipe immédiatement à travers la surface de la zone brûlée, alors assurez-vous de préchauffer le fer et la glycérine pendant au moins 10 minutes avant d’appliquer les brûlures. Ensuite, lavez les plaies avec une solution saline de 0,9 %, mesurez et enregistrez les dimensions des plaies par photomicrographie.
Lorsque toutes les plaies ont été mesurées, appliquer les pansements directement sur chaque plaie, suivie de l’application d’un film étanche sur la couche intérieure de pansement pour servir de barrière contre la pénétration bactérienne. Ensuite, collez un morceau de gaze de 5 centimètres d’épaisseur sur chaque plaie pour servir de mi-couche du pansement, et fixez la gaze avec une couche extérieure de plâtre adhésif, étendant le plâtre au torse pour éviter le déplacement du pansement. Changez les pansements cliniques tous les deux jours pendant les 10 premiers jours, puis deux fois par semaine jusqu’au jour 42, en nettoyant et en mesurant les plaies selon l’échelle des cicatrices de Vancouver avant chaque réapplication du pansement.
Écouvillonner la plaie pour les tests antibactériens les jours de post-brûlure zéro, sept, 21 et 42, et placer les écouvillons dans 100 millilitres de solution saline stérile de 0,9%. Vortex doucement les écouvillons pour obtenir une suspension homogène, et diluer en série la solution cellulaire résultante. Ensuite, plaquez 100 microlitres de chaque dilution dans un milieu sélectif ou non sélectif, et incubez la culture des plaies dans des conditions aérobies à 37 degrés Celsius pendant 24 à 72 heures.
À la fin de l’incubation, plaque 10-microliter aliquots de chaque culture de dilution en triplicate sur des plaques d’agar de sang complétées avec 5% de sang de mouton pour la culture de nuit à 37 degrés Celsius. Le lendemain matin, utilisez un marqueur et une petite règle pour diviser le fond de chaque plat en quatre quadrants égaux, et déterminer le nombre d’unités formant des colonies dans chaque quadrant sous un microscope disséquant. Dans cette expérience représentative, la rééthélialisation des brûlures a été évaluée par inspection grossière le jour 42 après la brûlure.
Une réduction significative de la zone de blessure a été observée par rapport au jour zéro. Le taux de guérison a été défini comme la plus grande distance moyenne de marge de blessure du centre de blessure divisé par le temps pour compléter la fermeture de blessure, démontrant plus de 73% fermeture de blessure le jour 42 d’après-brûlure. Les scores de cicatrice de Vancouver ont atteint un sommet le jour 21 après la brûlure et sont tombés à moins que la taille initiale de la plaie au jour 42 après la brûlure.
L’examen histologique des échantillons de peau prélevés le jour 42 a confirmé que des brûlures de pleine épaisseur ont été réalisées et que les blessures semblaient être entièrement guéries. La nécrose résultant des brûlures a pu être observée dans les composants épidermiques, derme, et dermiques de la blessure sans affecter de manière significative le muscle sous-jacent. L’épaisseur sous le pansement expérimental était de 5,4 millimètres, et le sloughing dermique et l’infiltration lymphocytique ont été observés.
Les cultures bactériennes d’écouvillons de plaies prélevés après la combustion les jours zéro, sept, 21 et 42 ont démontré une légère augmentation des unités formant des colonies de jours zéro à 21 qui ont été considérablement augmentées le jour 42, confirmant que ce modèle porcin de brûlures graves peut être utilisé pour surveiller la performance clinique des pansements expérimentaux. Tout en essayant cette procédure, il est important de se rappeler de savoir comment manipuler l’animal, puis de surveiller correctement le signe vital de l’animal pendant la période événementale. Après cette procédure, d’autres méthodes comme les expériences de croissance bactérienne peuvent être effectuées pour répondre à des questions supplémentaires sur la façon dont les matériaux polysaccharides naturels fonctionnent en cas de brûlure grave.
Après son développement, cette technique a ouvert la voie à des chercheurs dans le domaine de la cicatrisation des plaies brûlées afin d’explorer les effets des pansements naturels en polysaccharide d’alginate de calcium dans la guérison de la peau humaine. N’oubliez pas que travailler avec du fer chauffé et de la glycérine peut être extrêmement dangereux et que des précautions telles que le fonctionnement de l’équipement doivent toujours être prises lors de l’exécution de la procédure.
