Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo delle lesioni da ustione sulla gestione delle ferite da guerra o su come trattare le ferite da ustione dopo un incidente di fuoco. Il principale vantaggio di questo modello di lesione da ustione dei suini è il grado di somiglianza tra la struttura anatomica e fisiologica del maiale e del tessuto cutaneo umano. Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sugli effetti delle medicazioni di polisaccaride alginato di calcio sulla guarigione delle ferite bruciate, può anche essere applicato agli studi sulla gestione delle ustioni.
Prima di fornire l'ustione, la rasatura e l'umidità di un'area di pelle larga circa 25 centimetri dalla colonna vertebrale fino all'ascella su entrambi i lati della colonna vertebrale di un maiale adulto anestetizzato. Quindi, strofinare la pelle esposta con povidone-iodio per circa cinque minuti. Utilizzare una garza sterile bagnata per rimuovere il sapone povidone-iodio e sterilizzare la pelle pulita con lozione povidone-iodio.
E usa una penna di marcatura chirurgica per delimitare il centro di sei posizioni di ferite bruciate sul dorsum dell'animale. Quindi, coprire l'animale con tende chirurgiche sterili, facendo attenzione che la distanza tra ogni area sia almeno maggiore del raggio dell'area. Una volta contrassegnate tutte le aree, riempire un ferro da saldare modificato dotato di un'area piatta di circa nove centimetri quadrati con 50 millilitri di glicerina e inserire un termometro elettronico nel ferro per monitorare la temperatura.
Dopo aver riscaldato il ferro a 137-139 gradi Celsius su una piastra calda, premere delicatamente il ferro su ogni area contrassegnata per 30 secondi per area per creare sei ferite da ustione uniformi. Quando il ferro riscaldato tocca la pelle, il calore si dissipa immediatamente sulla superficie dell'area bruciata, quindi assicurati di preriscaldare il ferro e la glicerina per almeno 10 minuti prima di applicare le ustioni. Quindi, lavare le ferite con una soluzione salina allo 0,9% e misurare e registrare le dimensioni della ferita mediante fotomicrografia.
Quando tutte le ferite sono state misurate, applicare le medicazioni direttamente su ogni ferita, seguita dall'applicazione di un film impermeabile sullo strato di medicazione interno per fungere da barriera contro la penetrazione batterica. Quindi, rastrema un pezzo di garza spesso 5 centimetri su ogni ferita per fungere da strato intermedio della medicazione e fissa la garza con uno strato esterno di intonaco adesivo, estendendo l'intonaco al busto per evitare lo spostamento della medicazione. Cambiare le medicazioni cliniche ogni due giorni per i primi 10 giorni, quindi due volte a settimana fino al giorno 42, pulendo e misurando le ferite secondo la Vancouver Scar Scale prima di ogni riapplicazione della medicazione.
Tamponare la ferita per i test antibatterici nei giorni post-ustione zero, sette, 21 e 42 e posizionare i tamponi in 100 millilitri di soluzione salina sterile allo 0,9%. Vortice delicatamente i tamponi per ottenere una sospensione omogenea e diluire in serie la soluzione cellulare risultante. Quindi, placcare 100 microlitri di ogni diluizione in mezzo selettivo o non selettivo e incubare la coltura della ferita in condizioni aerobiche a 37 gradi Celsius per 24-72 ore.
Alla fine dell'incubazione, placca 10 microliter aliquote da ogni coltura di diluizione in triplice copia su piastre di agar del sangue integrate con il 5% di sangue di pecora per la coltura notturna a 37 gradi Celsius. La mattina seguente, usa un pennarello e un piccolo righello per dividere il fondo di ogni piatto in quattro quadranti uguali e determinare il numero di unità che formano colonie in ogni quadrante sotto un microscopio sezionante. In questo esperimento rappresentativo, la ri epitelializzazione delle ferite da ustione è stata valutata mediante ispezione lorda il giorno post-ustione 42.
Una significativa riduzione dell'area della ferita è stata osservata rispetto al giorno zero. Il tasso di guarigione è stato definito come la maggiore distanza media del margine della ferita dal centro della ferita diviso per il tempo necessario per completare la chiusura della ferita, dimostrando oltre il 73% di chiusura della ferita il giorno post-ustione 42. I punteggi della cicatrice di Vancouver raggiunsero il picco il giorno post-burn 21 e diminuirono al di sotto della dimensione iniziale della ferita entro il giorno post-bruciatura 42.
L'esame istologico dei campioni di pelle raccolti il giorno 42 ha confermato che sono state raggiunte ustioni a pieno spessore e che le ferite sembravano essere completamente guarite. Necrosi risultante da ustioni potrebbe essere osservata nell'epidermide, nel derma e nei componenti dermici della ferita senza influenzare significativamente il muscolo sottostante. Lo spessore sotto la medicazione sperimentale era di 5,4 millimetri e sono stati osservati l'aratura dermica e l'infiltrazione linfocitica.
Le colture batteriche di tamponi avvolti raccolti nei giorni post-ustione zero, sette, 21 e 42 hanno dimostrato un leggero aumento delle unità di formazione della colonia da giorni zero a 21 che sono state significativamente aumentate il giorno 42, confermando che questo modello suino di grave lesione da ustione può essere utilizzato per monitorare le prestazioni cliniche delle medicazioni sperimentali. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di sapere come maneggiare l'animale e quindi monitorare correttamente il segno vitale dell'animale durante il periodo eventiale. Seguendo questa procedura, altri metodi come gli esperimenti di crescita batterica possono essere eseguiti per rispondere a domande aggiuntive su come funzionano i materiali polisaccaridi naturali in caso di gravi lesioni da ustione.
Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha spianato la strada ai ricercatori nel campo della guarigione delle ferite bruciate per esplorare gli effetti delle medicazioni naturali di polisaccaride alginato di calcio nella guarigione della pelle umana. Non dimenticare che lavorare con ferro riscaldato e glicerina può essere estremamente pericoloso e che precauzioni come le apparecchiature funzionanti devono sempre essere prese durante l'esecuzione della procedura.
