Este enfoque proporciona una forma reproducible y mínimamente invasiva de elevar la PIO durante largos períodos de tiempo. Esto nos ayudará a entender mejor el glaucoma. Una ventaja de esta técnica, es que la elevación de la PIO es fácilmente reversible, permitiendo a los investigadores investigar las capacidades de los ojos para recuperarse de la elevación de la presión crónica.
Una demostración visual de este método es fundamental ya que suturar y atar un nudo de tensión es difícil de aprender leyendo un manuscrito solo. Para ayudar bien, recomendamos que uno nuevo en esta técnica, practique la sutura bajo microscopio. Comience por envoldir a la rata despierta en un pedazo de tela suave para calmar al animal.
Sostenga suavemente el torso en una mano, con los animales apoyando contra el pecho de los investigadores, y exponga la cabeza y el cuello. Utilice la otra mano para llevar el tonómetro de rebote cerca del ojo de las ratas, de modo que la punta de la sonda interocular esté aproximadamente de dos a tres milímetros de distancia, y perpendicular al ápice corneal. Espere unos segundos hasta que la rata se calme y, a continuación, presione el botón de medición una vez.
Observe que la parte superior de la sonda IOP golpeó suavemente el ápice corneal una vez y escuche el pitido del tonómetro de rebote. Después de uno o dos segundos, repita la medición. Realice un total de 10 mediciones para obtener un valor de PIO promedio para el punto de tiempo.
Restablezca el tonómetro después de la quinta lectura. Una vez que esté monitoreando, mida la PIO a la misma hora del día. Y bajo condiciones de iluminación de consistencia, para minimizar la variación debido a un ciclo de IOP.
Cubra el roedor anestesiado con una cortina quirúrgica fenestrada estéril, exponiendo el ojo a suturar. A continuación, después de asegurar un plano quirúrgico de la anestesia, utilice 7-10 sutura de nylon para realizar una sutura de cuerda de bolso en la conjuntiva bulbar en todo el mundo, tejiendo el paralelo de sutura 7-10 y 2 mililitros posteriores al limbo. Tenga cuidado de no penetrar su esclerótica.
Una dilatación pupilar repentina durante el procedimiento quirúrgico indica que es probable que se haya penetrado la esclerótica. Anclar la sutura en la conjuntiva de las ratas usando cinco a seis puntos de anclaje. Evite la compresión directa en las venas episclerales principales enhebrando la sutura debajo de la conjuntiva en el cruce de estas venas.
Fije la sutura de las cuerdas de la bolsa atando un nudo deslizante. A continuación, ate un nudo simple y mantenerlo suelto. Para evitar un pico de PIO postquirúrgico excesivamente alto, pida a un asistente que mida la PIO.
Si se encuentra que el IOP es demasiado alto, ajuste el slipknot liberando parcialmente la tensión en un extremo de la sutura. Después de que se alcance el IOP deseado de 30 a 60 milímetros de mercurio, ate el segundo nudo mientras mantiene una fuerza de tracción continua en el extremo de esa sutura. Después de apretar el segundo nudo, recortar los extremos de la sutura para minimizar cualquier sensación de cuerpo extraño.
Controlar al animal durante la recuperación de la anestesia general. Cuando trabaje con ratones, coloque una sutura de nylon 10-0 en un milímetro posterior al limbo. Utilice de cuatro a cinco puntos de anclaje para anclar la sutura en la conjuntiva del ratón.
A continuación, apriete la sutura de la cuerda de la bolsa atando un slipknot. Después de atar un nudo simple y mantenerlo suelto, mida el IOP con la ayuda de un asistente. Para mantener la IOP y la visión a largo plazo, es importante asegurarse de que el nudo esté lo suficientemente apretado al sujetar la sutura de cuerda de bolso.
Aquí demostramos cómo atar un nudo significativo en un ojo modelo, con el fin de generar suficiente tensión. Después de alcanzar el IOP deseado, ate el segundo nudo, manteniendo una fuerza de tracción continua en ese extremo de la sutura. En este gráfico los ojos hipertensos oculares individuales están representados por símbolos rojos, y controlan los ojos por símbolos grises.
La sutura circunlimbal elevó la presión intraocular durante 8 semanas en ratas. La PIO se mantuvo sin cambios en los ojos de control contralaterales. La respuesta positiva del umbral escotópico, refleja la salud de las células ganglionares de la retina, y se encontró que se reduce en los ojos hipertensos oculares indicados por la línea roja;en relación con los ojos de control indicados por la línea negra.
También hubo una pequeña reducción del ERG a y la onda b, que es probable que refleje una leve disfunción de los receptores fotográficos y las células bipolares, respectivamente. Sin embargo, el mayor déficit se encontró en la respuesta positiva del umbral escotópico. Confirmando la disfunción de células ganglionares preferenciales después de la elevación leve y crónica de la PIO.
Al intentar este procedimiento, es importante recordar apretar el slipknot con una compresión interna adecuada. La razón más común por la que la PIO no puede aumentar a largo plazo, es que el nudo se afloja con el tiempo. Después de este procedimiento, todas las modificaciones como la eliminación de sutura, para normalizar la presión intraocular, se pueden realizar para responder preguntas adicionales como si las células ganglionares regulares pueden recuperarse de la elevación de la PIO de sustain.
¿Y cuáles son los mecanismos que implican esta recuperación?
