Questo approccio fornisce un modo riproducibile e minimamente invasivo per elevare IOP per lunghi periodi di tempo. Questo ci aiuterà a capire meglio il glaucoma. Un vantaggio di questa tecnica, è che l'elevazione IOP è facilmente reversibile, permettendo ai ricercatori di indagare le capacità degli occhi di riprendersi dall'elevazione cronica della pressione.
Una dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale in quanto è difficile suturare e legare un nodo di tensione dalla sola lettura di un manoscritto. Per aiutare bene, si consiglia di uno nuovo a questa tecnica, praticare la sutura al microscopio. Inizia fasciando il topo sveglio in un pezzo di panno morbido per calmare l'animale.
Tenere delicatamente il busto in una mano, con gli animali tornati appoggiati contro il petto degli investigatori, ed esporre la testa e il collo. Utilizzare l'altra mano per portare il tonometro di rimbalzo vicino all'occhio dei ratti, in modo che la punta della sonda interoculare sia a circa due o tre millimetri di distanza e perpendicolare all'apice corneale. Attendere alcuni secondi affinché il topo si calmi, quindi premere il pulsante di misurazione una volta.
Osservare la parte superiore della sonda IOP colpire delicatamente l'apice corneale una volta e sentire il segnale acustico del tonometro a rimbalzo. Dopo uno o due secondi, ripetere la misurazione. Effettuare un totale di 10 misurazioni per ricavare un valore IOP medio per il punto di tempo.
Reimpostare il tonometro dopo la quinta lettura. Una volta che si sta monitorando, misurare IOP nella stessa ora del giorno. E in condizioni di illuminazione di consistenza, per ridurre al minimo le variazioni dovute a un ciclo IOP.
Coprire il roditore anestetizzato con un drappo chirurgico fenestrato sterile, esponendo l'occhio da suturare. Successivamente, dopo aver garantendo un piano chirurgico di anestesia, utilizzare 7-10 sutura di nylon per eseguire una sutura a corda della borsa sulla congiuntiva bulbare in tutto il mondo, tessendo il parallelo di sutura 7-10 e 2 millilitri posteriori al limbo. Fai attenzione a non penetrare nella sua sclera.
Un'improvvisa dilatazione pupillare durante la procedura chirurgica indica che la sclera è stata probabilmente penetrata. Ancorare la sutura sulla congiuntiva dei ratti usando da cinque a sei punti di ancoraggio. Evitare la compressione diretta sulle principali vene episclerali infilando la sutura sotto la congiuntiva all'incrocio di queste vene.
Fissare la borsa-corde sutura legando un nodo slip. Quindi legare un semplice nodo e tenerlo sciolto. Per evitare un picco IOP post-chirurgico eccessivamente elevato, avere un assistente misurare l'IOP.
Se l'IOP è troppo alto, regolare lo slipknot rilasciando parzialmente la tensione su un'estremità della sutura. Dopo aver raggiunto l'IOP desiderato di 30-60 millimetri di mercurio, legare il secondo nodo mantenendo una forza di trazione continua all'estremità di quella sutura. Dopo che il secondo nodo è stato stretto, tagliare le estremità della sutura per ridurre al minimo qualsiasi sensazione di corpo estraneo.
Monitorare l'animale durante il recupero dall'anestesia generale. Quando si lavora con i topi, posizionare una sutura di nylon 10-0 a un millimetro posteriore al limbo. Utilizzate da quattro a cinque punti di ancoraggio per ancorare la sutura sulla congiuntiva del mouse.
Quindi fissare la borsa-stringa sutura legando uno slipknot. Dopo aver legato un semplice nodo e tenerlo sciolto, misurare l'IOP con l'aiuto di un assistente. Per sostenere l'IOP e la visione a lungo termine, è importante assicurarsi che il nodo sia abbastanza stretto quando si fissa la sutura a corda della borsa.
Qui dimostriamo come legare un nodo significativo su un occhio modello, al fine di generare abbastanza tensione. Una volta raggiunto l'IOP desiderato, legare il secondo nodo, mantenendo una forza di trazione continua su quell'estremità della sutura. In questo grafico i singoli occhi ipertesi oculari sono rappresentati da simboli rossi e controllano gli occhi da simboli grigi.
La sutura circumlimbale ha aumentato la pressione intraoculare per 8 settimane nei ratti. IOP è rimasto invariato negli occhi di controllo contralaterali. La risposta positiva alla soglia scotopica, riflette la salute delle cellule gangliari retiniche, ed è risultato essere ridotto negli occhi ipertesi oculari indicati dalla linea rossa;rispetto agli occhi di controllo indicati dalla linea nera.
C'è stata anche una piccola riduzione dell'onda ERG a e b, che probabilmente rifletterà una lieve disfunzione dei recettori fotografici e delle cellule bipolari, rispettivamente. Il deficit maggiore, tuttavia, è stato riscontrato nella risposta positiva alla soglia scotopica. Conferma della disfunzione preferenziale delle cellule gangliari a seguito dell'elevazione lieve e cronica dell'IOP.
Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di stringere lo slipknot con un'adeguata compressione verso l'interno. La ragione più comune per cui IOP non riesce ad aumentare a lungo termine è che il nodo si allenta nel tempo. Seguendo questa procedura, tutte le modifiche come la rimozione della sutura, per normalizzare la pressione intraoculare, possono essere eseguite per rispondere a domande aggiuntive come se le cellule gangliari regolari possono recuperare dall'elevazione IOP sustain.
E quali sono i meccanismi che comportano questa ripresa?
