Cette approche fournit un moyen reproductible et peu invasif d’élever l’IOP pendant de longues périodes de temps. Cela nous aidera à mieux comprendre le glaucome. Un avantage de cette technique, c’est que l’élévation de l’IOP est facilement réversible, permettant aux chercheurs d’étudier les capacités des yeux à se remettre de l’élévation chronique de la pression.
Une démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car il est difficile d’apprendre à suturing et à lécuer un nœud de tension en lisant un manuscrit seul. Pour aider finement, nous recommandons qu’un nouveau à cette technique, la pratique suturing sous microscope. Commencez par emmailloter le rat éveillé dans un morceau de tissu doux pour calmer l’animal.
Tenez doucement le torse dans une main, avec les animaux de retour reposant contre la poitrine des enquêteurs, et exposer la tête et le cou. Utilisez l’autre main pour amener le tonomètre de rebond près de l’œil des rats, de sorte que la pointe de la sonde interoculaire est d’environ deux à trois millimètres de distance, et perpendiculaire à l’apex cornéen. Attendez quelques secondes pour que le rat se calme, puis appuyez sur le bouton de mesure une fois.
Observez le haut de la sonde IOP frapper doucement l’apex cornéen une fois, et entendre le bip tonomètre rebond. Après une ou deux secondes, répétez la mesure. Effectuer un total de 10 mesures pour obtenir une valeur IOP moyenne pour le point de temps.
Réinitialisez le tonomètre après la cinquième lecture. Une fois que vous surveillez, mesurez l’IOP à la même heure de la journée. Et dans des conditions d’éclairage de cohérence, pour minimiser les variations dues à un cycle IOP.
Couvrir le rongeur anesthésié d’un drapé chirurgical fenestrated stérile, exposant l’œil à être suturé. Ensuite, après avoir assuré un plan chirurgical d’anesthésie, utilisez une suture en nylon 7-10 pour effectuer une suture à cordes de sac à main sur la conjonctive bulbaire à travers le monde, en tissant la suture parallèle 7-10 et 2 millilitres postérieures aux limbes. Prends soin de ne pas pénétrer dans sa sclère.
Une dilatation pupille soudaine pendant la procédure chirurgicale indique que la sclère a probablement été pénétrée. Ancrer la suture sur la conjonctive des rats à l’aide de cinq à six points d’ancrage. Évitez la compression directe sur les principales veines épisclerales en enfilant la suture sous la conjonctive au croisement de ces veines.
Attachez la suture des cordons de sac à main en lissant un nœud de glissement. Ensuite, attachez un nœud simple et gardez-le lâche. Pour éviter un pic d’IOP post-chirurgical excessivement élevé, avoir un assistant mesurer l’IOP.
Si l’IOP se trouve trop haut, ajustez le slipknot en libérant partiellement la tension à une extrémité de la suture. Après que l’IOP désiré de 30 à 60 millimètres de mercure soit atteint, attachez le deuxième noeud tout en maintenant une force de traction continue à l’extrémité de cette suture. Une fois le deuxième nœud serré, couper les extrémités de la suture pour minimiser toute sensation de corps étranger.
Surveillez l’animal pendant le rétablissement de l’anesthésie générale. Lorsque vous travaillez avec des souris, placez une suture en nylon 10-0 à un millimètre postérieur au limbe. Utilisez quatre à cinq points d’ancrage pour ancrer la suture sur la conjonctive de la souris.
Attachez ensuite la suture sac à main en lissant un slipknot. Après avoir noué un nœud simple et l’avoir relâché, mesurez l’IOP avec l’aide d’un assistant. Pour maintenir l’IOP et la vision à long terme, il est important de s’assurer que le noeud est assez serré lors de la fixation de la suture sac à main-corde.
Ici, nous démontrons comment attacher un nœud significatif sur un œil modèle, afin de générer suffisamment de tension. Une fois l’IOP désiré atteint, attachez le deuxième nœud, tout en maintenant une force de traction continue à cette extrémité de la suture. Dans ce graphique, les yeux hypertensifs oculaires individuels sont représentés par des symboles rouges et contrôlent les yeux par des symboles gris.
La suture circumlimbale a augmenté la pression intraoculaire pendant 8 semaines chez les rats. L’IOP est resté inchangé dans les yeux contralatéraux de commande. La réponse scotopique positive de seuil, reflète la santé rétinienne de cellules de ganglion, et s’est trouvée pour être réduite dans les yeux hypertensifs oculaires indiqués par la ligne rouge ;par rapport aux yeux témoins indiqués par la ligne noire.
Il y avait également une petite réduction de l’ERG a et de l’onde b, qui est susceptible de refléter une disfonction douce des récepteurs de photo et des cellules bipolaires, respectivement. Le déficit le plus important a toutefois été constaté dans la réponse positive au seuil scotopique. Confirmation de la disfonction préférentielle de cellules ganglionnaires suivant l’élévation douce et chronique d’IOP.
Tout en essayant cette procédure, il est important de se rappeler de serrer le slipknot avec une compression intérieure adéquate. La raison la plus courante pour laquelle l’IOP ne parvient pas à augmenter à long terme, c’est que le nœud se desserre au fil du temps. Après cette procédure, toutes les modifications comme l’ablation de suture, pour normaliser la pression intraoculaire, peuvent être effectuées pour répondre à des questions supplémentaires comme si les cellules ganglionnaires régulières peuvent récupérer de l’élévation de l’IOP.
Et quels sont les mécanismes qui impliquent cette reprise?