Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre la preservación óptima de los corazones de los donantes, así como su evaluación funcional y metabólica para la posterior idoneidad del trasplante. La principal ventaja de esta técnica es que permite una evaluación funcional del corazón del donante que no se basa únicamente en evaluaciones metabólicas indirectas. Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia la terapia de corazones de donantes disfuncionales, ya que la función cardíaca puede evaluarse fácil y repetidamente con el tiempo.
Generalmente, los individuos nuevos en este asunto tendrán problemas porque se requiere cierta experiencia técnica para conectar el corazón de una manera segura. La demostración visual de este método es fundamental, ya que los aspectos técnicos de la recuperación del corazón y la conexión con el dispositivo pueden ser difíciles de aprender solo mediante instrucciones de texto. Después de confirmar la falta de respuesta al estímulo nocivo, realizar una esternotomía mediana en el cerdo anestesiado y una vez que el corazón ha sido expuesto, utilizar tijeras Metzenbaum para abrir el pericardio.
Utilice 1-0 suturas de seda para fijar los bordes pericárdicos al esternón y recoger gradualmente 750 mililitros de sangre entera de la cánula venosa de dos etapas colocada en la aurícula derecha en un recipiente de vidrio autoclaviado durante un período de 15 minutos mientras reemplaza simultáneamente el volumen con un litro de una solución cristaloides isotónica. Agregue la sangre a un circuito de perfusión preparado con 750 mililitros de tampón Krebs-Henseleit complementado con 8%albúmina y coloque una aguja de cardioplegia de calibre 14 y una cánula en la aorta ascendente. Asegure la aguja de cardioplegia en la aorta con una trampa y conecte la cánula de cardioplegia a la bolsa de cardioplegia.
Añadir 100 mililitros de sangre a 400 mililitros de cardioplegia. Después del final de la exsanguinación, cierre la aorta ascendente con una abrazadera aórtica. A continuación, entregar la solución cardiopléjica en la raíz aórtica.
Cuando se haya administrado toda la solución, retire la abrazadera e exprima el corazón, incluyendo todos los vasos de arco aórtico y un segmento de la aorta descendente. Para evitar los efectos nocivos de la isquemia prolongada, el corazón debe adquirirse y montarse en el aparato para la perfusión lo antes posible. Después de eliminar cualquier exceso de tejido alrededor de la aurícula izquierda, usa una sutura de polipropileno 3-0 para colocar una sutura de cuerda de bolso alrededor del orificio auricular izquierdo.
Suturar y cerrar la vena cava inferior con una sutura de polipropileno 3-0. Coloque la cánula auricular izquierda en el orificio auricular izquierdo y asegure la cánula con una trampa. Coloque la cánula auricular izquierda sobre el imán incrustado de membrana de silicona del aparato, teniendo cuidado de que el imán y el anillo metálico correspondiente en la cánula auricular izquierda estén correctamente enganchados.
Fije la aorta a la cánula aórtica incrustada en la membrana de silicona y utilice una corbata de seda para asegurar la aorta alrededor de la cánula. Gire la aorta para lograr una mentira adecuada sin tensión ni torceduras y aumente la velocidad de la bomba aórtica a aproximadamente 1600 RPM y apriete suavemente los ventrículos para desaconsejar el corazón. El aire restante en la raíz aórtica se expulsará a través de las ramas innominadas y subclavias.
Conecte la línea de purga aórtica a la arteria innominada y asegure la conexión con una corbata de seda. Snare el orificio de la arteria subclavia izquierda con una corbata de seda y asegurar el cierre con una trampa y un chasquido. Coloque una funda de introductor de 5 franceses a través del orificio de la arteria subclavia, ajustando la longitud y la orientación del catéter para que el catéter no interfiera con la función de la válvula aórtica.
Ajuste la velocidad de la bomba aórtica para alcanzar una presión media de 30 milímetros de mercurio para iniciar la perfusión en el modo Langendorff no laborable. La aparición de un pera oscuro y desoxigenado en la línea arterial pulmonar indica el restablecimiento del flujo coronario. Gire el intercambiador de calor a 38 grados celsius para calentar el perfundato y utilice un analizador de gases sanguíneos para comprobar el estado del gas disuelto, ajustando la mezcla de gas a los parámetros adecuados.
Después de una hora en modo no laborable, introduzca una presión auricular izquierda adecuada en la sección de presión auricular izquierda deseada del software e inicie el bucle de retroalimentación. El modo de trabajo activado aparecerá como un botón verde y la velocidad de la bomba auricular izquierda aumentará y disminuirá automáticamente para alcanzar y mantener la presión auricular izquierda seleccionada. Para la evaluación y el registro de los datos de estado estacionario, coloque un catéter de cola de cerdo lleno de líquido a través de la vaina del introductor en el ventrículo izquierdo.
Para la evaluación del trabajo de carrera recluible previa a la carga, retire el catéter de cola de cerdo del ventrículo izquierdo y ajuste la tasa de caída deseada en la velocidad de la bomba auricular izquierda durante el análisis y el período de tiempo deseado durante el cual se llevará a cabo el análisis. Haga clic en el bucle de volumen de presión de registro. El software saldrá automáticamente del modo de trabajo y reducirá gradualmente las RPM de la bomba auricular izquierda, mientras que simultáneamente registra el trabajo de carrera del ventrículo izquierdo y la presión auricular izquierda.
Al final de la recopilación de datos, el software realizará una regresión lineal en el conjunto de datos recién adquirido para producir el trabajo de trazo reclutable de precarga. Después de que el software del corazón del aparato ex situ haya completado el análisis, aparecerá un mensaje en la página principal que muestra el coeficiente de correlación del análisis. Haga clic en Aceptar si el coeficiente es mayor que 0,95.
Se registrarán los resultados del análisis de trazo reclutable de precarga. Para evaluar el estado metabólico del corazón y la perfusa, utilice la información obtenida del análisis de gases sanguíneos de las muestras perfundidas recogidas de las líneas arteriales y pulmonares cada una de una a dos horas. En un modelo Yorkshire Pig con un peso cardíaco inicial de 180 a 220 gramos, el flujo auricular izquierdo inicial será de aproximadamente 2.000 mililitros de minutos, normalmente acercándose a unos 2, 250 mililitros por minuto durante la primera de una a dos horas de perfusión en el modo de trabajo.
El análisis de gases sanguíneos y las evaluaciones metabólicas realizadas en las muestras de perfusión perfundada obtenidas durante la perfusión cardíaca ex situ proporcionan una amplia información sobre el estado metabólico del corazón a lo largo del tiempo, indicando la concentración de lactato perfusado y la información necesaria para calcular el consumo de oxígeno miocárdico. En ausencia de los órganos que naturalmente metabolizan sus biomarcadores cardíacos claros, se observa típicamente la acumulación de estos factores dentro de la solución perfuta a lo largo del tiempo. Además de los parámetros dependientes de la carga, el trabajo de carrera precargado del ventrículo izquierdo se puede evaluar durante la reducción lineal controlada por computadora en la presión auricular izquierda, como se ha demostrado.
La ecocardiografía durante la perfusión cardíaca ex situ también puede proporcionar información adicional sobre la función miocárdica y los parámetros anatómicos. Al intentar este procedimiento, es importante recordar que la perfusión cardíaca ex situ todavía está en su infancia y que más estudios están justificados para diseñar un mejor apoyo metabólico del corazón para una mejor preservación de la viabilidad y la función cardíaca. Después de este procedimiento, se pueden realizar otros métodos como las imágenes angiográficas para responder preguntas adicionales sobre el estado vascular coronario del corazón del donante.
Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que los investigadores en el campo del trasplante de órganos exploraran la posibilidad de que el trasplante seguro de criterios extendidos donó corazones en pacientes a la espera de un trasplante de corazón. No olvide que trabajar con biomateriales puede ser extremadamente peligroso y que las precauciones, como el uso de guantes y gafas protectoras, siempre deben tomarse durante la realización de este procedimiento.
