Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre a preservação ideal dos corações dos doadores, bem como sua avaliação funcional e metabólica para a adequação subsequente do transplante. A principal vantagem dessa técnica é que permite uma avaliação funcional do coração doador que não se baseia apenas em avaliações metabólicas indiretas. As implicações dessa técnica se estendem para a terapia de corações doadores disfuncionais, pois a função cardíaca pode ser avaliada de forma fácil e repetida ao longo do tempo.
Geralmente, indivíduos novos neste assunto lutarão porque alguns conhecimentos técnicos são necessários para conectar o coração de forma segura e segura. A demonstração visual deste método é fundamental, pois os aspectos técnicos da recuperação do coração e da conexão com o dispositivo podem ser desafiadores para aprender apenas por instrução de texto. Depois de confirmar a falta de resposta a estímulos nocivos, realize uma esternotomia mediana no porco anestesiado e uma vez que o coração tenha sido exposto, use uma tesoura Metzenbaum para abrir o pericárdio.
Use 1-0 suturas de seda para fixar as bordas pericárvias ao esterno e colete gradualmente 750 mililitros de sangue inteiro da cânula venosa de dois estágios colocada no átrio direito em um recipiente de vidro autoclaved durante um período de 15 minutos, substituindo simultaneamente o volume por um litro de uma solução cristaloide isotônica. Adicione o sangue a um circuito de perfusão preparado com 750 mililitros de tampão Krebs-Henseleit suplementado com 8%de albumina e coloque uma agulha de cardioplegia calibre 14 e cânula na aorta ascendente. Fixar a agulha de cardioplegia na aorta com uma armadilha e conectar a cânula cardioplegia ao saco de cardioplegia.
Adicione 100 mililitros de sangue a 400 mililitros de cardioplegia. Após o fim da exsanguinação, transpreenda a aorta ascendente com um grampo aórtico. Em seguida, entregue a solução cardioplégica na raiz aórtica.
Quando toda a solução for administrada, remova o grampo e extiria o coração, incluindo todos os vasos de arco aórticos e um segmento da aorta descendente. Para evitar os efeitos deletérios da isquemia prolongada, o coração deve ser adquirido e montado no aparelho para perfusão o mais rápido possível. Depois de remover qualquer excesso de tecido ao redor do átrio esquerdo, use uma sutura de polipropileno 3-0 para colocar uma sutura de corda de bolsa ao redor do orifício atrial esquerdo.
Sutura e feche a veia cava inferior com uma sutura de polipropileno 3-0. Coloque a cânula atrial esquerda no orifício atrial esquerdo e proteja a cânula com uma armadilha. Coloque a cânula atrial esquerda sobre a membrana de silicone incorporada ímã do aparelho, tomando cuidado para que o ímã e o anel metálico correspondente na cânula atrial esquerda estejam devidamente engajados.
Conecte a aorta à cânula aórtica embutida na membrana de silicone e use uma gravata de seda para fixar a aorta ao redor da cânula. Gire a aorta para conseguir uma mentira adequada sem tensão ou torção e aumente a velocidade da bomba aórtica para cerca de 1600 RPM e aperte suavemente os ventrículos para desafogar o coração. O ar restante na raiz aórtica será ejetado através dos ramos innominados e subclávios.
Conecte a linha de expurgo aórtico à artéria innominada e fixe a conexão com uma gravata de seda. Pegue o orifício da artéria subclávia esquerda com uma gravata de seda e segure o fechamento com uma armadilha e um estalo. Coloque uma baia introdutor 5 francesa através do orifício da artéria subclávia, ajustando o comprimento e orientação do cateter para que o cateter não interfira na função da válvula aórtica.
Ajuste a velocidade da bomba aórtica para atingir uma pressão média de 30 milímetros de mercúrio para iniciar a perfusão no modo Langendorff não funcionando. O aparecimento de um perfusato escuro e desoxigenado na linha arterial pulmonar indica o restaretivo do fluxo coronário. Gire o trocador de calor para 38 graus Celsius para aquecer o perfusado e use um analisador de gás sanguíneo para verificar o estado do gás dissolvido, ajustando a mistura de gás aos parâmetros apropriados.
Após uma hora no modo de não-trabalho, digite uma pressão atrial esquerda adequada na seção de pressão atrial esquerda desejada do software e inicie o loop de feedback. O modo de trabalho ativado aparecerá como um botão verde e a velocidade da bomba atrial esquerda aumentará e diminuirá automaticamente para alcançar e manter a pressão atrial esquerda selecionada. Para a avaliação e registro dos dados de estado estável, coloque um cateter de tranças preenchido com fluido através da bainha introdutor no ventrículo esquerdo.
Para avaliação do trabalho de avc pré-carregado, remova o cateter de tranças do ventrículo esquerdo e ajuste a taxa desejada de queda na velocidade da bomba atrial esquerda durante a análise e o período de tempo desejado durante o qual a análise ocorrerá. Clique no loop de volume de pressão de gravação. O software sairá automaticamente do modo de trabalho e reduzirá gradualmente o RPM da bomba atrial esquerda, ao mesmo tempo em que grava o trabalho de traçado do ventrículo esquerdo e a pressão atrial esquerda.
Ao final da coleta de dados, o software realizará uma regressão linear no conjunto de dados recém-adquirido para produzir o trabalho de traçado pré-carregado. Após o software do coração do ex situ aparato ter concluído a análise, uma mensagem aparecerá na página principal mostrando o coeficiente de correlação da análise. Clique bem se o coeficiente for maior que 0,95.
Os resultados da análise de trabalho de acidente vascular cerebral pré-carga serão registrados. Para avaliar o estado metabólico do coração e do perfusato, utilize as informações obtidas a partir da análise do gás sanguíneo das amostras perfusadas coletadas das linhas arterial e pulmonar a cada uma ou duas horas. Em um modelo yorkshire pig com um peso cardíaco inicial de 180 a 220 gramas, o fluxo inicial de atrial esquerdo será de aproximadamente 2.000 mililitros minutos, tipicamente aproximando-se cerca de 2.250 mililitros por minuto durante a primeira uma a duas horas de perfusão no modo de trabalho.
A análise do gás sanguíneo e as avaliações metabólicas realizadas nas amostras de perfusato obtidas durante a perfusão do coração ex situ fornecem informações extensas sobre o estado metabólico do coração ao longo do tempo, indicando a concentração de lactato perfusado e as informações necessárias para calcular o consumo de oxigênio do miocárdio. Na ausência dos órgãos que metabolizam naturalmente seus biomarcadores cardíacos claros, o acúmulo desses fatores dentro da solução perfusada ao longo do tempo é tipicamente observado. Além dos parâmetros dependentes de carga, o trabalho de avc pré-carga do ventrículo esquerdo pode ser avaliado durante a redução linear controlada pelo computador na pressão atrial esquerda, como demonstrado.
A ecocardiografia durante a perfusão do coração ex situ também pode fornecer informações adicionais sobre a função do miocárdio e parâmetros anatômicos. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar que a perfusão do coração ex situ ainda está em sua infância e que mais estudos são justificados para projetar melhor apoio cardíaco metabólico para melhor preservação da viabilidade cardíaca e da função. Após este procedimento, outros métodos como a imagem angiográfica podem ser realizados para responder a perguntas adicionais sobre o estado vascular coronário do coração doador.
Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores da área de transplante de órgãos explorarem a possibilidade de transplante seguro de critérios estendidos doados corações em pacientes que aguardam um transplante de coração. Não se esqueça que trabalhar com biomateriais pode ser extremamente perigoso e que precauções, como usar luvas e óculos de proteção, devem ser sempre tomadas durante a realização deste procedimento.
