Este protocolo permite explorar cómo el estado interno o la personalidad de un pez cebra influye en la respuesta de orientación a las señales procedentes del medio ambiente, como las corrientes de agua o los campos magnéticos. Esta técnica se utiliza para observar cómo los factores internos y las señales ambientales afectan a la orientación del pez cebra. Sin embargo, también se puede aplicar a una amplia variedad de diseños experimentales.
Este método podría proporcionar información sobre la ecología conductual de la investigación en biología de sensores. Y es una especie flexible por lo que es adecuado para cualquier animal acuático que nave activamente. Aconsejamos que, al realizar en los experimentos, te familiarices con el comportamiento del animal que pretendes utilizar y con cómo minimizar el estrés animal.
Para la selección de la personalidad en peces cebra recoger peces individuales utilizando un vaso de precipitados de 250 mililitros en una red para moverlos a un tanque de transferencia y transferir el pez al lado oscuro del tanque de selección de personalidad. Después de una hora de aclimatación, abra la puerta corredera y permita que las personas que salga del agujero exploren el lado brillante del tanque durante 10 minutos. Al final del período de exploración, recoger suavemente el pescado en dos recipientes separados, recogiendo el pescado proactivo del lado positivo y después de cinco minutos adicionales el pez reactivo de la caja oscura.
Para configurar un campo magnético con manipulación de campo magnético unidimensional, mantenga el túnel abierto y encienda la unidad de potencia y el magnetómetro. Coloque una sonda magnética conectada a un medidor de gas Tesla dentro del túnel y verifique la tensión necesaria para obtener el valor de campo magnético elegido a lo largo del eje principal del túnel. A continuación, desconecte la sonda y conecte el túnel de flujo al aparato de natación.
Para configurar un campo magnético con manipulación de campo magnético tridimensional, encienda el ordenador, convertidor digital a analógico en controladores de bobina y establezca el campo magnético elegido en los ejes x, y, z. A continuación, coloque el túnel en el centro del conjunto de pares Helmholtz. Cuando se haya configurado el campo magnético de esa opción, seleccione de uno a cinco peces para la prueba reotáctica.
Transfiera el pescado en el túnel, ajuste el caudal en el túnel a 4,5 litros por minuto y encienda la bomba. Asegúrese de cerrar la válvula de salida antes de sentir el túnel con agua y transferir el pescado y abrirlo antes de poner el piso a la derecha. Después de que los animales se han aclimatada allí en el túnel de natación durante una hora, empezar a registrar el comportamiento de los peces dentro del túnel y comenzar el paso prudente aumentando el caudal de acuerdo con el protocolo experimental elegido.
El mismo túnel de natación con la bobina retirada, se puede colocar en el centro del conjunto de pares Helmholtz. Al final del experimento de la reotaxis, tomar fotos de peces individuales en la cámara métrica amorfa y abrir las fotos en la imagen J.Note el sexo del animal. Los peces cebra macho son delgados y tienden a ser amarillentos, mientras que las hembras son más redondeadas y tienden a tener colorantes azules y blancos.
A continuación, haga clic en analizar y establecer escala. Para establecer la escala de la imagen en centímetros, utilizando la escala de la cámara como referencia y con la herramienta de línea segmentada seleccionada, dibuje una línea desde la punta del hocico hasta el pentacle mimado para medir la longitud estándar o hasta la punta de la cola para la longitud total. A continuación, haga clic en Analizar y medir y registrar la longitud lineal del animal en centímetros.
Para realizar un seguimiento de la actividad del pez cebra dentro del túnel, abra el programa de software de análisis y modelado de vídeo adecuado. Haga clic en Archivo, Importar y vídeo y abra uno de los vídeos y haga clic en Sistema de coordenadas para establecer las unidades de longitud en centímetros y las unidades de tiempo, en segundos. Haga clic en los ejes de coordenadas y establezca el sistema de referencia para realizar un seguimiento de la posición de los peces a lo largo del tiempo con el eje x a lo largo del túnel, estableciendo el origen en la esquina baja de la pared en la salida de agua.
Haga clic en Track new in calibration para establecer la escala y realizar un seguimiento de los nuevos en punto a masa, para comenzar a rastrear un pez a la vez. Avanzó el video manualmente en medio segundo, cinco intervalos de fotogramas y marca el tiempo y la posición del animal en cada giro aguas abajo y en cada giro aguas abajo. Al final de cada sesión de seguimiento, seleccione los valores X y de hora de la tabla.
Haga clic con el botón derecho en los datos y haga clic en Copiar datos con total precisión. A continuación, guarde los valores de tiempo y x de todas las posiciones de giro en un archivo de hoja de cálculo de plantilla. Calcular el tiempo total aguas arriba y aguas abajo, así como los valores del índice reotáctico y los porcentajes para cada paso completo.
En este experimento representativo, después de un período de aclimatación de una hora en el túnel como se demostró, un espectáculo a la vez se grabó vídeo mientras nadaba en el túnel en la corriente de agua se aceleró con un aumento escalonado en el caudal durante siete pasos. Durante estos ensayos, el campo magnético se controló en una dimensión. Durante el tiempo de seguimiento, los términos de cada pez en cada caudal se destacaron y se utilizaron como puntos de referencia para calcular el índice reotáctico de cada pez a cada velocidad completa.
Cuando el índice reotáctico es superior al 50% e indica que el animal tuvo una respuesta reotáctica positiva correspondiente a una prevalencia de natación aguas arriba, un índice reotáctico no significativamente diferente del 50% indica una ausencia de una respuesta reotáctica. La transformación del signo de arco de los valores de porcentaje de índice reotáctico promedio de los cinco peces en este experimento demostró un aumento sigmoidal en el valor del índice reotáctico cuando la velocidad del agua aumenta, permitiendo la cuantificación del pez cebra rheotaxis utilizando un método matemático simple. A partir de estas curvas, es visible que bajo campos magnéticos de diferentes direcciones, la recepción retatáctica de los peces proactivos no se ve afectada y la respuesta de los dos grupos experimentales está representada por la misma curva.
Por otro lado, los peces reactivos cambian la orientación reotáctica según el campo magnético y la respuesta está representada por curvas significativamente diferentes. Recuerde que este es un experimento conductual y el comportamiento de los peces puede verse afectado por el estrés. Manejar y transferir peces puede ser complicado.
Así que, entrenate antes de los experimentos. Esta técnica magnética reotáctica nos ha permitido explorar más a fondo los efectos de la personalidad en la sensibilidad magnetal en el pez cebra y los otros vertebrados e invertebrados acuáticos.
