La importancia de este protocolo sobre los métodos anteriores de muestreo de próstata es que nos da una mayor confianza de dirigir tejido tumoral fresco para la investigación. Por lo tanto, podemos llevar el tejido fresco directamente de vuelta al laboratorio y usarlo para el cultivo o la toma de imágenes porque tenemos una alta confianza de qué muestras son tumorales y cuáles son benignas. Mi consejo clave al aprender la técnica es trabajar con su patólogo local para que el diagnóstico final del tejido y el informe no se vean comprometidos.
Para apuntar a la ubicación del tumor, revise las imágenes de RMN para medir la ubicación por encima del tumor y encuentre la secuencia en la que el tumor es más visible en el plano axial. Desplácese por las imágenes axiales para identificar la imagen en la que el tumor es el más grande e imprima la imagen como referencia. En la imagen coronal correspondiente, mida la distancia desde la base de la próstata hasta la posición axial seleccionada y mida toda la longitud de la próstata desde el ápice hasta la base en milímetros.
A continuación, imprima estas medidas y marque las ubicaciones del tumor como referencia. Después de que la muestra ha sido recolectada, esterilizar la capucha de flujo laminar y el aparato de corte de próstata con 70%etanol y pesar la próstata en una escala estándar en gramos. A continuación, pinte el lado derecho con tinta azul y el lado izquierdo de la muestra con tinta negra que cubra la cápsula completa y las vesículas seminales con tinta para permitir la discriminación de los márgenes quirúrgicos.
Para cortar la próstata, coloque el tejido con la base y el ápice mirando hacia las paredes opuestas del aparato con el lado posterior hacia abajo y el lado anterior hacia arriba. Coloque alfileres de oro alrededor de la muestra de tejido empujando la próstata hacia adentro ligeramente si es necesario para lograr un ajuste ajustado y mida la longitud de la próstata desde la base hasta el ápice para comparar esta medida con la longitud de la próstata que se mide por RMN. Si la próstata se ha reducido, ajuste la posición de corte prevista en el porcentaje adecuado de la reducción.
A continuación, mida desde la base hasta el corte transversal deseado y seleccione el pasador que se encuentra más cerca de esta medida para cortar. Usando guantes de cadena para evitar lesiones, coloque las cuchillas del dispositivo de corte a cada lado del pasador identificado y use el espaciador para mantener las cuchillas a cinco milímetros de distancia. Para adquirir la rebanada, utilice trazos largos para mover lentamente pero firmemente las cuchillas hacia abajo, hacia adelante y hacia atrás confirmando al sentir que una rebanada completa se ha separado antes de desmontar el aparato.
A continuación, retire las paredes y los pasadores y use guantes para transferir cuidadosamente la rebanada a un trozo estéril de corcho. Después de adquirir la muestra, inspeccione visualmente la rebanada transversal para comparar la imagen de RMN axial. En algunos casos, el área tumoral puede parecer más pálida que el tejido circundante.
Palpa suavemente la rebanada transversal. El tumor puede sentirse más firme que el tejido circundante. Usando la imagen de resonancia magnética axial como guía, seleccione una o más áreas para el muestreo y utilice un punzón de seis milímetros para empujar hacia abajo en el área de tejido de interés.
Gire el punzón tisular en el punto y hacia abajo contra el corcho para asegurar una separación completa utilizando un bisturí afilado para separar la muestra de biopsia de la muestra según sea necesario. Una vez adquirida la muestra, retire el punzón y utilice el émbolo para expulsar la muestra en el recipiente adecuado para el análisis posterior posterior. A continuación, tintar los agujeros donde los punzones fueron tomados en rojo y observar la ubicación de cada punzón junto con el peso de la próstata y cualquier observación sobre el color del tejido y la firmeza.
Ancle la cápsula de próstata al corcho para evitar la bilging durante la fijación. Sumerja la próstata y el corcho en fijador asegurando que la muestra esté completamente sumergida. En este análisis representativo, de los primeros 92 casos muestreados como se demostró, el 64% de los especímenes contenían al menos un 40% de tumor y fueron sometidos al Proyecto de 100.000 Genomas sin microdisección.
Se extrajo ADN y fue de rendimiento y calidad suficientes en todos los casos y se ha publicado un subconjunto inicial de 59 de estas muestras para su comparación con un método de muestreo de muestras anterior. Después de este procedimiento, las muestras de tumores frescos se pueden utilizar para imágenes en vivo o cultivo, lo que nos permite probar nuevos biomarcadores, fármacos y obtener más información sobre la biología tumoral. Ahora que usamos este método de forma rutinaria, he sido capaz de presentar un proyecto usando este tejido para cultivo ex vivo para mirar nuevas combinaciones de terapias preclínicas para el cáncer de próstata.
