Este protocolo fue desarrollado para permitir que las mediciones de dosimetría se realicen lo más cerca posible de las condiciones reales de irradiación celular para estudios radiobiológicos. Con este protocolo, podemos determinar la dosis exacta recibida por las células por lo que es aplicable a muchas instalaciones de rayos X y podemos tener en cuenta todos los parámetros y traducir a dosimetría. Todos los parámetros de irradiación deben configurarse aguas arriba para permitir una adquisición óptima de la medición de dosimetría que requiere una estrecha colaboración entre físicos y radiobiólogos.
Para realizar una evaluación de campo de irradiación, coloque una película de dosimetría autodesarrollada en el soporte utilizado para la irradiación e irradiar la película con al menos dos grises para obtener un campo de irradiación bien marcado. Escanee la película de dosimetría autodesarrollada utilizando un escáner dedicado y utilice el perfil de análisis y trazado para trazar el perfil de dosis en ImageJ. A continuación, marque la superficie de soporte de irradiación para asegurarse de que el contenedor de celdas se colocará en la posición correcta.
Para realizar una medición de la velocidad de dosis, coloque un recipiente de celda modificado en la carcasa de soporte de irradiación y coloque la cámara de ionización en el recipiente en la posición correcta de acuerdo con las marcas realizadas en la superficie de soporte. Confirme que todos los parámetros de irradiación se han ajustado y pre-irradiado adecuadamente la cámara de ionización durante cinco minutos. Cero el electrometro y obtener mediciones de 10 minutos.
A continuación, utilice la fórmula para determinar la tasa media de dosis en el kerma de aire. Numera todas las películas para su identificación aguas abajo. Al menos 24 horas antes de la irradiación, cortar piezas de película dosimetría autodesarrollándose de acuerdo con el tamaño del recipiente celular.
Para construir una curva de calibración, reserve tres piezas de película para los controles no irradiados y coloque la primera película dentro del contenedor de celdas. A continuación, irradia la película para obtener el primer punto de dosis. Cuando todas las películas se han irradiado en triplicado a las dosis seleccionadas adecuadas, se puede generar una curva de calibración.
Para medir la atenuación y dispersión media del cultivo celular, seleccione el mismo tiempo de irradiación para todas las irradiaciones e irradia tres piezas de películas de dosimetría autodesarrolladas en el recipiente sin agua. A continuación, coloque una sola pieza de película en el recipiente y llene el recipiente con el mismo volumen de agua que el volumen de medio que se irradiará. Con pequeños trozos de cinta según sea necesario, coloque el recipiente dentro de la carcasa.
Cuando se complete la irradiación, seque las películas con papel absorbente y almacene las películas protegidas de la luz. 24 horas después de su irradiación, en el escáner, ajuste el formato TIFF a azul verde rojo de 48 bits y el modo de transmisión a 150 puntos por pulgada y seleccione ninguna corrección de imagen. Para calentar el escáner, coloque una película no irradiada en el escáner e inicie una vista previa de la exploración.
Al final de la vista previa, inicie un temporizador y espere 30 segundos antes de iniciar el análisis. Al final de la exploración, inicie un temporizador de 90 segundos. Al mismo tiempo, registre el escaneo y abra la imagen en ImageJ.
Trace una región cuadrada de interés dentro del análisis y mida el nivel medio de píxel rojo del área. Al final de los 90 segundos, repita la vista previa del escaneo al menos 30 veces para calentar y estabilizar el escáner. Una vez estabilizado el escáner, coloque una película en el centro de la cama del escáner e inicie una vista previa de la exploración.
Espere 30 segundos antes de iniciar la exploración. Al final de la exploración, espere 90 segundos antes de iniciar la siguiente exploración. A continuación, se realizaron mediciones para estimar el grosor del atenuador y se probaron los diferentes espesores del atenuador para encontrar el espesor que redujo la intensidad del haz en un factor de dos.
Cuando se determinó este espesor, se tomaron cinco mediciones para evaluar el valor promedio de mRAW corregido por el factor de corrección de temperatura y presión. Para esta configuración, se encontró una capa de medio valor de 0,667 milímetros de cobre. En este análisis representativo, se irradiaba una película de dosimetría autodesarrollada para determinar la superficie en la que el campo de irradiación es homogéneo, permitiendo la correcta colocación del recipiente celular.
Para determinar la dosis exacta de las células, la tasa de dosis de kerma de aire medida se convirtió en karma de agua utilizando la relación entre el coeficiente medio de absorción de energía de masa para el agua y el aire evaluados a través del espectro de fluencia fotónico, que para este análisis se determinó que era de 0,659 grises por minuto. En este análisis de atenuación y dispersión de medios de cultivo celular, las películas radiocromáticas de dosimetría autodesarrolladas se calibraron primero entre cero y tres grises con pasos grises de 0,25 entre cero y un gris y 0,5 pasos grises entre uno y tres grises. A continuación, los puntos de dosis estaban equipados con una curva polinómica de cuarto grado.
Aquí se puede observar una tabla representativa utilizada para la medición diaria. Asegúrese de que se respetan todos los parámetros de configuración, de que la tasa de does se mide dentro del contenedor de celdas correcto y de que se evalúa la influencia del medio de cultivo celular. Existen varios protocolos para establecer una medición de referencia de dosis.
El punto clave es seleccionar el protocolo adecuado para una aplicación específica, especialmente cuando se utilizan instalaciones de rayos X bajas.
