Investigación de la patogénesis de la mutación MYH7 Gly823Glu en la miocardiopatía hipertrófica familiar utilizando un modelo de ratón

Este protocolo es significativo ya que puede proporcionar una demostración de ultrasonido en animales pequeños. Esta técnica puede proporcionar información sobre el descubrimiento de genes patógenos en la miocardiopatía hereditaria. Fije los ratones knockin horizontalmente en la plataforma y luego incline la plataforma 30 grados hacia el ratón knockin.

Retire el pelo en la pared torácica anterior de los ratones knockin usando una crema depilatoria, coloque la sonda verticalmente con la protuberancia hacia la cabeza del animal. Luego gire la sonda en sentido contrario a las agujas del reloj aproximadamente 45 grados en la vista del eje largo paraesternal. Gire la sonda 90 grados en el sentido de las agujas del reloj para obtener la vista del eje corto paraesternal.

Después de girar la sonda, ajuste el desplazamiento del eje Y para obtener el sector correcto. Observe la imagen del eje largo del corazón y, a continuación, seleccione los datos de medición del modo M. Adquirir datos de ultrasonido de vistas de eje largo paraesternal de ratones y medir la frecuencia cardíaca, la fracción de eyección del ventrículo izquierdo, el gasto cardíaco, la dimensión ventricular izquierda y diastólica, la dimensión ventricular izquierda y sistólica.

Pared posterior del ventrículo izquierdo y tabique ventricular. Se obtuvieron los pedigríes familiares de miocardiopatía hipertrófica y todos los familiares documentados fueron diagnosticados con inscripción de miocardiopatía hipertrófica. La secuenciación de Sanger confirmó la misma variante M Y H 7 P G 8 23 E en todos los pacientes, pero no en los individuos sanos de las familias.

Y 174 controles, el heterocigoto M Y H 7 P G 8 23 E completamente cosegregado en esta familia. El residuo de glicina en el codón 8 23 en la región del dominio del cuello de M Y H 7 estaba altamente conservado en todas las secuencias de miocinas de vertebrados disponibles. De acuerdo con las normas y directrices A C M G, se predijo que la variante M Y H 7 P G 8 23 E sería una variante patógena.

Los ratones knockin desarrollaron hipertrofia cardíaca dependiente de la edad después del nacimiento. La ecocardiografía reveló que el tabique interventricular y la pared posterior del ventrículo izquierdo se desarrollaron con un aumento de la frecuencia cardíaca en los ratones knockin. También confirmado por el análisis histológico.

Los datos de ultrasonido de virus se pueden obtener girando la sonda en diferentes ángulos en diferentes secciones del término del ratón.