Investigando a patogênese da mutação MYH7 Gly823Glu em cardiomiopatia hipertrófica familiar usando um modelo de camundongo

Este protocolo é significativo, pois pode fornecer uma demonstração de ultrassom em pequenos animais. Esta técnica pode fornecer insights sobre a descoberta de genes patogênicos na cardiomiopatia hereditária. Fixe os mouses knockin horizontalmente na plataforma e, em seguida, incline a plataforma 30 graus para o mouse knockin.

Remova o pelo na parede torácica anterior dos ratos knockin usando um creme depilatório posicione a sonda verticalmente com a protuberância voltada para a cabeça do animal. Em seguida, gire a sonda no sentido anti-horário aproximadamente 45 graus na visão do eixo longo para esternal. Gire a sonda 90 graus no sentido horário para obter a visão do eixo curto para esternal.

Depois de girar a sonda, ajuste o deslocamento do eixo Y para obter a fatia correta. Observe a imagem de eixo longo do coração e, em seguida, selecione os dados de medição do modo M. Adquirir dados ultrassonográficos de incidências de eixo longo para esternal de camundongos e medir a frequência cardíaca, fração de ejeção do ventrículo esquerdo, débito cardíaco, dimensão ventricular esquerda e diastólica, ventricular esquerda e dimensão sistólica.

Parede posterior do ventrículo esquerdo e septo ventricular. Os pedigrees familiares de cardiomiopatia hipertrófica foram obtidos, e todos os membros da família documentados foram diagnosticados com inscrição em cardiomiopatia hipertrófica. O sequenciamento de Sanger confirmou a mesma variante M Y H 7 P G 8 23 E em todos os pacientes, mas não nos indivíduos saudáveis das famílias.

E 174 controles, os heterozigotos M Y H 7 P G 8 23 E completamente co-segregados nesta família. O resíduo de glicina no Códon 8 23 na região do domínio do pescoço de M Y H 7 foi altamente conservado em todas as sequências de miocina de vertebrados disponíveis. De acordo com os padrões e diretrizes A C M G, a variante M Y H 7 P G 8 23 E foi prevista como uma variante patogênica.

Os camundongos knockin desenvolveram hipertrofia cardíaca dependente da idade após o nascimento. A ecocardiografia revelou que o septo interventricular e a parede posterior do ventrículo esquerdo se desenvolveram com aumento da frequência cardíaca nos camundongos knockin. Também confirmado pela análise histológica.

Os dados de ultrassom do vírus podem ser obtidos girando a sonda em diferentes ângulos em diferentes seções do termo do camundongo.