Las células madre CD34+ de la pared vascular residente son cada vez más reconocidas por su papel crucial en la regulación de la remodelación vascular después de una lesión. El establecimiento de un método estable y eficiente para cultivar células CD34+ funcionales es esencial para investigar más a fondo los mecanismos participantes en diversas condiciones fisiológicas y patológicas. Esta técnica combina el cribado magnético con perlas y la citometría de flujo para purificar las células madre CD34+ residentes cultivadas primarias.
Luego, las células purificadas se pueden identificar funcionalmente a través de tinción inmunofluorescente e imágenes de calcio. Debido a la heterogeneidad fenotípica y funcional de las células madre CD34+ residentes en la pared nerviosa vascular, será necesario identificar el tipo subcelular específico de células CD34+ vasculares residentes. Presentamos una metodología refinada para el cultivo, la identificación y la evaluación funcional de células madre CD34+ residentes en la pared vascular.
Este novedoso enfoque abarca la clasificación magnética, la citometría de flujo, la tinción de inmunofluorescencia y la medición de la señalización del calcio. Mediante el empleo de estas técnicas, nuestro estudio establece una base sólida para futuras investigaciones exhaustivas sobre la función bajo regulación de las células madre receptoras CD34+ en condiciones fisiológicas y patológicas.
