Immunmagnetische Isolierung von in der Gefäßwand ansässigen CD34⁺ -Stammzellen aus Mäusen

Residente CD34+-Stammzellen aus der Gefäßwand werden zunehmend für ihre entscheidende Rolle bei der Regulierung des Gefäßumbaus nach einer Verletzung anerkannt. Die Etablierung einer stabilen und effizienten Methode zur Kultivierung funktioneller CD34+-Zellen ist unerlässlich, um die beteiligten Mechanismen unter verschiedenen physiologischen und pathologischen Bedingungen weiter zu untersuchen. Diese Technik kombiniert magnetisches Bead-Screening und Durchflusszytometrie, um die primär kultivierten residenten CD34+-Stammzellen zu reinigen.

Anschließend können die gereinigten Zellen durch Immunfluoreszenzfärbung und Kalziumbildgebung funktionell identifiziert werden. Aufgrund der phänotypischen und funktionellen Heterogenität von residenten CD34+-Stammzellen in der vaskulären Nervenwand wird es notwendig sein, den spezifischen subzellulären Typ der residenten vaskulären CD34+-Zellen zu identifizieren. Wir stellen eine verfeinerte Methodik für die Kultur, Identifizierung und funktionelle Bewertung von gefäßwandresidenten CD34+-Stammzellen vor.

Dieser neuartige Ansatz umfasst magnetische Sortierung, Durchflusszytometrie, Immunfluoreszenzfärbung und Kalziumsignalmessung. Durch den Einsatz dieser Techniken schafft unsere Studie eine solide Grundlage für zukünftige umfassende Untersuchungen der Regulation von Empfänger-CD34+-Stammzellen sowohl unter physiologischen als auch unter pathologischen Bedingungen.