常在性血管壁CD34+幹細胞は、損傷後の血管リモデリングの調節における重要な役割についてますます認識されています。機能性CD34+細胞を安定的かつ効率的に培養する方法を確立することは、さまざまな生理学的および病理学的条件下で関与するメカニズムをさらに研究するために不可欠です。この技術は、磁気ビーズスクリーニングとフローサイトメトリーを組み合わせて、初代培養された常在CD34+幹細胞を精製します。
その後、精製された細胞は、免疫蛍光染色とカルシウムイメージングによって機能的に同定できます。血管神経壁に常在するCD34+幹細胞の表現型および機能的不均一性により、常在する血管CD34+細胞の特定の細胞内タイプを特定する必要があります。血管壁に常在するCD34+幹細胞の培養、同定、および機能評価のための洗練された方法論を紹介します。
この新しいアプローチには、磁気ソーティング、フローサイトメトリー、免疫蛍光染色、およびカルシウムシグナル伝達測定が含まれます。これらの技術を用いることにより、本研究は、レシピエントCD34+幹細胞の生理学的および病理学的条件下での制御下における機能に関する将来の包括的な研究のための強固な基盤を確立する。