Le cellule staminali CD34+ della parete vascolare sono sempre più riconosciute per il loro ruolo cruciale nella regolazione del rimodellamento vascolare post-infortunio. Stabilire un metodo stabile ed efficiente per coltivare cellule CD34+ funzionali è essenziale per studiare ulteriormente i meccanismi di partecipazione in varie condizioni fisiologiche e patologiche. Questa tecnica combina lo screening con biglie magnetiche e la citometria a flusso per purificare le cellule staminali CD34+ residenti in coltura primaria.
Quindi, le cellule purificate possono essere identificate funzionalmente attraverso la colorazione immunofluorescente e l'imaging del calcio. A causa dell'eterogeneità fenotipica e funzionale delle cellule staminali CD34+ residenti nella parete del nervo vascolare, sarà necessario identificare il tipo subcellulare specifico delle cellule CD34+ vascolari residenti. Presentiamo una metodologia raffinata per la coltura, l'identificazione e la valutazione funzionale di cellule staminali CD34+ residenti nella parete vascolare.
Questo nuovo approccio comprende la selezione magnetica, la citometria a flusso, la colorazione in immunofluorescenza e la misurazione della segnalazione del calcio. Utilizzando queste tecniche, il nostro studio stabilisce una solida base per future indagini complete sulla funzione sotto regolazione delle cellule staminali CD34+ riceventi sia in condizioni fisiologiche che patologiche.
