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Method Article
Ce protocole présente un modèle animal grand chirurgical de l’ischémie chronique, seul navire qui se traduit par des anomalies régionales mais ne crée pas d’infarctus, appelé myocarde hibernation. Après établissement de l’ischémie chronique, les animaux sont traités avec la pompe LIMA-LAD coronarienne greffon pontage à recanalisent les tissus ischémiques.
Ischémie cardiaque chronique qui altère la fonction cardiaque, mais n’aboutit pas à un infarctus, est appelé myocarde hibernation (HM). Un vaste sous-ensemble clinique des patients atteints de maladies (CAD) de l’artère coronaire ont HM, qui, en plus de causer le dysfonctionnement, les met à risque élevé d’arythmie et de futurs événements cardiaques. Le traitement standard pour cette condition est la revascularisation, mais cela s’est avéré être un traitement imparfait. La majorité des cardiaque pré-clinique met l’accent sur les modèles d’ischémie cardiaque, infarctus laissant ce sous-groupe de patients d’ischémie chronique en grande partie mal desservie. Pour combler cette lacune dans la recherche, nous avons développé un modèle bien caractérisé et hautement reproductible du myocarde hibernation chez le porc, comme les porcs sont des modèles translationnelles idéales pour les maladies du cœur humain. En plus de créer ce modèle unique de la maladie, nous avons optimisé un modèle de traitement cliniquement significatif de la chirurgie de pontage de l’artère coronaire chez le porc. Cela nous permet précisément étudier les effets de pontage aorto-coronarien sur cardiopathie, mais aussi enquêter sur des thérapies complémentaires ou autres. Ce modèle induit chirurgicalement sténose du vaisseau unique en implanter un constricteur sur l’artère interventriculaire antérieure (LAD) à un jeune cochon. Comme le cochon grandit, le constrictor crée une sténose progressive, ce qui entraîne une ischémie chronique souffrant d’insuffisance régionale, mais préserver la viabilité des tissus. Après l’établissement du phénotype myocarde hibernation, nous effectuons pompe coronaropathie pontage aorto-coronarien greffon pour recanalisent la région ischémique, imitant le traitement de l’étalon-or pour les patients à la clinique.
Maladie coronarienne (CHD) affecte environ 15,5 millions de personnes dans les États-Unis d’Amérique 1 et est l’une des principales causes de décès dans le monde. Alors que le taux de mortalité associé aux maladies coronariennes a baissé ces dernières années, l’incidence et le fardeau sur les patients et le système de santé restent élevés 1. Traitement primaire de CAD sévère est la revascularisation, ce qui améliore la survie et réduit l’angine de poitrine2,3,4. Cependant, la fonction cardiaque souvent reste déprimée, notamment dans le cadre de charge de travail accrue et peut évoluer vers une insuffisance cardiaque5,6. Clinique des essais des artères coronaires pontage aorto-coronarien (CABG) pour l’ischémie chronique montrent amélioration de la survie et les symptômes, mais la fraction d’éjection ne montre que de modestes améliorations de 8 à 10 % 7,8. Notre modèle novateur et bien caractérisé les porcs de l’ischémie myocardique chronique est un modèle de CAO clinique avec sténose vasculaire progressive. Nous avons démontré la contractilité myocardique réduite résultant de la réduction progressive de l' écoulement de sang 9. Le myocarde ne pas infarctus et peut demeurer viable dans ce scénario. Récupération est possible, même si les résultats sont variables même avec revascularisation en temps opportun. Chroniquement myocarde ischémique qui reste viable a été caractérisée par la diminution du débit sanguin et fonction au repos avec prix de réserve non contractile a appelé HM et le traitement nécessite CABG. Bien que la revascularisation du HM devrait restaurer la fonction contractile, observations expérimentales et cliniques démontrent que la récupération est incomplète de8,10.
HM est caractérisée par la présence de viable mais dysfonctionnelle myocarde en présence de réduction de débit sanguin régional11. Malgré la contractilité et l’activité métabolique au repos, HM est en mesure de démontrer la réserve fonctionnelle et métabolique sous stimulation inotrope12. HM est suspecté dans la majorité des patients atteints de CAD et couvre une vaste gamme de maladies. Dans ce protocole, nous démontrons notre modèle porcine établi de HM contourné avec l’artère mammaire interne gauche (LIMA) et artère LAD qui imite le scénario clinique. Le porc fournissait un excellent modèle de maladie cardiaque au cours d’autres grands animaux car ils n’ont pas de collatérales ponts épicardiques. Cela permet à la sténose du garçon seul pour entraîner une ischémie régionale13.
Nous décrivons ici la méthode chirurgicale d’induction d’hibernation myocarde chez le porc en créant votre sténose du vaisseau-single sur l’artère LAD. Lorsque l’ischémie chronique a été établie (8 semaines après l’implant de constrictor LAD), les auteurs décrivent la méthode de recréer le traitement clinique pour HM dans notre modèle de porc : une pompe pontage aortocoronarien greffon. Ces méthodes de traitement chirurgical permet d’étudier non seulement un modèle cliniquement pertinent d’ischémie cardiaque chronique, mais aussi d’étudier les effets du pontage aorto-coronarien sur ischémie cardiaque mais aussi de tester des thérapies potentielles de rechange ou d’appoint pour une ischémie cardiaque.
Toutes les études animales ont été approuvées par l’animalier institutionnel et l’utilisation des comités de la Minneapolis VA Medical Center et l’Université du Minnesota. Suivez les directives actuelles d’instituts nationaux de la santé pour l’utilisation et l’entretien des animaux de laboratoire.
1. hibernation chirurgie
2. revascularisation ou désactiver Bypass pompe
Après la chirurgie initiale de mise en veille prolongée, plus de 70 % de sténose devrait pouvoir être observé par des techniques d’imagerie cliniques comme l’angiographie ou cardiaque IRM (Figure 1A). 8 semaines après l’application chirurgicale de la constrictor LAD, analyse de la fonction régionale par ECHO ou résonance magnétique cardiaque révèle une fonction réduite sous la charge de travail accrue (F...
Ici, nous montrons que notre modèle de porcs de HM avec précision imite l’expérience clinique des patients atteints de la maladie des vaisseaux unique et préservé de la fonction ventriculaire gauche. Avant la revascularisation, animaux avec bateau isolé HM pièce atteinte minimale en fonction globale telle que mesurée par la fraction d’éjection, mais voir la réduction significative dans l’épaississement de la paroi régional. Suite à la revascularisation, imagerie de CMR à un ou trois mois de récupéra...
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Ce travail a été soutenu par le BX000760 VA mérite examen #I01 (RFK) du United States (États-Unis) Department of Veterans Affairs BLR & D. Le contenu de cet ouvrage ne représente pas les vues de l’US Ministère des anciens combattants du gouvernement des États-Unis.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Bair Hugger | 3M | Model 505 | Patient Warming system |
SR Buprenorphine 10 mg/mL | Abbott Labs | NADA 141-434 | Post operative Analgesic |
Surgical Spring Clip | Applied Medical | A1801 | Clamp end of LIMA after takedown |
Arterial Line Kit | Arrow | ASK-04510-HF | Femoral catheter for blood pressure monitoring |
1000mL 0.9% Sodium chloride | Baxter | 2B1324X | IV replacement fluid |
250 mL 0.9% saline | Baxter | UE1322D | Replacement IV Fluid |
500mL 0.9% Sodium chloride | Baxter | 2B1323Q | Drug delivery, Provide mist for Blower Mister |
Flo-thru 1.0 | Baxter | FT-12100 | used to anastomos LIMA to L |
Flo-thru 1.25 | Baxter | FT-12125 | |
Flo-thru 1.5 | Baxter | FT-12150 | |
Flo-thru 2.0 | Baxter | FT-12200 | |
Cloroprep | Becton Dickenson | 260815 | Surgical skin prep |
Meloxicam | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | 0010-6013-01 | NSAID for analgesia |
Hypafix | BSN Medical | 4210 | Secure wound dressing and IV catheters |
IV Tubing for Blower Mister | Carefusion | 42493E | Adapts to IV Fluids for Blower/Mister |
Bovie Cautery hand piece | Covidien | E2516 | Hemostasis |
Chest Tube | Covidien | 8888561043 | Evacuates air from chest cavity |
Monopolar Cautery | Covidien | Valleylab FT10 | Hemostasis |
Telpha pad | Covidien | 2132 | Sterile wound dressing |
4-0 Tevdek II Strands | Deknatel | 7-922 | Suture to secure constrictor around LAD |
Propofol | Diprivan | 269-29 | Induction agent |
long blade for laryngoscope | DRE | 12521 | Allows for visualization of trachea for intubation |
ECG Pads | DRE | 1496 | Monitor heart rhythm |
laryngoscope | DRE | 12515 | |
Anesthesia Machine + ventilator | DRE Drager- Fabius Tiro | DRE0603FT | Deliver Oxygen and inhalant to patient |
5 Ethibond | Ethicon | MG46G | Suture |
0 Vicryl | Ethicon | J208H | Suture |
2-0 Vicryl | Ethicon | J317H | Suture |
3-0 Vicryl | Ethicon | VCP824G | Suture |
7-0 Prolene | Ethicon | M8702 | Suture |
Dermabond | Ethicon | DNX12 | Skin adhesive |
Ligaclips | Ethicon | MSC20 | Surgical Staples for LIMA takedown |
Sterile Saline 20 mL | Fisher Scientific | 20T700220 | Flush for IV catheters |
Telazol 100 mg/mL | Fort Dodge | 01L60030 | Pre operative Sedative |
Triple Antibiotic Ointment | Johnson & Johnson | 23734 | Topical over wound |
6.0 mm ID endotracheal tube | Mallinckrodt | 86049 | Establish airway for Revasc,MRI and Termination |
1" medical tape | Medline | MMM15271Z | Secure wound dressing and IV catheters |
4.0 mm ID endotracheal tube | Medline | DYND43040 | Establish airway for Hibernation |
4.5 mm ID endotracheal tube | Medline | DYND43045 | Establish airway for Hibernation |
5.0 mm ID endotracheal tube | Medline | DYND43050 | Establish airway for Hibernation |
6.5 mm ID endotracheal tube | Medline | DYND43065 | Establish airway for Revasc,MRI and Termination |
7.0 mm ID endotracheal tube | Medline | DYND43070 | Establish airway for Revasc,MRI and Termination |
Bair Hugger Blanket - Large size, underbody | Medline | AUG55501 | Patient Warming system |
Basic pack | Medline | DYNJP1000 | Sterile drapes and table cover |
Bone Wax | Medline | ETHW31G | Hemostasis of cut bone |
Suction tubing | Medline | DYND50223 | |
Suction Container | Medline | DYNDCL03000 | |
1 mL Syringe | Medtronic/Covidien | 1188100777 | Administer injectable agents |
12 mL Syringe | Medtronic/Covidien | 8881512878 | Administer injectable agents |
20 mL Syringe | Medtronic/Covidien | 8881520657 | Administer injectable agents |
3 mL Syinge | Medtronic/Covidien | 1180300555 | Administer injectable agents |
6 mL Syringe | Medtronic/Covidien | 1180600777 | Administer injectable agents |
60 mL Syringe | Medtronic/Covidien | 8881560125 | Administer injectable agents |
Blower Mister Kit | Medtronic/Covidien | 22120 | Clears surgical field for vessel anastomosis |
Roncuronium | Mylan | 67457-228-05 | Neuromuscular blocking agent |
# 40 clipper blade | Oster | 078919-016-701 | Remove hair from surgery sites |
Hair Clipper | Oster | 078566-011-002 | Remove hair from surgery sites |
Bupivicaine | Pfizer | 00409-1161-01 | Local Anesthetic |
Cephazolin | Pfizer | 00409-0805-01 | Antibiotic |
Heparin | Pfizer | 0409-2720-03 | anticoaggulant |
Lidocaine 2% | Pfizer | 00409-4277-01 | Local Anesthetic/ antiarrthymic |
Succinylcholine 20 mg/mL | Pfizer | 00409-6629-02 | Neuromuscular blocking agent |
Anesthesia Monitor | Phillips Intellivue | MP70 | Supports ventilation with inhalant |
Artificial Tears | Rugby | 0536-1086-91 | Lubricate eyes to prevent corneal drying |
Buprenorphine 0.3 mg/mL | Sigma Aldrich | B9275 | Pre operative Analgesic for survivial procedures |
Isoflurane | Sigma Aldrich | CDS019936 | General Anesthestic- Inhalant |
36” Pressure monitoring tubing | Smith’s Medical | MX563 | Connect art. Line to transducer |
48” Pressure monitoring tubing | Smith’s Medical | MX564 | Connect art. Line to transducer |
Jelco 18 ga IV catheter | Smiths medical | 4054 | IV access in Revasc, MRI and Term |
Jelco 20 ga IV catheter | Smiths medical | 4059 | IV access in the MRI |
Jelco 22 ga IV catheter | Smiths medical | 4050 | IV access in Hibernation Procedure |
OPVAC Synergy II | Terumo Cardiovascular System | 401-230 | Heart positioner and Stabilizer |
Sternal Saw/ Necropsy Saw | Thermo Fisher | 812822 | Used to open chest cavity |
Delrin Constrictor | U of MN | Custom made | Creates stenosis of LAD |
Oxygen Tank E cylinder | various | various | Used for Blower Mister if anesthesia machine doesn't have auxiliary flow meter |
Pressure Transducer | various | Must adapt to anesthesia monitor | Monitor direct arterial pressures |
Xylazine 100 mg/mL | Vedco | 468RX | Pre operative Sedative/ analgesic |
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