Prédiction pharmacologique en réseau et validation métabolomique du mécanisme de Fructus phyllanthi contre l’hyperlipidémie

Résumé

Le présent protocole décrit une stratégie intégrée pour explorer les cibles et mécanismes clés de Fructus Phyllanthi contre l’hyperlipidémie basée sur la prédiction pharmacologique en réseau et la vérification métabolomique.

Résumé

L’hyperlipidémie est devenue l’un des principaux facteurs de risque de maladies cardiovasculaires et de lésions hépatiques dans le monde entier. Fructus Phyllanthi (FP) est un médicament efficace contre l’hyperlipidémie dans les théories de la médecine traditionnelle chinoise (MTC) et de la médecine indienne, mais le mécanisme potentiel nécessite une exploration plus approfondie. La présente recherche vise à révéler le mécanisme de la PF contre l’hyperlipidémie en s’appuyant sur une stratégie intégrée combinant la prédiction de la pharmacologie des réseaux et la validation métabolomique. Un modèle de souris induites par un régime riche en graisses (HFD) a été établi en évaluant les taux de lipides plasmatiques, y compris le cholestérol total (TC), les triglycérides (TG), le cholestérol à lipoprotéines de basse densité (LDL-C) et le cholestérol à lipoprotéines de haute densité (HDL-C). La pharmacologie de réseau a été appliquée pour découvrir les ingrédients actifs de la PF et les cibles potentielles contre l’hyperlipidémie. La métabolomique du plasma et du foie a été réalisée pour identifier les métabolites différentiels et leurs voies correspondantes parmi le groupe normal, le groupe modèle et le groupe d’intervention. La relation entre la pharmacologie de réseau et la métabolomique a été construite pour obtenir une vue complète du processus de PF contre l’hyperlipidémie. Les protéines cibles clés obtenues ont été vérifiées par amarrage moléculaire. Ces résultats ont montré que la PF améliorait les taux de lipides plasmatiques et les lésions hépatiques de l’hyperlipidémie induite par une HFD. L’acide gallique, la quercétine et le bêta-sitostérol dans la PF ont été démontrés comme les composés actifs clés. Un total de 16 et six métabolites différentiels potentiels dans le plasma et le foie, respectivement, se sont révélés impliqués dans les effets thérapeutiques de la PF contre l’hyperlipidémie par métabolomique. En outre, l’analyse d’intégration a indiqué que les effets de l’intervention étaient associés au CYP1A1, à l’AChE et au MGAM, ainsi qu’à l’ajustement de la L-kynurénine, de la corticostérone, de l’acétylcholine et du raffinose, impliquant principalement la voie métabolique du tryptophane. L’amarrage moléculaire a permis de s’assurer que les ingrédients ci-dessus agissant sur les cibles protéiques liées à l’hyperlipidémie jouaient un rôle clé dans la réduction des lipides. En résumé, cette recherche a fourni une nouvelle possibilité pour prévenir et traiter l’hyperlipidémie.

Introduction

L’hyperlipidémie est une maladie métabolique courante ayant de graves répercussions sur la santé humaine et constitue également le principal facteur de risque de maladies cardiovasculaires¹. Récemment, il y a eu une tendance à la baisse liée à l’âge pour cette maladie, et les jeunes sont devenus plus sensibles en raison de modes de vie irréguliers à long terme et d’habitudes alimentaires malsaines². En clinique, divers médicaments ont été utilisés pour traiter l’hyperlipidémie. Par exemple, l’un des médicaments les plus couramment utilisés pour les patients atteints d’hyperlipidémie et de troubles athérosclérotiques conn....

Protocole

Toutes les procédures impliquant la manipulation des animaux ont été menées conformément au Guide de soins et d’utilisation des animaux de laboratoire de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu et ont été approuvées par le Comité d’éthique institutionnel de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (protocole numéro 2020-36). Des souris C57BL/6 mâles (20 ± 2 g) ont été utilisées pour la présente étude. Les souris ont été obtenues d’une source commerciale (voir le tableau des matériaux).

1. Prédiction basée sur la pharmacologie en réseau

REMARQU....

Résultats

Pharmacologie de réseau
Au total, 18 ingrédients potentiels dans la PF ont été examinés en fonction de leurs propriétés pharmacocinétiques et pharmacodynamiques à partir de la base de données et de l’analyse LC-MS (les chromatogrammes ioniques totaux sont présentés dans la figure supplémentaire 1). Grâce à la littérature pertinente, la teneur en acide gallique est beaucoup plus élevée que les autres ingrédients et est efficace pour abaisser.......

Discussion

Au cours des dernières années, le taux d’incidence de l’hyperlipidémie a augmenté, principalement en raison d’habitudes alimentaires malsaines à long terme. La MTC et ses ingrédients chimiques ont diverses activités pharmacologiques, qui ont été largement étudiées ces dernières années^37,38. La PF est une sorte de ressource fruitière, utilisée à la fois comme médicament et comme aliment, et a un potentiel important pour traiter l’hyperlipi.......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
101-3B Oven	Luyue Instrument and Equipment Factory	\
80312/80302 Glass Slide	Jiangsu Sitai Experimental Equipment Co., LTD	\
80340-1630 Cover Slip	Jiangsu Sitai Experimental Equipment Co., LTD	\
AccucoreTM C18 (3 mm × 100 mm, 2. 6 μm)	Thermo Fisher Scientific	\
Acetonitrile	Fisher Chemical	A998	Version 1.5.6
ACQUITY UPLC HSS T3 Column (2.1 mm × 100 mm, 1.8 μm)	Thermo Fisher Scientific	\
Aethanol	Fisher Chemical	A995	Version 3.0
Ammonia Solution	Chengdu Cologne Chemicals Co., LTD	1336-21-6	Version 3.9.1
AutoDockTools	Scripps Institution of Oceanography	\
BS-240VT Full-automatic Animal Biochemical Detection System	Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd.	\
Compound Discoverer	Thermo Fisher Scientific	\
Cytoscape	Cytoscape Consortium	\
DM500 Optical Microscope	Leica	\
DV215CD Electronic Balance	Ohaus Corporation ., Ltd	T15A63
Ethyl Alcohol	Chengdu Cologne Chemicals Co., LTD	64-17-5
Formic Acid	Fisher Chemical	A118
HDL-C Assay Kit	Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute	A112-1-1
Hematoxylin Staining Solution	Biosharp	BL700B
High Fat Diet	ENSIWEIER	202211091031
Hitachi CT15E/CT15RE Centrifuge	Hitachi., Ltd.	\
Homogenizer	Oulaibo Technology Co., Ltd	\
Hydrochloric Acid	Chengdu Cologne Chemicals Co., LTD	7647-01-0
Image-forming System	LIOO	\
JB-L5 Freezer	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	\
JB-L5 Tissue Embedder	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	\
JK-5/6 Microtome	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	\
JT-12S Hydroextractor	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	\
KQ3200E Ultrasonic Cleaner	Kun Shan Ultrasonic Instruments Co., Ltd	\
LDL-C Assay Kit	Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute	A113-1-1
Male C57BL/6 Mice	SBF Biotechnology Co., Ltd.	\	Version 2.3.2
Neutral Balsam	Shanghai Yiyang Instrument Co., Ltd	10021190865934
Pure Water	Guangzhou Watson's Food & Beverage Co., Ltd	GB19298
PyMOL	DeLano Scientific LLC	\	Version 14.1
RE-3000 Rotary Evaporator	Yarong Biochemical Instrument Factory ., Ltd	\
RM2016 Pathological Microtome	Shanghai Leica Instruments Co., Ltd	\	Version 26.0
SIMCA-P	Umetrics AB	\
Simvastatin	Merck Sharp & Dohme., Ltd	14202220051
SPSS	International Business Machines Corporation	\
TC Assay Kit	Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute	A111-1-1
TG Assay Kit	Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute	A110-1-1
UPLC-Q-Exactive Quadrupole Electrostatic Field Orbital Hydrazine High Resolution Mass Spectrometry	Thermo Fisher Scientific	\
Vortex Vibrator	Beijing PowerStar Technology Co., Ltd.	LC-Vortex-P1
Xylene	Chengdu Cologne Chemicals Co., LTD	1330-20-7