Pour commencer, assemblez deux ensembles de tubes de 350 millilitres avec différentes concentrations de chlorure de sodium. Trempez les sacs intestinaux préparés dans les tubes spécifiés pendant 30 minutes et 60 minutes pour chaque série. Après le temps imparti, videz la solution à l’intérieur du sac dans un tube de microcentrifugation séparé de 1,5 millilitre et déterminez le volume.
À l’aide d’une seringue de deux millilitres, aspirez le liquide à l’intérieur du sac. Pour créer une courbe standard pour l’histidine, préparez des solutions de différentes concentrations d’histidine en utilisant des solutions mères d’histidine et de l’eau. Ensuite, ajoutez de l’acide sulfanilique et du nitrate de sodium dans chaque tube.
Après avoir incubé les tubes pendant cinq minutes à température ambiante, ajoutez un millilitre de carbonate de sodium et d’éthanol dans chaque tube. Enfin, mesurez l’absorbance à une longueur d’onde de 490 nanomètres. L’estimation de l’histidine à l’aide de la réaction de Pauly a suivi la loi de Lambert-Beer jusqu’à 300 micromolaires d’histidine.
Une corrélation a été observée entre l’absorption d’histidine et les concentrations de sodium dans les entérocytes jéjunaux.
