Les auteurs tiennent à remercier Amanda Struckhoff pour l&#39;aide initiale avec l&#39;expérience. Ce travail a été soutenu par une subvention du NIH 5RO1CA115706.

<ol>
	<li>Lauffenburger, D. A., Horwitz, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration:+a+physically+integrated+molecular+process.">Cell migration: a physically integrated molecular process.</a> Cell. 84, 359-369 (1996).</li><li>Ridley, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration:+integrating+signals+from+front+to+back.">Cell migration: integrating signals from front to back.</a> Science. 302, 1704-1709 (2003).</li><li>Petrie, R. J., Doyle, A. D., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Random+versus+directionally+persistent+cell+migration.">Random versus directionally persistent cell migration.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 10, 538-549 (2009).</li><li>Valone, F. H., Austen, K. F., Goetzl, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+the+random+migration+of+human+platelets.">Modulation of the random migration of human platelets.</a> J. Clin. Invest. 54, 1100-1106 (1974).</li><li>Biehlmaier, O., Hehl, J., Csucs, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquisition+speed+comparison+of+microscope+software+programs.">Acquisition speed comparison of microscope software programs.</a> Microsc. Res. Tech. 74, 539-545 (2011).</li><li>Struckhoff, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+regulation+of+ROCK+in+tumor+cells+controls+CXCR4-driven+adhesion+events.">Dynamic regulation of ROCK in tumor cells controls CXCR4-driven adhesion events.</a> J. Cell. Sci. 123, 401-412 (2010).</li><li>Abramoff, M. D., Magelhaes, P. J., Ram, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image+Processing+with+ImageJ.">Image Processing with ImageJ.</a> Biophoton. Internat. 11, 36-42 (2004).</li><li>Greenberg, J. H., Seppa, S., Seppa, H., Tyl Hewitt, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+collagen+and+fibronectin+in+neural+crest+cell+adhesion+and+migration.">Role of collagen and fibronectin in neural crest cell adhesion and migration.</a> Dev. Biol. 87, 259-266 (1981).</li><li>Albini, A., Sporn, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tumour+microenvironment+as+a+target+for+chemoprevention.">The tumour microenvironment as a target for chemoprevention.</a> Nat. Rev. Cancer. 7, 139-147 (2007).</li><li>Yu, Y. P., Luo, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myopodin-mediated+suppression+of+prostate+cancer+cell+migration+involves+interaction+with+zyxin.">Myopodin-mediated suppression of prostate cancer cell migration involves interaction with zyxin.</a> Cancer. Res. 66, 7414-7419 (2006).</li><li>Teng, T. S., Lin, B., Manser, E., Ng, D. C., Cao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stat3+promotes+directional+cell+migration+by+regulating+Rac1+activity+via+its+activator+betaPIX.">Stat3 promotes directional cell migration by regulating Rac1 activity via its activator betaPIX.</a> J. Cell. Sci. 122, 4150-4159 (2009).</li><li>Wozniak, M. A., Kwong, L., Chodniewicz, D., Klemke, R. L., Keely, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R-Ras+controls+membrane+protrusion+and+cell+migration+through+the+spatial+regulation+of+Rac+and+Rho.">R-Ras controls membrane protrusion and cell migration through the spatial regulation of Rac and Rho.</a> Mol. Biol. Cell. 16, 84-96 (2005).</li><li>Orr, A. W., Elzie, C. A., Kucik, D. F., Murphy-Ullrich, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombospondin+signaling+through+the+calreticulin/LDL+receptor-related+protein+co-complex+stimulates+random+and+directed+cell+migration.">Thrombospondin signaling through the calreticulin/LDL receptor-related protein co-complex stimulates random and directed cell migration.</a> J. Cell Sci. 116, 2917-2927 (2003).</li><li>Smith, A., Bracke, M., Leitinger, B., Porter, J. C., Hogg, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LFA-1-induced+T+cell+migration+on+ICAM-1+involves+regulation+of+MLCK-mediated+attachment+and+ROCK-dependent+detachment.">LFA-1-induced T cell migration on ICAM-1 involves regulation of MLCK-mediated attachment and ROCK-dependent detachment.</a> J. Cell Sci. 116, 3123-3133 (2003).</li></ol>

Nous n&#39;avons rien à communiquer.

Le dosage en temps réel la migration aléatoire permet précis, sensible, l&#39;analyse des paramètres de migration cellulaires tels que la vitesse et le déplacement. Cette méthode n&#39;est pas limitée à la valeur finale de mesure de point, donc il est plus quantitative. Depuis, les cellules sont surveillés en milieu DMEM avec du sérum normal de; il réduit l&#39;effet délétère de plus d&#39;incubation dans le sérum des médias libres. Il a été montré que la migration des cellules dépend de la mise en f...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30243.01 </td><td></td></tr><tr><td> FBS </td><td> Gemini Bio-Produits </td><td> 100-106 </td><td></td></tr><tr><td> Opti-Mem </td><td> Invitrogen </td><td> 31985-070 </td><td></td></tr><tr><td> Collagène </td><td> BD </td><td> 354231 </td><td></td></tr><tr><td> Microscope avec la chambre de cellules vivantes et automatisé contrôleur de platine XY </td><td> Olympe </td><td> Olympus 1X81 </td><td></td></tr><tr><td> Chambre de contrôle de l&#39;environnement </td><td> Neue </td><td> Chambre Neue Live Cell </td><td> La nôtre a une coutume construit plateau rectangulaire plaque en verre pour l&#39;optique appropriées par le haut de la chambre. La forme rectangulaire accueille plaques multi-puits utilisés dans bon nombre de nos expérits. </td></tr><tr><td> Automatique XY </td><td> Avant </td><td> Avant Proscan </td><td> Cela permet de multiplier retour précise positions XY sélectionnés au cours de la microscopie laps de temps. </td></tr><tr><td> Appareil photo </td><td></td><td> Hamamatsu EM appareil C9100 </td><td></td></tr><tr><td> Logiciel </td><td> Généralement achetés par l&#39;intermédiaire du fournisseur de microscope comme Olympus </td><td> 5 Réserver diapositives </td><td></td></tr></tbody></table>

quantitative analysis of random migration of cells using time-lapse video microscopy

La migration cellulaire est un processus dynamique, ce qui est important pour le développement embryonnaire, la réparation des tissus, la fonction du système immunitaire, et l&#39;invasion tumorale 1, 2. Lors de la migration directionnelle, les cellules se déplacent rapidement en réponse à un signal chimiotactique extracellulaire, ou en réponse à des signaux intrinsèques 3 prévus par le mécanisme de base motilité. La migration aléatoire se produit lorsque une cellule possède une faible directivité intrinsèque, permettant aux cellules d&#39;explorer leur environnement local. La migration cellulaire est un processus complexe, dans la cellule de réponse initial est soumise à la polarisation et s&#39;étend saillies dans le sens de la migration 2. Les méthodes traditionnelles de mesure de la migration, comme le test de migration Boyden chambre est une méthode simple pour mesurer la chimiotaxie in vitro, qui permet de mesurer la migration comme un résultat point de fin. Cependant, cette approche ne permet ni la mesure des paramètres de migration individuels, elle ne permet pas de visualisation de changements morphologiques que la cellule subit lors de la migration. Ici, nous présentons une méthode qui nous permet de contrôler les cellules migrent en temps réel en utilisant la vidéo - microscopie laps de temps. Depuis la migration et l&#39;invasion cellulaire sont caractéristiques du cancer, cette méthode sera applicable dans l&#39;étude de la migration des cellules cancéreuses et l&#39;invasion in vitro. La migration aléatoire des plaquettes a été considéré comme l&#39;un des paramètres de la fonction plaquettaire 4, d&#39;où cette méthode pourrait également être utile dans l&#39;étude des fonctions plaquettaires. Ce test présente l&#39;avantage d&#39;être rapide, fiable, reproductible, et ne nécessite pas d&#39;optimisation du nombre de cellules. Afin de maintenir des conditions physiologiquement appropriées pour les cellules, le microscope est équipé d&#39;alimentation en CO 2 et d&#39;un thermostat de température. Le mouvement cellulaire est contrôlé par la prise de vue à l&#39;aide d&#39;une caméra montée sur le microscope à intervalles réguliers. La migration cellulaire peut être calculée en mesurant la vitesse moyenne et unedéplacement mo yen, qui est calculée par un logiciel Slidebook.

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Quantitative Analysis of Random Migration of Cells Using Time-lapse Video Microscopy

Cette méthode permet le suivi des cellules en temps réel et des mesures quantitatives de différents paramètres de migration cellulaires tels que la vitesse, le déplacement et la vitesse. Contrairement aux méthodes traditionnelles, cette approche temps réel n&#39;est pas basée sur des mesures quantitatives de point de terminaison de migration, mais plutôt il permet de surveiller et de calcul des paramètres différents en permanence.

Analyse quantitative des migrations au hasard des cellules en utilisant la microscopie vidéo time-lapse

Cell migration is a dynamic process, which is important for embryonic development, tissue repair, immune system function, and tumor invasion 1, 2. During ...

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