Les auteurs tiennent à remercier tous les étudiants du laboratoire de sécurité alimentaire et les bénévoles qui ont participé à cette étude. Cette recherche a été financée par une subvention de l&#39;Initiative de sécurité nationale de l&#39;USDA intégrée des aliments (NIFSI) (Prix de # 10507316).

Une. Courbe standard <ol><li> Peser 37,5 mg poudre fluorescente et dissoudre dans 6 ml d&#39;éthanol 200 preuve. Faire 2 dilutions en série de cette solution dans l&#39;éthanol 200 preuve. </li><li> Vortex tous les échantillons pendant 10 secondes et mesurer l&#39;absorbance à 370 nm. </li><li> Calculer la quantité de poudre fluorescente par 1 ml d&#39;éthanol 200 preuve. </li><li> Préparer la courbe étalon (concentration en mg / ml sur l&#39;axe des y et l&#39;absorbance à 370 nm sur l&#39;axe des x) pour démontrer l&#39;absorbance en fonction de la concentration de poudre fluorescente. </li></ol> 2. Inoculer de charcuterie (Bologne) avec la poudre fluorescente <ol><li> Couper la viande de charcuterie dans environ 100 mm des échantillons d&#39;épaisseur à l&#39;aide d&#39;un couteau propre et planche à découper. Préparer trois échantillons étiquetés A, B, et C. </li><li> Manteau de l&#39;échantillon A uniformément avec la poudre fluorescente utilisant un peu humide, une éponge propre. Etaler la poudre sur l&#39;échantillon de viande uniformément. Ne pas inoculer des échantillons B et C avec la poudre fluorescente. </li&gt; <li> Envelopper les échantillons d&#39;une pellicule de plastique et étiqueter l&#39;échantillon revêtu de poudre fluorescente «A» et les deux autres échantillons que B et C avec du ruban adhésif. </li><li> Placer les échantillons dans le cas de la charcuterie ou un réfrigérateur qui s&#39;est tenue à 4 ° C dans la cuisine maquette où l&#39;expérience sera réalisée. </li></ol> 3. Mock Deli Préparation Cuisine <ol><li> Fournir des gants propres et 70% d&#39;éthanol par pulvérisation dans la cuisine. </li><li> Montez noir ampoules fluorescentes compactes de 13 W ampoules autour de la zone de trancheuse. </li><li> Préparer une découpe cm de feuille d&#39;aluminium de 5 cm x 5 à servir de matrice pour pistonnage. </li><li> Préparer tubes de 15 ml contenant 6 ml d&#39;éthanol à 95%. </li></ol> 4. Configuration vidéo Mont trois caméras vidéo dans des endroits stratégiques pour observer tous les domaines de la charcuterie maquette en même temps. Allumez les caméras avant de simuler la procédure de trancheuse (comme expliqué dans le protocole 5) et d&#39;analyser les résultats en même temps (commeexpliqué au protocole no 7). 5. Simulation procédures Deli trancher pour le suivi de la contamination croisée Afin d&#39;améliorer la taille de l&#39;échantillon et intégrer variation, effectuer cette étude en recrutant des participants après l&#39;approbation du protocole par le Conseil de l&#39;institution respective Institutional Review. Le participant peut être un étudiant d&#39;université qui peuvent ou peuvent ne pas avoir une expérience de travail dans des environnements de charcuterie au détail. Assurez-vous que chaque participant porte des gants une fois qu&#39;ils entrent dans les épicerie. Prenez un «avant» l&#39;image sous une lumière fluorescente noir suivi d&#39;un &quot;après&quot; image à la fin de l&#39;étude. Fournir des instructions écrites et verbales claires à chaque participant comme suit: <ol><li> Aller au réfrigérateur. </li><li> Retirer la viande étiquetée «A». </li><li> Déroulez la viande et enregistrer une pellicule de plastique. </li><li> Placez la viande sur le plateau de transport de trancheuse. </li><li> Fixer la viande avec la poignée de la viande. </li><li> Mettre l&#39;interrupteur sur ON. </li><li> Réglez slibouton d&#39;index cer à &quot;2&quot;. </li><li> Trancher et distribuer 5 morceaux de viande sur du papier épicerie. </li><li> Mettre l&#39;interrupteur sur OFF et relâchez poignée de viande. </li><li> Placer les tranches de viande dans un sac plastique étiqueté «A». </li><li> Envelopper la viande &quot;A&quot; et retourner dans le réfrigérateur. </li><li> Répétez les étapes 2-11 de viandes étiquetées «B» et «C». </li></ol> 6. Quantifier poudre fluorescente Quantifier la poudre fluorescente après l&#39;achèvement du tranchage maquette (section 5.4) dans la cuisine de la charcuterie. Pour ce faire, le texte suivant: <ol><li> Utilisez les 5 cm x 5 cm modèle de feuille d&#39;aluminium stérile et placez-le sur les zones marquées sur la figure 1. </li><li> Utiliser un tampon d&#39;alginate de calcium de coton stérile imbibé d&#39;éthanol à 95%, nettoyer la zone, et les placer dans 6 ml d&#39;éthanol à 95% dans un tube en polypropylene stérile. </li><li> Vortex le tube à fond et le transfert dans une cuvette en verre pour lire l&#39;absorbance à 370 nm. </li><li> Reportez-vous à la standard courbe pour déterminer la quantité de poudre fluorescente (y) en utilisant l&#39;équation suivante: y = mx + b où x est l&#39;absorbance, m est la pente de la courbe d&#39;étalonnage, et b est l&#39;ordonnée à l&#39;origine. </li><li> Pour la normalisation des données, le calcul de la poudre fluorescente pour cent de l&#39;air échantillonné à l&#39;aide de la formule suivante: </li></ol><img src="/files/ftp_upload/51402/51402eq1.jpg" alt="Formule 1" /> 7. Analyse de la vidéo Filmer les participants comme ils accomplir des tâches 5.1 à 5.12. Synchroniser et sauvegarder les enregistrements vidéo sur DVD de sorte que tous les angles peuvent être affichés en même temps. Regardez les vidéos pour enregistrer le nombre de touches à la main (le nombre de fois volontaires touchent les domaines de la charcuterie maquette) sur différentes surfaces dans l&#39;environnement charcuterie (4 différents chercheurs analyseront les énoncés indépendamment des données complètes).

<ol>
	<li>Sheen, S., Hwang, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mathematical+modeling+the+cross-contamination+of+Escherichia+coli+O157:+H7+on+the+surface+of+ready-to-eat+meat+product+while+slicing.">Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing.</a> Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).</li><li>Crandall, P., Neal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimizing+the+risk+of+Listeria+monocytogenes+in+retail+delis+by+developing+employee+focused,+cost+effective+training.">Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).</li><li>Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+and+chemical+control+of+Salmonella+in+ready-to-eat+products.">Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).</li><li>Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precut+prepackaged+lettuce:+a+risk+for+listeriosis?.">Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis?.</a> Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).</li><li>Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salmonellosis+outbreaks+in+the+United+States+due+to+fresh+produce:+sources+and+potential+intervention+measures.">Salmonellosis outbreaks in the United States due to fresh produce: sources and potential intervention measures.</a> Foodborne Pathog. Dis. 6, 635-648 (2008).</li><li>Zhu, M., Du, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+Listeria+monocytogenes+contamination+in+ready&#8208;to&#8208;eat+meat+products.">Control of Listeria monocytogenes contamination in ready&#8208;to&#8208;eat meat products.</a> Compr. Rev. Food Sci. Food Safety. 4, 34-42 (2005).</li><li>Lianou, A., Sofos, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+incidence+and+transmission+of+Listeria+monocytogenes+in+ready-to-eat+products+in+retail+and+food+service+environments.">A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments.</a> J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+risk+assessment+of+relative+risk+to+public+health+from+foodborne+Listeria+monocytogenes+among+selected+categories+of+ready-to-eat+foods.">Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods.</a> , .</li><li>Endrikat, S., Gallagher, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+risk+assessment+for+Listeria+monocytogenes+in+prepackaged+versus+retail-sliced+deli+meat.">A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat.</a> J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).</li><li>Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+public+health+impact+of+Listeria+monocytogenes+product-to-product+and+environment-to-product+contamination+of+deli+meats+at+retail.">Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail.</a> J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).</li><li>Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Handwashing+Technique+Analysis.">Handwashing Technique Analysis.</a> Patent number 5900067. , (1999).</li><li>Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+and+relative+quantification+of+cross-contamination+within+a+mock+retail+delicatessen+environment.">Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment.</a> Food Control. 31, 116-124 (2013).</li><li>Xiao, M., Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+and+System+for+Fecal+Detection.">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5821546. , (1998).</li><li>Waldroup, A., Kirby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+and+System+for+Fecal+Detection.">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5621215. , (1997).</li><li>Ashby, K. D., Wen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+of+dietary+porphyrins+as+a+basis+for+real-time+detection+of+fecal+contamination+on+meat.">Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat.</a> J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).</li><li>Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+protein+marked+Escherichia+coli+biotype+I+strains+as+surrogates+for+enteric+pathogens+in+validation+of+beef+carcass+interventions.">Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions.</a> J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).</li><li>Byrd, J., Hargis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+marker+for+the+detection+of+crop+and+upper+gastrointestinal+leakage+in+poultry+processing+plants.">Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants.</a> Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).</li><li>Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+Listeria+monocytogenes+during+mechanical+slicing+of+turkey+breast+bologna,+and+salami..">Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami..</a> J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).</li></ol>

Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

L&#39;objectif général de cette étude était de démontrer comment la contamination croisée bactérienne pourrait se produire dans un environnement de charcuterie de détail afin d&#39;élaborer des stratégies pour contrôler et réduire le risque de maladie d&#39;origine alimentaire. L&#39;environnement de la charcuterie de détail présente un risque particulièrement élevé pour L. monocytogenes contamination. L&#39;USDA-FSIS rapporté que la charcuterie en tranches au magasin de détail a un sept fois...

La contamination croisée des agents pathogènes d&#39;origine alimentaire dans l&#39;environnement de préparation des aliments, en particulier dans la section de détail, est une préoccupation majeure en raison d&#39;un risque accru de maladies d&#39;origine alimentaire à partir d&#39;une variété de sources, y compris les viandes ainsi que les légumes 1-5. Le plus souvent, les bactéries pathogènes pénètrent dans l&#39;environnement de vente au détail grâce à des produits alimentaires contaminés 6. Les aliments prêts-à-manger préparés au niveau du détail sont particulièrement préoccupantes, car il est généralement aucune intervention ou de traitement (c.-à-cuisson ou de chauffage) avant la consommation 7. En outre, les agents pathogènes présents sur les aliments contaminés RTE peuvent ensuite être transférées à d&#39;autres produits alimentaires ou les surfaces de contact avec les aliments dans l&#39;environnement de vente au détail. Bien que la contamination croisée peut se produire dans n&#39;importe quel type d&#39;environnement de l&#39;alimentation au détail, épiceries fines sont d&#39;un intérêt particulier en raison précisément de l&#39;association de RTE charcuterie avec l&#39;agent pathogène Listeria monocytogènes 2. Basé sur une évaluation des risques analyse menée par la US Food and Drug Administration (FDA) et le ministère de la fonction d&#39;inspection (USDA-FSIS) Agriculture salubrité des aliments et des États-Unis, les produits de charcuterie contaminés sont probablement responsables de 90% des cas de listériose - un rare maladie humaine encore grave causée par L. monocytogenes - aux États-Unis 8. En général, les produits de charcuterie en tranches dans des établissements de services de détail et des produits alimentaires ont été associées à un risque plus élevé de L. monocytogenes par rapport à la charcuterie prétranchées dans une usine inspectée par l&#39;USDA par le fabricant 9. Cela pourrait être en raison de la probabilité accrue d&#39;introduction d&#39;agents pathogènes par les manipulateurs d&#39;aliments, ingrédients bruts, ou les aliments transformés qui peuvent être contaminés de post-traitement 7. Dans l&#39;ensemble, la listériose représente environ 28% des décès estimés causés par la maladie d&#39;origine alimentaire chaque année aux États-Unis En raison de l&#39;enrisque accru de L. monocytogenes contamination dans les produits de charcuterie en tranches au niveau du détail, l&#39;épicerie se trancheuse a été identifié comme un facteur important pour le transfert de surface des agents pathogènes d&#39;origine alimentaire dans l&#39;environnement de vente au détail 2,10. Comme indiqué par Sheen 1, tranchage est la dernière étape de traitement préalable à la consommation et, par conséquent, la trancheuse de charcuterie doit être considéré comme un point de contrôle critique pour la compréhension et la prévention de la contamination croisée 1. L&#39;objectif général de cette étude était de développer une méthodologie pour suivre la contamination dans l&#39;environnement de la charcuterie de détail à l&#39;aide d&#39;une poudre fluorescente comme Glo Germ. Il s&#39;agit d&#39;un composé fluorescent qui a été utilisé pour simuler la contamination bactérienne de la croix et les pratiques d&#39;hygiène 11,12. Cette étude a été conçue pour suivre le transfert de pathogènes des viandes contaminées à la trancheuse, l&#39;environnement, et d&#39;autres produits de charcuterie. Il est crucial de comprendre les voies de contamination à développer à la fois des interventions efficaces et de matériel éducatif pour les employés et les gestionnaires de détail. Une approche similaire peut être utilisée pour simuler le transfert de pathogènes dans d&#39;autres environnements de traitement (par exemple, de volaille et de bœuf), les fermes et les hôpitaux.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="637">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Glo-Germ Powder</td>
			<td style="width:71px;">Glo Germ Co</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Purchased from vendor</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Ethanol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">E7023</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Permanent markets</td>
			<td style="width:71px;">Sharpie</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td colspan="2">Purchased from stationary store</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Gloves</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82026-424</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Deli Meat</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td colspan="2">Bologna Chub from regular grocery store</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Cutting Board</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td colspan="2">A regukar kitchen cutting board</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Knife</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>A regular kitchen knife&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">5 x 5 cm sterile templates</td>
			<td style="width:71px;">NA</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td colspan="2">Aluminium foil templates cut into 5x 5 cm templates and sterilized&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">15 ml polypropylene centrifuge tubes</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">89039-664</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:71px;">Puritan</td>
			<td style="width:119px;">25-806</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Glass cuvettes</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">470019-186</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Vortex</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">58816-121</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Flip camera</td>
			<td style="width:71px;">Flip Ultra HD</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Purchased online</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Deli slicer</td>
			<td style="width:71px;">Bizerba</td>
			<td style="width:119px;">SE-12</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Deli refrigerator</td>
			<td style="width:71px;">True company</td>
			<td style="width:119px;">TDBD-722</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Scale</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">Spectrophotometer</td>
			<td style="width:71px;">Milton Roy Spectronic 20D</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tracking microbial contamination in retail environments using fluorescent powder - a retail delicatessen environment example

La contamination croisée des agents pathogènes d&#39;origine alimentaire dans l&#39;environnement de vente au détail est un problème de santé publique important contribuant à un risque accru de maladie d&#39;origine alimentaire. Les aliments prêts-à-manger (PAM) transformés tels que les produits de charcuterie, de fromage, et dans certains cas des produits frais, ont été impliqués dans des flambées de maladies d&#39;origine alimentaire dues à la contamination par des agents pathogènes comme Listeria monocytogenes. En ce qui concerne L. monocytogenes, trancheuses de charcuterie sont souvent la principale source de contamination croisée. L&#39;objectif de cette étude était d&#39;utiliser un composé fluorescent pour simuler la contamination bactérienne et le suivi de cette contamination dans un environnement de détail. Une cuisine d&#39;épicerie maquette a été conçu pour simuler l&#39;environnement de vente au détail. Charcuterie a été inoculé avec le composé fluorescent et les bénévoles ont été recrutés pour compléter un ensemble de tâches similaires à ceux attendus d&#39;un employé de la distribution alimentaire. Les volontaires ont été invités à trancher, ensemble, et de stocker la viande dans un réfrigérateur épicerie. Le potentielcontamination croisée a été suivi dans l&#39;environnement simulé détail par écouvillonnage des zones spécifiques et en mesurant la densité optique de la zone frottée avec un spectrophotomètre. Les résultats ont indiqué que le réfrigérateur (c.-à-épicerie cas) adhérence et les différents domaines de la trancheuse avaient le risque le plus élevé de contamination croisée. Les résultats de cette étude peuvent être utilisés pour développer du matériel de formation plus ciblée pour les employés au détail. En outre, des méthodes similaires pourraient également être utilisés pour suivre la contamination microbienne dans les environnements de production alimentaire (par exemple de petites fermes), les hôpitaux, maisons de soins infirmiers, les navires de croisière et les hôtels.

Figure 1 représente les domaines de la trancheuse qui ont été frottée après les bénévoles ont complété les tâches assignées. Les bénévoles ont été filmés pour analyser la fréquence moyenne des contacts de la main sur ces différentes surfaces. La fréquence des contacts de la main a été analysée par quatre observateurs différents et moyenne. Ces résultats sont illustrés sur la figure 2. Les données montrent que la poignée de la viande, emballage de charcuterie, ...

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Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

L&#39;objectif général de cette étude était de démontrer le mécanisme de contamination croisée potentielle de pathogènes d&#39;origine alimentaire Listeria monocytogenes dans un cadre de charcuterie au détail. Cette méthodologie peut être appliquée à une variété d&#39;environnements différents pour suivre la contamination de l&#39;agent pathogène.

Suivi de la contamination microbienne dans les environnements de vente au détail à l&#39;aide de poudre fluorescente - Un détail Charcuterie Environnement Exemple

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

tracking-microbial-contamination-retail-environments-using

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11.0K vues.  University of Houston.  L'objectif général de cette étude était de démontrer le mécanisme de contamination croisée potentielle de pathogènes d'origine alimentaire Listeria monocytogenes dans un cadre de charcuterie au détail. Cette méthodologie peut être appliquée à une variété d'environnements différents pour suivre la contamination de l'agent pathogène. 

Vidéo: Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

Determination of Microbial Extracellular Enzyme Activity in Waters, Soils, and Sediments using High Throughput Microplate Assays

Much of the nutrient cycling and carbon processing in natural environments occurs through the activity of extracellular enzymes released by microorganisms. Thus, measurement of the activity of these extracellular enzymes can give insights into the rates of ecosystem level processes, such as organic matter decomposition or nitrogen and phosphorus mineralization. Assays of extracellular enzyme activity in environmental samples typically involve exposing the samples to artificial colorimetric or fluorometric substrates and tracking the rate of substrate hydrolysis. Here we describe microplate based methods for these procedures that allow the analysis of large numbers of samples within a short time frame. Samples are allowed to react with artificial substrates within 96-well microplates or deep well microplate blocks, and enzyme activity is subsequently determined by absorption or fluorescence of the resulting end product using a typical microplate reader or fluorometer. Such high throughput procedures not only facilitate comparisons between spatially separate sites or ecosystems, but also substantially reduce the cost of such assays by reducing overall reagent volumes needed per sample.

Microplate based procedures are described for the colorimetric or fluorometric analysis of extracellular enzyme activity. These procedures allow for the rapid assay of such activity in large numbers of environmental samples within a manageable time frame.

Détermination de l&#39;activité enzymatique microbienne extracellulaire dans les eaux, les sols et les sédiments de haut débit microplaques dosages

Much of the nutrient cycling and carbon  processing in natural environments occurs through the activity of extracellular  enzymes released by ...

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Environnement

Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms. Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear young, feed, or hide from natural enemies or harsh environmental conditions outside of the tree. Organisms that persist within the phloem habitat are difficult to observe given their location under bark. We provide a technique to preserve intact phloem and prepare it for experimentation with invertebrates and microorganisms. The apparatus is called a &#8216;phloem sandwich&#8217; and allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms. This technique has resulted in a better understanding of the feeding behaviors, life-history traits, reproduction, development, and interactions of organisms within tree phloem. The strengths of this technique include the use of inexpensive materials, variability in sandwich size, flexibility to re-open the sandwich or introduce multiple organisms through drilled holes, and the preservation and maintenance of phloem integrity. The phloem sandwich is an excellent educational tool for scientific discovery in both K-12 science courses and university research laboratories.

We provide a technique to preserve intact tree phloem and prepare it for observation. We create an apparatus called a phloem sandwich that allows for the introduction and observation of arthropods, microbes, and other organisms that inhabit phloem tissues.

Technique pour l&#39;étude des arthropodes et communautés microbiennes dans les tissus des arbres

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms.  Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear ...

An Aquatic Microbial Metaproteomics Workflow: From Cells to Tryptic Peptides Suitable for Tandem Mass Spectrometry-based Analysis

Meta-omic technologies such as metagenomics, metatranscriptomics and metaproteomics can aid in the understanding of microbial community structure and metabolism. Although powerful, metagenomics alone can only elucidate functional potential. On the other hand, metaproteomics enables the description of the expressed in situ metabolism and function of a community. Here we describe a protocol for cell lysis, protein and DNA isolation, as well as peptide digestion and extraction from marine microbial cells collected on a cartridge filter unit (such as the Sterivex filter unit) and preserved in an RNA stabilization solution (like RNAlater). In mass spectrometry-based proteomics studies, the identification of peptides and proteins is performed by comparing peptide tandem mass spectra to a database of translated nucleotide sequences. Including the metagenome of a sample in the search database increases the number of peptides and proteins that can be identified from the mass spectra. Hence, in this protocol DNA is isolated from the same filter, which can be used subsequently for metagenomic analysis.

This protocol is for the extraction and concentration of protein and DNA from microbial biomass collected from seawater, followed by the generation of tryptic peptides suitable for tandem mass spectrometry-based proteomic analysis.

Un microbienne aquatique métaprotéomique Workflow: à partir de cellules à tryptique peptides appropriés pour l&#39;analyse comparative-spectrométrie de masse en tandem

Meta-omic technologies such as metagenomics, metatranscriptomics and metaproteomics can aid in the understanding of microbial community structure and ...

Extraction and Analysis of Microbial Phospholipid Fatty Acids in Soils

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about the overall structure of terrestrial microbial communities. PLFA profiling has been extensively used in a range of ecosystems as a biological index of overall soil quality, and as a quantitative indicator of soil response to land management and other environmental stressors.
The standard method presented here outlines four key steps: 1. lipid extraction from soil samples with a single-phase chloroform mixture, 2. fractionation using solid phase extraction columns to isolate phospholipids from other extracted lipids, 3. methanolysis of phospholipids to produce fatty acid methyl esters (FAMEs), and 4. FAME analysis by capillary gas chromatography using a flame ionization detector (GC-FID). Two standards are used, including 1,2-dinonadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (PC(19:0/19:0)) to assess the overall recovery of the extraction method, and methyl decanoate (MeC10:0) as an internal standard (ISTD) for the GC analysis.

Phospholipid fatty acids provide information about the structure of soil microbial communities. We present methods for extraction from soil samples with a single-phase chloroform mixture, fractionation of extracted lipids using solid phase extraction columns, and methanolysis to produce fatty acid methyl esters, which are analyzed by capillary gas chromatography.

Extraction et analyse des acides gras des phospholipides microbiens dans les sols

Phospholipid fatty acids (PLFAs) are key components of microbial cell membranes. The analysis of PLFAs extracted from soils can provide information about ...

Sampling, Sorting, and Characterizing Microplastics in Aquatic Environments with High Suspended Sediment Loads and Large Floating Debris

The ubiquitous presence of plastic debris in the ocean is widely recognized by the public, scientific communities, and government agencies. However, only recently have microplastics in freshwater systems, such as rivers and lakes, been quantified. Microplastic sampling at the surface usually consists of deploying drift nets behind either a stationary or moving boat, which limits the sampling to environments with low levels of suspended sediments and floating or submerged debris. Previous studies that employed drift nets to collect microplastic debris typically used nets with &#8805;300 &#181;m mesh size, allowing plastic debris (particles and fibers) below this size to pass through the net and elude quantification. The protocol detailed here enables: 1) sample collection in environments with high suspended loads and floating or submerged debris and 2) the capture and quantification of microplastic particles and fibers &lt;300 &#181;m. Water samples were collected using a peristaltic pump in low-density polyethylene (PE) containers to be stored before filtering and analysis in the lab. Filtration was done with a custom-made microplastic filtration device containing detachable union joints that housed nylon mesh sieves and mixed cellulose ester membrane filters. Mesh sieves and membrane filters were examined with a stereomicroscope to quantify and separate microplastic particulates and fibers. These materials were then examined using a micro-attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectrometer (micro ATR-FTIR) to determine microplastic polymer type. Recovery was measured by spiking samples using blue PE particulates and green nylon fibers; percent recovery was determined to be 100% for particulates and 92% for fibers. This protocol will guide similar studies on microplastics in high velocity rivers with high concentrations of sediment. With simple modifications to the peristaltic pump and filtration device, users can collect and analyze various sample volumes and particulate sizes.

Most microplastic research to date has occurred in marine systems where suspended solid levels are relatively low. Focus is now shifting to freshwater systems, which may feature high sediment loads and floating debris. This protocol addresses collecting and analyzing microplastic samples from aquatic environments that contain high suspended solid loads.

Échantillonnage, tri et caractériser les microplastiques dans les milieux aquatiques avec les charges de sédiments en suspension haute et les gros débris flottant

The ubiquitous presence of plastic debris in the ocean is widely recognized by the public, scientific communities, and government agencies. However, only ...

Detection of 3-Nitrotyrosine in Atmospheric Environments via a High-performance Liquid Chromatography-electrochemical Detector System

3-nitrotyrosine (3-NT) is generated from the tyrosine residue in atmospheric bio-aerosol proteins via a reaction with ozone (O3) and nitrogen dioxide (NO2). Stable 3-NT is a specific marker for oxidative damage and is reported to have a promotive effect to elicit allergies. In the present study, we report the development of a highly sensitive assay to quantify 3-NT in air sampler filters to collect &#60; 2.5 &#181;m of particulate matter (PM2.5) from urban environmental air, including bio-aerosol. In this method, a 6 mm-diameter round hole was cut from the filters of air samplers and mixed with a nonspecific protease cocktail in order to hydrolyze proteins. Protein samples digested to the amino acid level were tested for 3-NT using a high-performance liquid chromatography-electrochemical detector (HPLC-ECD). The maximum 3-NT content was detected in a prefilter for PM of sizes from 4.5 to 7.3 &#956;m, with a detection limit of 1.13 pg/m3.

Detection of 3-Nitrotyrosine in Atmospheric Environments via a High-performance Liquid Chromatography-electrochemical Detector System

We present a method to detect 3-nitrotyrosine chemical modifications of atmospheric proteins with 6 mm-diameter rounds cut from air sampler prefilters using a high-performance liquid chromatography-electrochemical detector (HPLC-ECD).

Détection des 3-Nitrotyrosine dans des environnements atmosphérique via une haute performance système détecteur électrochimique-chromatographie en phase liquide

3-nitrotyrosine (3-NT) is generated from the tyrosine residue in atmospheric bio-aerosol proteins via a reaction with ozone (O3) and nitrogen dioxide ...

Fluorescently Labeled Bacteria as a Tracer to Reveal Novel Pathways of Organic Carbon Flow in Aquatic Ecosystems

Elucidating trophic interactions, such as predation and its effects, is a frequent task for many researchers in ecology. The study of microbial communities has many limitations, and determining a predator, prey, and predatory rates is often difficult. Presented here is an optimized method based on the addition of fluorescently labelled prey as a tracer, which allows for reliable quantitation of the grazing rates in aquatic predatory eukaryotes and estimation of nutrient transfer to higher trophic levels.

Presented here is a protocol for a single-cell, epifluorescence microscopy-based technique to quantify grazing rates in aquatic predatory eukaryotes with high precision and taxonomic resolution.

Bactéries étiquetées fluorescentes comme traceur pour révéler de nouvelles voies de flux de carbone organique dans les écosystèmes aquatiques

Elucidating trophic interactions, such as predation and its effects, is a frequent task for many researchers in ecology. The study of microbial ...

Enrichment and Detection of Clostridium perfringens Toxinotypes in Retail Food Samples

Clostridium perfringens (C. perfringens) is a prolific toxin producer and causes a wide range of diseases in various hosts. C. perfringens is categorized into five different toxinotypes, A through E, based on the carriage of four major toxin genes. The prevalence and distribution of these various toxinotypes is understudied, especially their pervasiveness in American retail food. Of particular interest to us are the type B and D strains, which produce epsilon toxin, an extremely lethal toxin suggested to be the environmental trigger of multiple sclerosis in humans. To evaluate the presence of different C. perfringens toxinotypes in various food samples, we developed an easy method to selectively culture these bacteria without the use of an anaerobic container system only involving three culturing steps. Food is purchased from local grocery stores and transported to the laboratory under ambient conditions. Samples are minced and inoculated into modified rapid perfringens media (RPM) and incubated overnight at 37 &#176;C in a sealed, airtight conical tube. Overnight cultures are inoculated onto a bottom layer of solid Tryptose Sulfite Cycloserine (TSC) agar, and then overlaid with a top layer of molten TSC agar, creating a &#34;sandwiched&#34;, anaerobic environment. Agar plates are incubated overnight at 37 &#176;C and then evaluated for appearance of black, sulfite-reducing colonies. C. perfringens-suspected colonies are removed from the TSC agar using sterile eye droppers, and inoculated into RPM and sub-cultured overnight at 37 &#176;C in an airtight conical tube. DNA is extracted from the RPM subculture, and then analyzed for the presence of C. perfringens toxin genes via polymerase chain reaction (PCR). Depending on the type of food sampled, typically 15&#8211;20% of samples test positive for C. perfringens.

Enrichment and Detection of Clostridium perfringens Toxinotypes in Retail Food Samples

The objective of this protocol is to detect different Clostridium perfringens toxinotypes in locally purchased foods, particularly epsilon toxin producing strain types B and D, without the use of anaerobic chambers.

L'enrichissement et la détection des toxines de Clostridium perfringens dans les échantillons d'aliments au détail

Clostridium perfringens (C. perfringens) is a prolific toxin producer and causes a wide range of diseases in various hosts. C. perfringens is categorized ...

In Situ Chemotaxis Assay to Examine Microbial Behavior in Aquatic Ecosystems

Microbial behaviors, such as motility and chemotaxis (the ability of a cell to alter its movement in response to a chemical gradient), are widespread across the bacterial and archaeal domains. Chemotaxis can result in substantial resource acquisition advantages in heterogeneous environments. It also plays a crucial role in symbiotic interactions, disease, and global processes, such as biogeochemical cycling. However, current techniques restrict chemotaxis research to the laboratory and are not easily applicable in the field. Presented here is a step-by-step protocol for the deployment of the in situ chemotaxis assay (ISCA), a device that enables robust interrogation of microbial chemotaxis directly in the natural environment. The ISCA is a microfluidic device consisting of a 20 well array, in which chemicals of interest can be loaded. Once deployed in aqueous environments, chemicals diffuse out of the wells, creating concentration gradients that microbes sense and respond to by swimming into the wells via chemotaxis. The well contents can then be sampled and used to (1) quantify strength of the chemotactic responses to specific compounds through flow cytometry, (2) isolate and culture responsive microorganisms, and (3) characterize the identity and genomic potential of the responding populations through molecular techniques. The ISCA is a flexible platform that can be deployed in any system with an aqueous phase, including marine, freshwater, and soil environments.

Presented here is the protocol for an in situ chemotaxis assay, a recently developed microfluidic device that enables studies of microbial behavior directly in the environment.

Test de chimiotaxis in situ pour examiner le comportement microbien dans les écosystèmes aquatiques

Microbial behaviors, such as motility and chemotaxis (the ability of a cell to alter its movement in response to a chemical gradient), are widespread ...

Evaluating the Impact of Hydraulic Fracturing on Streams using Microbial Molecular Signatures

Hydraulic fracturing (HF), commonly called &#34;fracking&#34;, uses a mixture of high-pressure water, sand, and chemicals to fracture rocks, releasing oil and gas. This process revolutionized the U.S. energy industry, as it gives access to resources that were previously unobtainable and now produces two-thirds of the total natural gas in the United States. Although fracking has had a positive impact on the U.S. economy, several studies have highlighted its detrimental environmental effects. Of particular concern is the effect of fracking on headwater streams, which are especially important due to their disproportionately large impact on the health of the entire watershed. The bacteria within those streams can be used as indicators of stream health, as the bacteria present and their abundance in a disturbed stream would be expected to differ from those in an otherwise comparable but undisturbed stream. Therefore, this protocol aims to use the bacterial community to determine if streams have been impacted by fracking. To this end, sediment, and water samples, from streams near fracking (potentially impacted) and upstream or in a different watershed of fracking activity (unimpacted) must be collected. Those samples are then subjected to nucleic acid extraction, library preparation, and sequencing to investigate microbial community composition. Correlational analysis and machine learning models can subsequently be employed to identify which features are explanative of variation in the community, as well as identification of predictive biomarkers for fracking&#39;s impact. These methods can reveal a variety of differences in the microbial communities among headwater streams, based on the proximity to fracking, and serve as a foundation for future investigations on the environmental impact of fracking activities.

Here, we present a protocol to investigate the impacts of hydraulic fracturing on nearby streams by analyzing their water and sediment microbial communities.

Évaluation de l’impact de la fracturation hydraulique sur les cours d’eau à l’aide de signatures moléculaires microbiennes

Hydraulic fracturing (HF), commonly called &#34;fracking&#34;, uses a mixture of high-pressure water, sand, and chemicals to fracture rocks, releasing oil ...