Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063 ; Ministère de la santé, Services sociaux et l’égalité. Délégation du gouvernement pour le Plan National sur les drogues, les projets de recherche sur les toxicomanies, 2014I007 ; Ministère de l’Economie et compétitivité (MINECO), Institut de santé Carlos III, réseau de provoquant troubles (RTA) RD12 / 0028/0005 et RD16 / 17/07/00 et Union européenne FEDER Fonds « una manera de hacer Europa » et PSI2014-51847-R.

Toutes les procédures impliquant les souris et leurs soins respectées les lois nationales, régionales et locales et les règlements qui sont conformes à la Directive 2010/63/UE du Parlement européen et du Conseil du 22 septembre 2010 relative à la protection des animaux utilisés pour fins scientifiques. L’utilisation de l’Animal et le Comité de protection de l’Université de Valence a approuvé le présent protocole.
1. les matériaux et la mise en place de préférence de Place conditionnée :
<ol><li>Gérer les souris 3 jours avant le test pour 1-2 minutes chacun. La base de la queue doit être saisie. Le corps doit être soutenu si possible. Ceci est fait pour minimiser la douleur et la détresse lors de la manipulation d’un animal et éviter les variables parasites, tels que le stress. Remarque : Des souris mâles 1 60 jours (jeunes adultes) 35 à 40 grammes travaillaient dans ces expériences. Rétablissement de médicamenteuse peut être effectuée chez les souris des deux sexes. Toutefois, concernant la réintégration induite par le stress, le paradigme de la défaite sociale est conçu uniquement pour rongeurs mâles, comme le font les femelles n’induisent une réponse agressive chez les souris résidentes.</li>
	<li>Pour le conditionnement de la place, utilisez boîtes identiques fabriqués avec deux compartiments identiques (30,7 cm de longueur x 31,5 cm large × 34,5 cm de haut), séparés par une zone d’ombre centrale (13,8 longueur x 31,5 cm large × 34,5 élevé) plus petite. Remarque : Les compartiments doivent plancher différentes textures et couleurs de la paroi (un plancher lisse dans le compartiment noir et un sol rugueux dans le blanc). Chaque compartiment de la boîte de CPP contient quatre faisceaux de lumière infrarouges et six dans le compartiment central. Cela permet l’enregistrement des passages entre compartiments et la position de l’animal.</li>
	<li>La valeur vers le haut les lumières de la pièce (arrêt ou diminution) chaque jour. Utiliser les feux rouges (recommandés), car animaux ne perçoit pas il et il est atténué pour l’expérimentateur (environ 40 lux mesuré à 1 m au-dessus du niveau du plancher).</li>
	<li>Mettre en place le programme s’inscrire 15 min pour un conditionnement pré et post test (voir la Table des matières pour les logiciels) (Figure 2)</li>
	<li>Préparer la solution de cocaïne requise pour l’expérience entière. Dissoudre le chlorhydrate de cocaïne à 0,9 % NaCl (solution saline) dans un volume de 0,1 mL/10 g de poids corporel. Mélange de vortex et conserver à 4 ° C à la fin de la journée. NOTE : Des concentrations de cocaïne peuvent varier selon l’objectif de l’étude. Si le but est d’évaluer l’une doses de cocaïne, une concentration de 1 mg/kg peut être utilisée, qui est inefficace chez les animaux témoins, comme dans les précédentes études24,35. Si une dose efficace est le but, une concentration de 6 mg/kg peut être choisie, ce qui est efficace, mais n’induit pas de rétablissement24, ou une concentration de 25 mg/kg, ce qui est efficace et induit de rétablissement de la préférence19.</li>
	<li>Les animaux de laboratoire au cours de leur période d’obscurité et utiliser de la même boîte pour chaque animal sur jours.</li>
	<li>Apporter des animaux tous les jours à la salle d’examen dans leur maison et les laisser pendant 15 min comme une période d’accoutumance, à tous les bruits liées aux tests.</li>
</ol>2. cycle d’essai
<ol><li>Acquisition Remarque : La procédure de Place conditionnée, impartiale en termes de préférence spontanée initiale, comprend trois phases : le préconditionnement, climatisation et après le conditionnement (Figure 1).<ol>
<li>
Conditionnement préalable (Pre-C) (3 jours) (Figure 2, Figure 3, Figure 4) NOTE : Ici, la valeur neutre des compartiments dans la zone du RPC est évaluée. Mesurer le temps passé dans chaque compartiment et plus tard le comparer avec celui passé dans le même compartiment dans le test après le conditionnement.<ol>
<li>Amener les animaux à la salle d’essai et laissez-les habitués pendant 15 min.</li>
			<li>Vérifiez que les guillotines sont enlevés de la cage.</li>
			<li>Configurer l’ordinateur et le programme. Animal ID et appuyez sur la commande de « Procès » et « Start » (Figure 2).</li>
			<li>Placez la souris doucement dans la chambre intercalaire (compartiment gris) et quitter la salle d’examen avec le minimum de bruit.</li>
			<li>Ramener tous les animaux dans leur cage maison et enregistrer les données lorsque le procès est terminé.</li>
			<li>Autoriser les souris accéder aux deux compartiments de l’appareil pendant 15 minutes (900 s) par jour sur 3 jours consécutifs.</li>
			<li>Le jour 3, notez le temps passé dans chaque compartiment pendant 900 s et l’enregistrer pour l’affectation de compartiments dans la phase suivante (Figure 3).</li>
			<li>Attribuer la moitié des animaux dans chaque groupe pour recevoir le médicament ou le véhicule dans un compartiment (par exemple, noir) et l’autre moitié dans l’autre compartiment (p. ex., blanc) (Figure 4). Remarque : La distribution finale des animaux doit s’assurer que la moitié des animaux sont affectée dans le compartiment préféré au départ puis l’autre moitié au compartiment non préférés. En outre, la moitié des animaux ont reçu le médicament dans un compartiment (par exemple, l’un noir) et l’autre moitié dans l’autre (dans ce cas, l’un blanc).</li>
			<li>Solde des scores du groupe dans les deux compartiments ainsi qu’entre les groupes (différences de groupe test avec une analyse de variance (ANOVA)). Comme guide approximatif, les valeurs doivent être autour de 360-370 s lors du test de pré-C (Figure 4). Remarque : aucune différence significative devrait être détectée entre le temps passé dans les compartiments jumelés à la drogue et appariés véhicule pendant l’essai de pré-C.</li>
			<li>Exclure les animaux qui présentent une forte aversion ou la préférence pour un compartiment quelconque. Envisager l’aversion en passant moins de temps à 33 % dans le compartiment et envisager de préférence quand l’animal a passé plus de 67 % du temps total dans ce compartiment.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
(4 jours) de conditionnement (Figure 5)
		<ol>
<li>Peser les animaux et utiliser ces poids pour les doses de cocaïne au cours de la climatisation.</li>
			<li>Préparer les seringues avec cocaïne ou physiologique, basée sur le poids.</li>
			<li>Injecter une souris à la fois par voie intrapéritonéale (ip) et placez-le immédiatement doucement dans le compartiment noir ou blanc affecté de leur boîte.</li>
			<li>Après un intervalle de 4 h, injecter la dose de médicament immédiatement avant que la souris se limite au compartiment appariés drogue pendant 30 min (Figure 5).</li>
			<li>Alterner cette procédure chaque jour, commençant par la cocaïne aux jours 1 et 3 et salines les jours 2 et 4.</li>
			<li>Vérifiez que l’accouchement est effectué dans les deux cas en fermant la porte guillotine qui sépare les deux compartiments, rendant la zone centrale inaccessibles. Remarque : Dans cette phase, il n’y a pas besoin de mettre en place le programme PC.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Après le conditionnement (Post-C) (1 jour)
		<ol>
<li>Amener les animaux à la salle d’essai et laissez-les habitués pendant 15 min.</li>
			<li>Enlever la porte guillotine qui sépare les deux compartiments.</li>
			<li>Configurer l’ordinateur et le programme. Animal ID et appuyez sur la commande « start ».</li>
			<li>Enregistrer le temps passé par les souris non traitées dans chaque compartiment pendant une période d’observation s 900.</li>
			<li>Une fois le procès terminé, ramener tous les animaux dans leur cage maison et enregistrer les données.</li>
			<li>Considérer que le médicament a provoqué préférence de place si le temps passé dans le compartiment de drogue-jumelé au cours de la Post-C est significativement plus élevé que dans le test de pré-C. Si le contraire se produit, pensez à une aversion pour le milieu de la drogue-jumelé.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Extinction
	<ol>
<li>Mener une séance hebdomadaire d’extinction chez tous les groupes/animaux qui ont développé une préférence pour le compartiment associé à la drogue.</li>
		<li>Placer l’animal dans l’appareil (sans guillotines) pendant 15 min (le même que les tests préalables- et Post-C) (Figure 1). Remarque : Si la dose employée dans le RPC est élevé (25 mg/kg), effectuer 1 extinction séance / semaine. Si une dose subthreshold est utilisé (1 mg/kg), puis effectuer 2 séances d’extinction par semaine (par exemple lundi et jeudi).</li>
		<li>Envisager la préférence éteinte lorsque les données de l’essai d’extinction ne montrent pas de différences en ce qui concerne le test de pré-C, mais elles montrent des différences en ce qui concerne le test Post-C.</li>
		<li>Refaites le test 24h plus tard afin de confirmer l’extinction.</li>
	</ol></li>
	<li>Rétablissement de la RPC
	<ol>
<li>
Induite par l’amorçage de réintégration
		<ol>
<li>Évaluer les effets d’une dose d’amorçage de cocaïne 24h après que extinction a été confirmée. Remarque : Des doses d’amorçage sont moitié de la dose précédente que l’animal a reçu au cours de la climatisation. Le test de rétablissement subit le même protocole que dans le pré-C et les tests Post-C, sauf que les animaux reçoit la dose de cocaïne dans un non-contingent placer 15 min avant l’essai. L’efficacité de l’amorçage de la drogue dans l’induction de rétablissement peut être renforcée après que extinction répétée/réintégration expériences23, bien que l’ordre des doses ne semble pas jouer un rôle dans les résultats obtenus36.</li>
			<li>Amener les animaux dans une pièce différente de la salle d’examen (lieu non conditionnelle) (Figure 6).</li>
			<li>Injecter avec la moitié de la dose précédente de cocaïne (par exemple, si les animaux était conditionnées avec 25 mg/kg de cocaïne, une dose d’amorçage serait 12,5 mg/kg).</li>
			<li>Ramener à leur vivarium pour 15 min.</li>
			<li>Prenez-les dans la salle d’examen et placer les animaux dans l’appareil immédiatement (sans les portes guillotine séparant les compartiments) pendant 15 min (identique à l’avant et les tests Post-C).</li>
			<li>Considérez la différence en secondes entre le temps passé dans le compartiment de drogue-jumelé au cours de la dernière session de l’Extinction et le test de réintégration comme une mesure du degré de rétablissement de la préférence induite par la drogue.</li>
			<li>Répétez la procédure d’extinction-rétablissement chaque fois avec la diminution des doses jusqu'à ce qu’il est confirmé pour être inefficaces. Remarque : Un contrôle de l’injection saline peut être utilisé pour contrôler la capacité d’amorçage de cocaïne (et non d’injection elle-même) pour induire la réintégration.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Rétablissement d’induite par le stress
		<ol>
<li>Évaluer les effets d’un stress induit par le rétablissement 24h après que extinction a été confirmée Remarque : Les tests de rétablissement sont les mêmes que ceux effectués en Post-C (déambulation libre pendant 15 min), sauf que les animaux est testés 15 min après la défaite sociale dans un agoniste rencontre (Figure 6)</li>
			<li>Prendre les animaux dans une pièce différente de la salle de la RPC.</li>
			<li>Placez votre souris expérimentale avec un sexe adversaire agressif, assorti du même âge et du poids corporel dans la cage en plastique (Figure 6). Remarque : La rencontre agonistique se compose d’un test de 10 min dans une cage en plastique transparent neutre (23x13.5x13cm), avec un résultat de la défaite pour la souris expérimental. Pour préparer l’adversaire agressif, tout d’abord isoler les différents animaux qui correspondent en âge et du poids que les souris expérimentales pendant 3 semaines. Habituez-les à acquérir une expérience de combat et de les tester pour avoir des niveaux élevés d’un comportement territorial agressif. Pour obtenir leurs congénères agressifs, souris doivent être isolées pendant au moins 3 semaines et puis formés dans agressifs et attaquent les comportements. Animaux sont entraînés dans un environnement neutre, auxquels ils sont confrontés dans les paires. Nous les laisser mordre les fois adversaire 2 ou 3 et de les sortir de la cage, toujours se terminant la formation avant une des deux souris montre soumission, afin que l’expérience de la rencontre renforce le comportement agressif. Après avoir subi d’agression (menace et attaque le congénère agressif), souris expérimentales devraient présenter évitement/fuir et le comportement défensif/soumission. Le critère consiste à adopter une position spécifique de la défaite, caractérisée par une position verticale soumise, limp ses pattes, la tête inclinée vers le haut et rentré des oreilles (Figure 6). Selon Burke et al., 2016, nous considérons que la rencontre sociale se termine plus tôt si l’intrus affiche une posture couchée soumise pour > 8 s ou si 13 piqûres d’attaque s’est produite. Une autre option aux animaux d’écran sans risque de lésion significative pourrait être pour rythmer l’animal dans un boîtier de maille avec un trou, pas assez gros pour chaque animal de passer.  L’agression peut être décelée sans soumettre animaux pour diriger le comportement agressif.  Si un animal subit une blessure avec une plaie de 1cm de diamètre et/ou une exposition directe du muscle, il est exclu de l’étude et devrait être euthanasié.</li>
			<li>Après 10 min de rencontre agonistique, prendre les souris dans la salle d’examen et de placer les animaux dans l’appareil de PPC immédiatement (sans les portes guillotine séparant les compartiments) pendant 15 min (identique à l’avant et les tests Post-C).</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>3. analyse statistique
Remarque : La taille de l’échantillon idéal doit être un minimum de 15 animaux par groupe.
<ol><li>Analyser le temps moyen passé dans le compartiment de drogue-jumelé du groupe au moyen d’une ANOVA mixte avec un conflit entre variable, traitement, avec deux niveaux (groupe contrôle, groupe expérimental, exemple des deux groupes est en Figure 7 c) et l’autre au sein de la variable – jours, avec 2 niveaux (pré- et Post-C). Remarque : Dans le groupe témoin, animaux reçoit le médicament, mais il n’a aucune manipulations environnementales. En revanche, dans le groupe expérimental, les animaux sont exposés à des conditions environnementales différentes. Comparer le temps passé dans le compartiment de drogue-jumelé le jour Post-C avec respect le pré-C tester pour voir si il existe des différences significatives dans la sensibilité au médicament.</li>
	<li>En outre, effectuer des analyses a posteriori Bonferroni pour vérifier ou l’autre des scores importants.</li>
	<li>Analyser les données relies aux valeurs extinction et réintégration dans les groupes que développés de préférence au moyen de tests t Student´s de poursuivre la procédure d’extinction-rétablissement au cours de l’expérience, mais pour le moment final, analysez-la avec une analyse de la variance avec un intérieur variable (jours) avec le nombre de niveaux en fonction de chaque groupe. Remarque : Lorsque le nombre de comparaisons est augmenté, le nombre de ceux qui seront importantes par hasard également augmenté. Par conséquent, pour éviter d’avoir des faux positifs (erreurs de Type 1) nous « correct » la p-value, ce qui rend le test plus conservatrice avec la correction de Bonferroni pour t-tests multiples. Toutefois, pour l’essai de la réintégration, la comparaison convient entre le critère de la réintégration et la dernière extinction. Il n’y a donc pas besoin de correction.</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le point clé de la recherche sur la dépendance des médicaments est le développement de traitements qui diminuent la soif et, par conséquent, réduire la vulnérabilité à la rechute. Grâce au modèle de rétablissement du paradigme du RPC, il est possible d’étudier l’influence de différents facteurs procédurales et environnementales qui modulent la rechute, qui constitue une priorité de la recherche future. Il y a quelques points importants à considérer, comme le paradigme du RPC est un test qui est trè...

Le paradigme de la préférence de Place conditionnée (RPC) offre un moyen simple d’évaluer la récompense conditionnée induite par des stimuli divers1,2et a été utilisé largement pour étudier les effets enrichissantes conditionnés de drogues toxicomanogènes3 . Elle est basée sur le conditionnement pavlovien, évaluation de la valeur motivationnelle des signaux environnementaux associés aux drogues pour le maintien de comportements toxicomanes4. Dans ce modèle, signaux environnementaux acquièrent propriétés appétence secondaires (effets enrichissantes conditionnés) lorsqu’il est associé avec un agent renforçateur primaire3. Par exemple, un lieu initialement neutre (par exemple la couleur d’un compartiment dans la cage du RPC) est jumelé avec les effets spécifiques d’une drogue d’abus au cours de certaines conditionnement séances5, alors qu’un autre compartiment est associée à l’injection d’un véhicule. Après conditionnement, si l’animal passe plus de temps dans le compartiment précédemment associé au médicament, il est supposé que le personnel du PPC a acquis3. La mise en place de la préférence est atteinte lorsque l’animal donne une valeur positive pour les signaux environnementaux liés à la drogue, qui est l’agent renforçateur primaire. Par conséquent, animaux se produiront des réponses comportementales de recherche de la drogue en réponse à ces indices contextuels6. Le modèle CPP permet l’évaluation des propriétés enrichissantes d’une dose de la drogue, indiquant si les animaux dans une condition spécifique (par exemple, ayant subi de défaite sociale précédemment) est plus vulnérables et sensibles aux doses qui sont pas efficace pour naïve animaux7.
Le modèle CPP a aussi servi à évaluer l’extinction/réintégration comme modèle animal pour étudier la rechute3, qui est le but du présent protocole. Il y a trois phases différentes : acquisition, extinction et la réintégration (Figure 1). Dans le modèle de rétablissement du RPC, animaux d’abord obtenir le RPC pour un compartiment jumelé à la drogue, et ensuite ils exécutent plusieurs séances d’extinction. Nous définissons d’extinction comme le moment où l’animal a réduit ses réactions comportementales de rapprochement à un stimulus conditionné d’enrichissant qui a été supprimé (par exemple, le médicament)8. Pendant les sessions de l’extinction, animaux explore les compartiments en l’absence de la drogue, de sorte que la préférence acquise est progressivement atténué9. Une question importante à considérer est que le changement de comportement que l’animal présente au cours de l’extinction (la diminution progressive du temps passé dans le compartiment de drogue-jumelé) peut être due à nouveaux processus d’apprentissage qui sont en concurrence avec la réponse précédente de savante, ou due à une diminution de l’état de motivation interne du sujet3. Enfin, le rétablissement de la préférence de place à travers les repères du contexte ou de la drogue serait notre modèle de rétablissement1.
Administrer une injection d’amorçage du médicament associé peut rétablir la préférence, ce qui est considéré comme une reconstitution de l’approximation pour les indices contextuels. Rétablissement de drogue d’amorçage se produit en raison de la mémoire persistante des effets agréables de la drogue, ce qui induit la soif et motive les animaux à chercher les signaux environnementaux associés à la récompense.
Certains avantages du modèle de rétablissement du RPC sont que la procédure est non invasif (contrairement à l’administration autonome, nécessitant une intervention chirurgicale), peu coûteux et simple. En outre, ce modèle a une validité de critère bonne, car elle imite bien ce qui se passe dans les êtres humains10,11, induisant la réintégration avec stimuli qui induisent la rechute, comme re-exposition à la drogue12,13 ou souligner le14.
Il existe d’autres techniques telles que l’extinction – modèle de rétablissement de l’administration intraveineuse de self. Ici, les animaux appuyer sur un levier pour s’auto-administrer de la drogue, qui permet l’évaluation de la réponse opérante de l’animal, compulsivité et motivation14,15,16. Le principal avantage du RPC sur les procédures d’administration autonome est que rétablissement du RPC est censé refléter la réactivation de la valeur d’encouragement-motivation des stimuli contexte associé à la drogue, consistant en la réapparition de l’approche comportement au contexte17. En outre, des stimuli non médicamenteux, tels que le stress, peuvent induire également rétablissement18,19. Par exemple, une étude de l’auto-administration ne décrit aucun effet sur le rétablissement de la consommation d’héroïne chez les rats après un choc de pied ou de la retenue soulignent20. Auteurs discuté qu’il a échoué parce que les facteurs de stress ont été testés à l’extérieur de la chambre d’auto-administration dans un contexte différent. En revanche, lorsque vous utilisez le modèle CPP de remise en état, il y avait un clair restitutio in integrum RPC induite par la morphine après avoir utilisé les mêmes facteurs de stress et appliquée dans un contexte différent à celui du PPC et à des moments différents (0 et 15 min après stress exposition)18 .
Plusieurs études dans la littérature ont montré différentes façons de drogue et réintégration induite par le stress. D’une part, réintégration médicamenteuse a été signalée chez des rats et des souris morphine5,21,22,23, cocaïne24,25, amphétamine26, 27, éthanol28,29et30de la 3, 4-méthylènedioxyméthamphétamine (MDMA). En revanche, l’exposition au stress peut être un facteur déterminant dans la vulnérabilité aux abus de drogues. Stress est connu pour augmenter les effets enrichissantes de drogues7,31,32 et leur rôle dans la rechute est bien établie33,34. Par exemple, la défaite dans les interactions sociales avec un congénère rétablit la morphine et la cocaïne RPC18,19. En outre, les animaux exposés à répété défaite sociale sont plus vulnérables aux effets enrichissantes conditionnés d’une dose de cocaïne et rétablissement la préférence avec de très faibles doses de cocaïne7.
Application du modèle de rétablissement du RPC est un moyen utile et sensible pour évaluer la vulnérabilité de rechute chez les animaux et permet l’évaluation des différentes manipulations environnementales subtiles, qui sont les principaux déclencheurs qui menacent les humain rechute, tels que réintégration médicamenteuse ou stress.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>MONPRE 2Z software</td>
			<td>CIBERTEC S.A., Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.</td>
			<td>CIBERTEC S.A., Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocaine hydrochloride</td>
			<td>Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animals: mice of the OF1 outbred strain</td>
			<td>Charles River, Barcelona Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Diet- Teklad Global Diet 2014</td>
			<td>Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)</td>
			<td></td>
			<td>13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High fat diet TD.06415</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reinstatement of drug-seeking in mice using the conditioned place preference paradigm

Le présent protocole décrit la préférence de Place conditionnée (RPC) comme un modèle de rechute en toxicomanie. Dans ce modèle, animaux est formés tout d’abord d’acquérir une préférence de place conditionnée dans un compartiment jumelé à la drogue, et après l’essai après le conditionnement, ils effectuent plusieurs séances pour éteindre la préférence établie. Le CPP permet l’évaluation des effets enrichissantes conditionnés des signaux liés à l’environnement de médicaments. Puis, le RPC éteint peut être réintégré fermement par l’administration non dépendant d’une dose d’amorçage de la drogue et par l’exposition à un stimulus stressant. Les deux méthodes seront expliqués ici. Lorsque l’animal reinitiates la réponse comportementale, une réintégration de la récompense conditionnée est considéré comme ayant eu lieu.
Les principaux avantages du présent protocole sont qu’il est non invasive, peu coûteux et simple avec les critères de validité bon. En outre, il permet l’étude des différentes manipulations environnementales, tels que le stress ou l’alimentation, qui peut moduler la rechute en médicament cherchant des comportements. Toutefois, une limitation est que si le chercheur a pour but d’explorer les motivations et les effets primaires de renfort de la drogue, il devrait être complété par des procédures de gestion autonome, car elles impliquent des réponses opérante des animaux.

Tout d’abord, des résultats représentatifs de la réintégration d’amorçage induite et le stress sont illustrés Figure 7 à l’aide de souris mâles adultes de1.
Les données dans la Figure 7a-b représentant le temps passé dans le (s) à drogue appariés dans le pré et Post-C test ont été analysés avec une analyse de la variance avec un j...

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Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Ce protocole décrit la préférence de Place conditionnée (RPC) comme un modèle de rechute. Cette procédure permet de mesurer des rechutes chez les animaux de laboratoire, compte tenu de l’impact des signaux environnementaux associés aux drogues comme la soif et la rechute chez les toxicomanes abstentionnistes est actuellement la mise au point des programmes de traitement de toxicomanie.

Rétablissement de la recherche de drogue chez les souris en utilisant le paradigme de préférence de Place conditionnée

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

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The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden hand is touched. If the viewed and felt touches are given at the same time then this is sufficient to induce the compelling experience that the rubber hand is one's own hand. The RHI can be used to investigate exactly how the brain constructs distinct body representations for one's own body. Such representations are crucial for successful interactions with the external world. To obtain a subjective measure of the RHI, researchers typically ask participants to rate statements such as "I felt as if the rubber hand were my hand". Here we demonstrate how the crossmodal congruency task can be used to obtain an objective behavioral measure within this paradigm.
The variant of the crossmodal congruency task we employ involves the presentation of tactile targets and visual distractors. Targets and distractors are spatially congruent (i.e. same finger) on some trials and incongruent (i.e. different finger) on others. The difference in performance between incongruent and congruent trials - the crossmodal congruency effect (CCE) - indexes multisensory interactions. Importantly, the CCE is modulated both by viewing a hand as well as the synchrony of viewed and felt touch which are both crucial factors for the RHI.
The use of the crossmodal congruency task within the RHI paradigm has several advantages. It is a simple behavioral measure which can be repeated many times and which can be obtained during the illusion while participants view the artificial hand. Furthermore, this measure is not susceptible to observer and experimenter biases. The combination of the RHI paradigm with the crossmodal congruency task allows in particular for the investigation of multisensory processes which are critical for modulations of body representations as in the RHI.

We demonstrate how an objective measure can be employed in the widely employed rubber hand illusion paradigm. This measure is obtained by modifying the well-established crossmodal congruency task. This task allows the investigation of multisensory processes which are critical for modulations of body representations as in the rubber hand illusion.

Le groupe de congruence intermodale comme un moyen d&#39;obtenir une mesure comportementale objectif dans le caoutchouc main Illusion Paradigm

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Recherche

Sciences du comportement

Stereotaxic Microinjection of Viral Vectors Expressing Cre Recombinase to Study the Role of Target Genes in Cocaine Conditioned Place Preference

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes of interest allows for enhanced temporally- and regionally-specific control of gene deletion, compared to existing methods. While conditional deletion can also be achieved by mating mice that express Cre recombinase under the control of specific gene promoters with mice carrying a floxed gene, stereotaxic microinjection allows for targeting of discrete brain areas at experimenter-determined time points of interest. In the context of cocaine conditioned place preference, and other cocaine behavioral paradigms such as self-administration or psychomotor sensitization that can involve withdrawal, extinction and/or reinstatement phases, this technique is particularly useful in exploring the unique contribution of target genes to these distinct phases of behavioral models of cocaine-induced plasticity. Specifically, this technique allows for selective ablation of target genes during discrete phases of a behavior to test their contribution to the behavior across time. Ultimately, this understanding allows for more targeted therapeutics that are best able to address the most potent risk factors that present themselves during each phase of addictive behavior.

This article describes how to microinject viral vectors into mouse brain and then test in a conditioned place preference paradigm that includes an acquisition, extinction and reinstatement phase.

La micro-injection stéréotaxique de vecteurs viraux exprimant la recombinase Cre pour étudier le rôle des gènes cibles de cocaïne préférence de place conditionnée

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes ...

Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to drugs of abuse make lasting alterations in the brain function of vulnerable individuals, and these persistent alterations likely serve to maintain the maladaptive drug seeking and taking behaviors characteristic of addiction/dependence2. In rodents, reward experience and contextual associations are frequently measured using the conditioned place preference assay, or CPP, wherein preference for a previously drug-paired context is measured. Behavioral sensitization, on the other hand, is an increase in a drug-induced behavior that develops progressively over repeated exposures. Since sensitized behaviors can often be measured after several months of drug abstinence, depending on the dose and length of initial exposure, they are considered observable correlates of lasting drug-induced plasticity. Researchers have found these assays useful in determining the neurobiological substrates mediating aspects of addiction as well as assessing the potential of different interventions in disrupting these behaviors. This manuscript describes basic, effective protocols for mouse CPP and locomotor behavioral sensitization to cocaine.

This protocol is intended to enable researchers to conduct experiments designed to test these aspects of addiction using the conditioned place preference and locomotor behavioral sensitization assays.

Évaluation de la sensibilisation comportementale induite par la cocaïne et de préférence de place conditionnée chez la souris

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for examining how rats learn to use a place- or response-learning to successfully navigate in an open-field arena. Additionally, this protocol describes how the OFTM differs from other behavioral maze paradigms that are commonly used to study spatial learning in rodents. The OFTM described in this article was adapted from the one previously described by Cole, Clipperton, and Walt (2007). Specifically, the OFTM was created to test spatial learning in rodents without the experimenter having to consider how &#8220;stress&#8221; might play a role as a confounding variable. Experiments have shown that stress-alone can significantly affect cognitive function1. The representative results section contains data from an experiment that used the OFTM to examine the effects of estradiol treatment on place- and response-learning in adult female Sprague Dawley rats2. Future studies will be designed to examine the role of the hippocampus and striatum in place- and response-learning in the OFTM.

The Open-field Tower Maze (OFTM) is a maze created to study the behavioral and neural mechanisms of spatial learning (e.g., place- or response-learning) in rats. This maze is especially useful for experimenters who want to use a non-stressful maze paradigm to investigate spatial learning in their research.

Placez et l&#39;apprentissage de réponse à l&#39;Open-champ Tour Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

Examen Rappel Mémoire du nourrisson et de la petite enfance Utilisation du élicitées Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

Using Eye Movements Recorded in the Visual World Paradigm to Explore the Online Processing of Spoken Language

In a typical eye tracking study using the visual world paradigm, participants' eye movements to objects or pictures in the visual workspace are recorded via an eye tracker as the participant produces or comprehends a spoken language describing the concurrent visual world. This paradigm has high versatility, as it can be used in a wide range of populations, including those who cannot read and/or who cannot overtly give their behavioral responses, such as preliterate children, elderly adults, and patients. More importantly, the paradigm is extremely sensitive to fine grained manipulations of the speech signal, and it can be used to study the online processing of most topics in language comprehension at multiple levels, such as the fine grained acoustic phonetic features, the properties of words, and the linguistic structures. The protocol described in this article illustrates how a typical visual world eye tracking study is conducted, with an example showing how the online processing of some semantically complex statements can be explored with the visual world paradigm.

The visual world paradigm monitors participants' eye movements in the visual workspace as they are listening to or speaking a spoken language. This paradigm can be used to investigate the online processing of a wide range of psycholinguistic questions, including semantically complex statements, such as disjunctive statements.

À l’aide de mouvements oculaires enregistrées dans le paradigme de l’univers visuel d’explorer le traitement en ligne de la langue parlée

In a typical eye tracking study using the visual world paradigm, participants' eye movements to objects or pictures in the visual workspace are recorded ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Un protocole de préférence de Place conditionnée pour la mesure de l’Incubation des envies chez les Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

Using the Visual World Paradigm to Study Sentence Comprehension in Mandarin-Speaking Children with Autism

Sentence comprehension relies on the ability to rapidly integrate different types of linguistic and non-linguistic information. However, there is currently a paucity of research exploring how preschool children with autism understand sentences using different types of cues. The mechanisms underlying sentence comprehension remains largely unclear. The present study presents a protocol to examine the sentence comprehension abilities of preschool children with autism. More specifically, a visual world paradigm of eye-tracking is used to explore the moment-to-moment sentence comprehension in the children. The paradigm has multiple advantages. First, it is sensitive to the time course of sentence comprehension and thus can provide rich information about how sentence comprehension unfolds over time. Second, it requires minimal task and communication demands, so it is ideal for testing children with autism. To further minimize the computational burden of children, the present study measures eye movements that arise as automatic responses to linguistic input rather than measuring eye movements that accompany conscious responses to spoken instructions.

We present a protocol to examine the use of morphological cues during real-time sentence comprehension by children with autism.

En utilisant le paradigme de l’univers visuel d’étudier la compréhension de la phrase en langue mandarine enfants atteints d’autisme

Sentence comprehension relies on the ability to rapidly integrate different types of linguistic and non-linguistic information. However, there is ...

Exploring Infant Sensitivity to Visual Language using Eye Tracking and the Preferential Looking Paradigm

We discuss the use of the preferential looking paradigm in eye tracking studies in order to study how infants develop, understand, and attend to the world around them. Eye tracking is a safe and non-invasive way to collect gaze data from infants, and the preferential looking paradigm is simple to design and only requires the infant to be attending to the screen. By simultaneously showing two visual stimuli that differ in one dimension, we can assess whether infants show different looking behavior for either stimulus, thus demonstrating sensitivity to that difference. The challenges in such experimental approaches are that experiments must be kept brief (no more than 10 min) and be carefully controlled such that the two stimuli differ in only one way. The interpretation of null results must also be carefully considered. In this paper, we illustrate a successful example of an infant eye tracking study with a preferential looking paradigm to discover that 6-month-olds are sensitive to linguistic cues in a signed language despite having no prior exposure to signed language, suggesting that infants possess intrinsic or innate sensitivities to these cues.

Eye tracking studies using a preferential looking paradigm can be used to study infants&#39;&#160;emerging understanding of, and attention to, their external visual world.

Explorer la sensibilité des nourrissons au langage visuel à l'aide du suivi des yeux et du paradigme de la recherche préférentielle

We discuss the use of the preferential looking paradigm in eye tracking studies in order to study how infants develop, understand, and attend to the world ...

A System for Tracking the Dynamics of Social Preference Behavior in Small Rodents

Exploring the neurobiological mechanisms of social behavior requires behavioral tests that can be applied to animal models in an unbiased and observer-independent manner. Since the beginning of the millennium, the three-chamber test has been widely used as a standard paradigm to evaluate sociability (social preference) and social novelty preference in small rodents. However, this test suffers from multiple limitations, including its dependence on spatial navigation and negligence of behavioral dynamics. Presented and validated here is a novel experimental system that offers an alternative to the three-chamber test, while also solving some of its caveats. The system requires a simple and affordable experimental apparatus and publicly available open-source analysis system, which automatically measures and analyzes multiple behavioral parameters at individual and population levels. It allows detailed analysis of the behavioral dynamics of small rodents during any social discrimination test. We demonstrate the efficiency of the system in analyzing the dynamics of social behavior during the social preference and social novelty preference tests as performed by adult male mice and rats. Moreover, we validate the ability of the system to reveal modified dynamics of social behavior in rodents following manipulations such as whisker trimming. Thus, the system allows for rigorous investigation of social behavior and dynamics in small rodent models and supports more accurate comparisons between strains, conditions, and treatments.

Described here is a novel automated experimental system that offers an alternative to the three-chamber test and also solves several caveats. This system supplies multiple behavioral parameters that enable rigorous analysis of small rodent behavioral dynamics during the social preference and social novelty preference tests.