Les méthodes traditionnelles de transfert manuel des réaccentrages en vrac dans les plaques de microtiter sont lentes et sujettes à l’erreur humaine. Cette technologie double plus que l’efficacité du processus et aide à éliminer cette erreur. Cette technique peut aider les utilisateurs à comprendre les opérations effectuées en microplaques, réduire les risques d’erreurs et accroître l’efficacité de l’utilisateur lors des opérations manuelles de pipetage.
Cette technique aura un impact positif sur les résultats en milieu précliniques et cliniques en éliminant et en réduisant les erreurs qui peuvent être coûteuses et même mortelles si elles ne sont pas corrigées. Ce système open source peut être facilement adapté à d’autres applications, telles que les inspections de copie microplaquée, afin d’éliminer les incohérences dans le placement composé ou bioassay, pour la chimie et les besoins biologiques. Lina Deluca, gestionnaire des composés du laboratoire d’identification des plombs, démontrera la procédure de transfert de l’échantillon.
Pour configurer un transfert d’échantillon semi-automatisé de plaque à plaque, utilisez une application d’édition de feuille de calcul pour générer un fichier CSV contenant des plaques de source et de destination, étiquetant le code à barres source des colonnes, le code à barres de destination, la source bien, la destination et le volume de transfert. Sous les colonnes, inclure une rangée dans le fichier pour chaque opération de pipetage souhaitée indiquant le code à barres alpha-numérique du mircoplate source, s’il y en a une, le code à barres alpha-numérique de la microplaque de destination, s’il y en a un, la ligne alpha-numérique et l’identificateur de colonne pour le puits à pipetted à partir de la plaque source, la ligne alpha-numérique et l’identificateur de colonne pour le puits à pipetted de la plaque de destination , et le volume à transférer de la source bien dans la colonne de code à barres source, à la destination bien dans le code à barres de destination. Ouvrez le programme Light Guide pour ouvrir l’application d’interface utilisateur graphique de l’émetteur de lumière émetteur de lumière microplaquée et cliquez sur Sélectionnez cherrypick file.
Dans la fenêtre du navigateur de fichiers, ouvrez le fichier CSV. L’application parse la première rangée du fichier CSV et illumine les puits correspondants dans les plaques source et destination. Utilisez le puits précédent"et les boutons Next well"pour parcourir le fichier CSV comme vous le souhaitez.
L’interface utilisateur graphique mettra en évidence en gris toutes les lignes qui ont été précédemment éclairées et mettra en évidence, en brun, les lignes actuellement actives. Effectuer les opérations de pipetage au besoin pour transférer des échantillons entre le puits source de la plaque source et le puits de destination de la plaque de destination. En plus de l’interface utilisateur, les codes à barres de plaque peuvent être vérifiés via les écrans LCD attachés aux panneaux d’éclairage.
Ensuite, cliquez sur Suivant bien"pour continuer jusqu’à la fin du fichier CSV est atteint. Pour charger un nouveau fichier CSV, cliquez sur Sélectionnez cherrypick file » à tout moment. Pour quitter le programme, cliquez sur le X rouge"en haut à droite de l’interface.
Pour les éclairages multi-puits, ouvrez l’application de delution en série de l’émetteur de lumière d’émetteur de tuyaux d’assistance microplaqué et spécifiez le mode de titration désiré, la densité des plaques et les rangées ou colonnes de démarrage. Utilisez les boutons Suivant et Précédent pour naviguer à travers les lignes ou les colonnes dans l’ordre de la ligne de départ initiale ou de la colonne, à la dernière rangée ou colonne de la plaque. Chaque fois que le bouton Suivant ou Précédent est cliqué, le panneau lumineux illuminera les LED correspondantes sur la microplaque.
Continuez jusqu’à la fin de la séquence de titration est atteint avant de quitter le programme. Pour simuler visuellement un essai, placez une microplaque dans le guide de lumière portatif. Le guide lumineux contient une batterie et toute l’électronique nécessaire pour être utilisé indépendamment d’un ordinateur pour permettre au guide d’être utilisé dans un mode portatif qui peut être contrôlé avec des boutons poussoirs intégrés pour basculer entre les modes de démonstration.
Utilisez l’interrupteur de basculement d’alimentation sur l’enceinte de guide de lumière portatif pour alimenter le système et sélectionnez le mode de guide de lumière portatif approprié pour l’expérience. Dans le mode démo de criblage à haut débit, utilisez l’interrupteur à bouton poussoir droit en haut du guide de lumière portatif pour basculer à travers les modèles d’éclairage de l’échantillon. Les puits illuminés de couleur rouge simulent la distribution de réaccente d’un essai, par exemple, les cellules suspendues dans les médias.
Les puits éclairés avec la couleur jaune simulent l’ajout de reagent de détection. Ensuite, une source de lumière d’excitation est simulée avec tous les puits tournant en bleu, suivie de la simulation de la lumière émise. La première et la dernière colonne de puits sont éclairées en vert, et les colonnes de champ de l’échantillon moyen sont éclairées en bleu pour indiquer la plaque lue sur un lecteur de microplaque.
Les puits aléatoires dans le champ d’échantillon auront également la couleur verte de l’intensité variable pour représenter des coups. Pour basculer le guide lumineux entre le mode démo de criblage à haut débit et le mode démo de titration, appuyez sur le commutateur bouton poussoir gauche. Lorsque le guide lumineux entre en mode démo de titration, tous les puits dans les colonnes 3 et 13 seront éclairés avec la couleur jaune.
Appuyer sur le commutateur push-button le plus à droite illuminera les colonnes suivantes dans l’ordre. Lorsque le bouton poussoir est appuyé après que les colonnes 12 et 22 sont atteintes, les puits dans les colonnes quatre à 12 et 13 à 22 seront éclairés dans une intensité décroissante de jaune pour représenter la titration. Pour l’éclairage de l’artefact, placez la microplaque dans le guide de lumière portatif et appuyez deux fois sur le bouton poussoir le plus à gauche pour passer du guide lumineux au mode éclairage.
Utilisez le bouton poussoir droit pour basculer entre un ensemble de couleurs prédéfinis au besoin pour l’application. Le panneau lumineux activera toutes les LED en rouge, bleu, vert, orange, blanc, violet, jaune et indigo dans l’ordre à chaque pression du bouton droit. En option, un appareil photo ou un téléphone intelligent peut être utilisé pour photographier la plaque illuminée pour la tenue de dossiers ou la documentation de l’œuvre.
Le transfert d’échantillons entre les plaques et la préparation d’une dilution en série peuvent être réalisés sans se préoccuper de distraction ou de perdre la trace de ce qui reste des opérations de pipetage. La plate-forme MAPLE peut être utilisée pour aider à éclairer la microplaque afin d’identifier les artefacts potentiels, tels que les puits précipités, vides, les puits partiellement remplis ou les bulles d’air. Les utilisateurs peuvent alors prendre des mesures pour améliorer les échantillons avant de les fournir aux processus de laboratoire en aval.
Dans cette expérience représentative, la liste de travail se composait de 49 opérations de pipetage à partir de deux microplaques de source de 384 puits contenant un assortiment aléatoire de colorants colorés qui épelent Jove dans une seule microplaque de destination de 384 puits. L’aménagement des puits dans la plaque de destination confirme que l’utilisateur s’est enrôlé dans les puits corrects. Le motif de couleur des puits dans la plaque de destination peut être utilisé pour identifier les erreurs pour lesquelles l’utilisateur n’a pas pipet à partir du puits correct des plaques sources.
Les résultats de ce test en tête-à-tête montrent un gain de temps moyen de 50 % lorsque les utilisateurs ont effectué ce test à l’aide de MAPLE par rapport à une liste de travail imprimée hors ligne. De plus, le taux d’erreur des plaques créées à l’aide de MAPLE était de 0 % pour tous les utilisateurs, tandis qu’un taux d’erreur de 6 % a été observé pour un utilisateur novice à l’aide d’une liste de travail pour la tâche de préparation de l’échantillon. Les formulations de synergie médicamenteuse nécessitent une préparation matricielle 2D basée sur une dilution en série par colonne pour le premier médicament et une dilution en série par rangée pour le deuxième médicament.
Nous étudions l’utilisation de panneaux lumineux LED pour éclairer la distribution de microdroplet. En caressant la lumière LED, nous pouvons capturer des images d’échantillons liquides pour le contrôle de la qualité et l’analyse. Cet instrument peut réduire l’exposition d’un utilisateur aux matières et agents dangereux en limitant son temps d’interaction et en facilitant l’utilisation appropriée des réaccentieux.
