Le modèle chirurgical de ligature permanente de l’artère gauche chez la souris peut être utilisé pour étudier la physiopathologie et la réponse inflammatoire associée après un infarctus du myocarde. Cette méthode fournit un modèle murin fiable et productible de MI, qui est facile, sûr et moins invasif. Pour commencer, préchauffez un stérilisateur à billes à 250 degrés Celsius et placez-y des instruments chirurgicaux autoclavés pendant quelques minutes.
Assurez-vous de la profondeur de l’anesthésie chez la souris en vérifiant la réponse à un pincement ferme des orteils. Pesez la souris pour estimer la posologie de l’analgésique préopératoire buprénorphine et injectez le médicament par voie intrapéritonéale. Coupez la fourrure sur le côté gauche du thorax à l’aide d’un rasoir électrique.
Après avoir désinfecté le site chirurgical, placez la souris en décubitus dorsal sur une planche inclinée. Fixez la tête et les membres de la souris à l’aide d’une bande élastique fixée respectivement aux incisives supérieures et au ruban adhésif. Appliquez un lubrifiant ophtalmique stérile sur les yeux pour prévenir la sécheresse sous anesthésie.
Ouvrez la mâchoire et retirez doucement la langue de la cavité buccale. Identifier l’ouverture du larynx en éclairant le pharynx buccal à l’aide d’un laryngoscope. Coupez environ 0,5 centimètre d’une aiguille de cathéter de calibre 24 et insérez l’aiguille émoussée dans le bouclier en plastique.
Dirigez l’aiguille émoussée avec le bouclier en plastique dans la trachée. Sortez l’aiguille, en laissant le bouclier en plastique dans la trachée. Réglez le ventilateur à une fréquence respiratoire de 137 battements par minute, optimisée pour les souris utilisées dans cette étude et le volume courant de 0,18 capacité de fermeture.
Connectez les tubes du respirateur au bouclier du cathéter et confirmez l’intubation correcte en recherchant un mouvement thoracique synchronisé avec le ventilateur. Débranchez le tube respiratoire de l’écran du cathéter et placez l’animal en décubitus dorsal sur une carte chirurgicale préchauffée à température contrôlée. Reconnectez la souris au ventilateur.
Après avoir désinfecté le site chirurgical, soulevez doucement la peau à l’aide d’une paire de forceps et faites une petite incision transversale cutanée le long de la ligne entre les muscles pectoraux majeurs et mineurs gauches à l’aide d’une paire de ciseaux chirurgicaux. Séparez les muscles pectoraux sous-jacents avec des pinces et des ciseaux à dissectionner. Après avoir pratiqué une incision dans le troisième espace intercostal, écartez doucement les côtes à l’aide de rétracteurs pour exposer le ventricule gauche.
Déplacez la graisse péricardique de côté et localisez l’artère coronaire gauche, qui va du bord de l’oreillette gauche vers l’apex du cœur. Passer un 8-0 suture en nylon sous l’artère coronaire gauche à l’aide d’un porte-aiguille. Legate l’artère coronaire gauche avec un double nœud suivi d’un deuxième nœud.
Retirez les rétracteurs et insérez une aiguille de cathéter de calibre 22 dans la cavité thoracique. Retirez l’aiguille en laissant l’extrémité du bouclier en plastique dans la cavité thoracique. Fermez la cage thoracique à l’aide d’une suture en nylon 4-0.
Branchez une seringue au bouclier en plastique de calibre 22 et retirez lentement l’excès d’air emprisonné dans la cavité thoracique en appuyant doucement sur la poitrine pour établir une pression d’air négative. Retirez le bouclier en plastique. Coupez l’alimentation en isoflurane et placez la souris sur le ventilateur fournissant de l’oxygène.
Une respiration spontanée de la souris commence, éteignez le ventilateur. Gardez la souris sous une lampe chauffante et surveillez jusqu’à ce qu’elle soit réveillée. L’animal ne doit pas être laissé sans surveillance jusqu’à ce qu’il ait recouvré suffisamment de conscience pour maintenir une position couchée sternale.
Surveillez la souris quotidiennement pour tout signe de douleur ou d’inconfort. Poursuivre l’injection intrapéritonéale de buprénorphine toutes les 6 à 8 heures pendant deux jours supplémentaires après la chirurgie. L’ECG actif et les signaux respiratoires ont été vérifiés avant d’acquérir les données échocardiographiques.
La mesure échocardiographique des paramètres fonctionnels cardiaques a été notée 28 jours après la ligature de l’artère coronaire gauche. Les images en mode M de la vue péronière à axe court des cœurs SHAM et MI ont été observées. Les images de l’IM ont montré un mouvement défectueux de la paroi cardiaque après une ligature de l’artère coronaire gauche.
Des indicateurs d’insuffisance cardiaque, tels qu’une augmentation de la masse ventriculaire gauche, une diminution de la fraction d’éjection et une diminution du débit cardiaque, ont été observés dans le groupe MI par rapport au groupe SHAM. La coloration trichrome de Masson des sections inférieure, moyenne et supérieure du ventricule a montré une coloration accrue du collagène dans le cœur infarctus, indiquant une fibrose augmentée. Dans la plupart des cas, l’artère n’est pas réalisable.
Cependant, la ligature du tissu myocardique de 2 à 4 millimètres sous le bord de l’oreillette gauche entraîne une ligature efficace de l’artère.
