마우스에서 좌동맥의 영구 결찰 수술 모델은 심근 경색 후 병태생리학 및 관련 염증 반응을 조사하는 데 사용할 수 있습니다. 이 방법은 쉽고 안전하며 덜 침습적인 MI의 신뢰할 수 있고 생산 가능한 마우스 모델을 제공합니다. 시작하려면 비드 살균기를 섭씨 250도로 예열하고 오토클레이브 수술 기구를 몇 분 동안 넣습니다.
단단한 발가락 꼬집음에 대한 반응을 확인하여 마우스의 마취 깊이를 확인하십시오. 마우스의 체중을 측정하여 수술 전 진통제인 부프레노르핀의 용량을 추정하고 약물을 복강 주사합니다. 전기 면도기를 사용하여 흉부 왼쪽의 털을 다듬습니다.
수술 부위를 소독 한 후 마우스를 경사 보드에 앙와위 자세로 놓습니다. 마우스의 머리와 팔다리를 각각 상악절치에 부착된 탄성 밴드와 접착 테이프를 사용하여 고정합니다. 마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 멸균 안과 윤활제를 눈에 바르십시오.
턱을 열고 혀를 구강 밖으로 부드럽게 잡아 당깁니다. 후두경을 사용하여 구강 인두를 조명하여 후두의 입구를 확인하십시오. 24 게이지 카테터 바늘에서 약 0.5cm를 잘라내어 뭉툭한 바늘을 플라스틱 실드에 삽입합니다.
플라스틱 실드가 있는 뭉툭한 바늘을 기관 안으로 향하게 합니다. 바늘을 꺼내 플라스틱 방패를 기관에 남겨 둡니다. 인공호흡기를 분당 137회씩 호흡수로 설정하고, 본 연구에 사용된 마우스와 일회 호흡량 0.18 폐쇄 용량에 최적화하였다.
호흡기 튜브를 카테터 실드에 연결하고 인공호흡기와 동기화된 흉부 움직임을 찾아 올바른 삽관을 확인합니다. 카테터 실드에서 호흡기 튜브를 분리하고 예열된 온도 조절 수술판에 동물을 앙와위 자세로 놓습니다. 마우스를 인공호흡기에 다시 연결합니다.
수술 부위를 소독 한 후 한 쌍의 집게를 사용하여 피부를 부드럽게 들어 올리고 한 쌍의 수술 용 가위를 사용하여 왼쪽 가슴 대근육과 소근육 사이의 선을 따라 작은 피부 횡 절개를합니다. 집게와 해부 가위로 밑에있는 가슴 근육을 분리하십시오. 세 번째 늑간 공간을 절개 한 후 견인기를 사용하여 갈비뼈를 부드럽게 펴서 좌심실을 노출시킵니다.
심낭 지방을 옆으로 옮기고 좌심방 가장자리에서 심장 정점으로 이어지는 좌측 관상 동맥을 찾습니다. 8-0 통과 바늘 홀더의 도움으로 왼쪽 관상 동맥 아래의 나일론 봉합사. 왼쪽 관상 동맥을 이중 매듭으로 묶고 두 번째 매듭을 짓습니다.
견인기를 제거하고 22게이지 카테터 바늘을 흉강에 삽입합니다. 플라스틱 방패의 끝을 흉강에 남겨두고 바늘을 제거하십시오. 4-0 나일론 봉합사를 사용하여 흉곽을 닫습니다.
주사기를 22 게이지 플라스틱 실드에 연결하고 흉부를 부드럽게 눌러 음의 기압을 설정하여 흉강에 갇힌 과도한 공기를 천천히 제거합니다. 플라스틱 실드를 제거합니다. 이소플루란 공급 장치를 끄고 산소 공급 인공호흡기에 마우스를 놓습니다.
마우스의 자발적인 호흡이 시작되면 인공 호흡기가 꺼집니다. 마우스를 열 램프 아래에 두고 깨어날 때까지 모니터링합니다. 동물은 흉골 누운 자세를 유지하기에 충분한 의식을 회복 할 때까지 방치해서는 안됩니다.
통증이나 불편함의 징후가 있는지 매일 마우스를 모니터링하십시오. 수술 후 추가 2일 동안 6-8시간마다 부프레노르핀을 복강내 주사합니다. 활성 ECG 및 호흡 신호는 심초음파 데이터를 수집하기 전에 확인되었습니다.
심장 기능 매개변수의 심초음파 측정은 좌관상동맥 결찰술 후 28일에 기록되었습니다. SHAM 및 MI 심장의 비골 단축 뷰의 M-모드 이미지가 관찰되었습니다. MI 이미지는 왼쪽 관상 동맥 결찰 후 결함있는 심장 벽 움직임을 보여주었습니다.
좌심실 질량 증가, 박출률 감소 및 심박출량 감소와 같은 심부전의 지표가 SHAM 그룹과 비교하여 MI 그룹에서 관찰되었습니다. 하부, 중심실 및 상부 심실 절편의 Masson의 삼색 염색은 경색된 심장에서 증가된 콜라겐 염색을 보여주었고, 이는 섬유증이 증가했음을 나타냅니다. 대부분의 경우 동맥은 실현 가능하지 않습니다.
그러나, 좌심방의 가장자리 아래 2 내지 4 밀리미터의 심근 조직을 결찰하는 것은 동맥의 효율적인 결찰을 초래한다.
