Хирургическая модель постоянной перевязки левой артерии у мышей может быть использована для исследования патофизиологии и связанной с ней воспалительной реакции после инфаркта миокарда. Этот метод обеспечивает надежную и воспроизводимую модель инфаркта миокарда мыши, которая проста, безопасна и менее инвазивна. Для начала разогрейте стерилизатор шариков до 250 градусов Цельсия и поместите в него автоклавные хирургические инструменты на несколько минут.
Обеспечьте глубину анестезии в мыши, проверив реакцию на твердое защемление пальца ноги. Взвесьте мышь, чтобы оценить дозировку предоперационного обезболивающего препарата бупренорфина и ввести препарат внутрибрюшинно. Подстригите шерсть с левой стороны грудной клетки с помощью электрической бритвы.
После дезинфекции места операции поместите мышь в положение лежа на спине на наклонной доске. Закрепите голову и конечности мыши с помощью резинки, прикрепленной к верхним резцам, и клейкой ленты соответственно. Нанесите стерильную офтальмологическую смазку на глаза, чтобы предотвратить сухость под наркозом.
Откройте челюсть и осторожно вытащите язык из ротовой полости. Определить отверстие гортани можно, осветив ротовую глотку с помощью ларингоскопа. Отрежьте около 0,5 сантиметра от иглы катетера 24 калибра и вставьте тупую иглу в пластиковый щиток.
Направьте тупую иглу с пластиковым щитком в трахею. Выньте иглу, оставив пластиковый щиток в трахее. Установите аппарат искусственной вентиляции легких на частоту дыхания 137 ударов в минуту, оптимизированную для мышей, используемых в этом исследовании, и дыхательный объем 0,18 закрывающей емкости.
Подсоедините респираторные трубки к экрану катетера и подтвердите правильность интубации, посмотрев на синхронизированное движение грудной клетки с аппаратом искусственной вентиляции легких. Отсоедините трубку респиратора от щитка катетера и поместите животное в положение лежа на спине на предварительно нагретую хирургическую плату с контролируемой температурой. Снова подключите мышь к аппарату искусственной вентиляции легких.
После дезинфекции места операции аккуратно поднимите кожу с помощью щипцов и сделайте небольшой кожный поперечный разрез по линии между большой и малой грудными мышцами с помощью хирургических ножниц. Отделите нижележащие грудные мышцы щипцами и рассекающими ножницами. Сделав разрез в третьем межреберье, аккуратно растяните ребра в стороны, используя ретракторы, чтобы обнажить левый желудочек.
Отодвиньте перикардиальный жир в сторону и найдите левую коронарную артерию, которая проходит от края левого предсердия к вершине сердца. Пас 8-0 Нейлоновый шов под левой коронарной артерией с помощью иглодержателя. Легат левую коронарную артерию двойным узлом с последующим вторым узлом.
Извлеките ретракторы и вставьте иглу катетера 22 калибра в грудную полость. Извлеките иглу, оставив кончик пластикового щитка в грудной полости. Закройте грудную клетку нейлоновым швом 4-0.
Подсоедините шприц к пластиковому экрану 22 калибра и медленно удалите лишний воздух, попавший в грудную полость, осторожно нажимая на грудную клетку, чтобы установить отрицательное давление воздуха. Снимите пластиковый щиток. Отключите подачу изофлурана и поместите мышь на аппарат искусственной вентиляции легких, подающий кислород.
Одним самопроизвольным вдохом мыши начинается, выключается аппарат искусственной вентиляции легких. Держите мышь под нагревательной лампой и следите за ней, пока она не проснется. Животное не следует оставлять без присмотра до тех пор, пока оно не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения на грудине.
Ежедневно следите за мышью на наличие любых признаков боли или дискомфорта. Продолжайте внутрибрюшинную инъекцию бупренорфина каждые 6-8 часов в течение дополнительных двух дней после операции. Активные сигналы ЭКГ и дыхания были верифицированы перед получением эхокардиографических данных.
Эхокардиографическое измерение функциональных показателей сердца отмечено через 28 дней после перевязки левой коронарной артерии. Наблюдались изображения в М-режиме малоберцовой короткой оси сердец SHAM и MI. Изображения ИМ показали дефектное движение стенки сердца после перевязки левой коронарной артерии.
Показатели сердечной недостаточности, такие как увеличение массы левого желудочка, снижение фракции выброса и снижение сердечного выброса, наблюдались в группе ИМ по сравнению с группой SHAM. Трихромное окрашивание Массона нижнего, среднего и верхнего желудочков показало повышенное окрашивание коллагена в инфарктном сердце, что указывает на усиленный фиброз. В большинстве случаев артерия неосуществима.
Однако перевязка ткани миокарда на 2-4 миллиметра ниже края левого предсердия приводит к эффективной перевязке артерии.
