Notre technique dynamique de collecte continue de sang à partir d’un cœur de rat est très importante pour analyser les composants sanguins, contribuant ainsi à la compréhension des maladies cardiovasculaires et de leurs maladies connexes. Par rapport aux méthodes d’échantillonnage traditionnelles, cette technique présente les avantages d’être in vivo, en temps réel, dynamique et non invasive, sans micromolécules biologiques et sans prétraitement d’échantillon de titre pour un test étranger. Cette technique n’est pas seulement applicable aux maladies cardiovasculaires, mais devrait également fonctionner pour le diagnostic et le traitement des maladies en détectant les biomarqueurs sanguins combinés à la chromatographie liquide en phase élevée et à la spectrométrie de masse.
Cette méthode peut être utilisée pour étudier les maladies cardiovasculaires telles que l’infarctus du myocarde, l’apnée et l’athérosclérose. En outre, il s’applique également à l’œdème pulmonaire cardiogénique et à l’embolie pulmonaire et cérébrale. Après avoir effectué la préparation expérimentale, fixez l’entrée de la sonde de l’unité de dialyse avec l’aiguille de la seringue, l’adaptateur de tubulure et la tubulure FEP.
Vérifiez la perméabilité du système de tuyauterie de microdialyse en perfusant une solution anticoagulante de citrate de dextrose dans le système de tuyauterie. Faites une incision pour exposer la veine jugulaire droite par dissection contondante des tissus mous et du fascia périvasculaire. À l’aide d’une suture chirurgicale 4-0, faites un nœud glissant détachable dans la veine jugulaire droite à l’extrémité distale du cœur pour bloquer temporairement le flux sanguin.
Ensuite, faites une incision dans la veine jugulaire droite près du cœur. Insérez un stylet de cathéter en forme d’aiguille dans la veine jugulaire droite vers l’extrémité proximale du cœur du rat. Insérez la sonde de microdialyse sanguine dans un cathéter et implantez la sonde avec une pince ophtalmique le long de l’incision oblique du stylet du cathéter.
Retirez le stylet du cathéter guidé et immergez complètement la membrane semi-perméable de la sonde dans la veine jugulaire droite. Démêlez le nœud glissant détachable à l’extrémité distale du cœur pour rétablir le flux sanguin dans la veine jugulaire droite. Ensuite, utilisez des sutures chirurgicales 4-0 pour ligaturer la sonde avec la veine jugulaire droite.
Placez le rat éveillé dans un réservoir en mouvement libre et connectez la sonde au système de microdialyse. Ensuite, irriguer la solution anticoagulante de citrate de dextrose à raison de deux microlitres par minute pendant une heure pour équilibrer la membrane de dialyse de la sonde. Prélever des échantillons de sang de microdialyse et les conserver temporairement dans un contenant fractionné de quatre degrés Celsius.
Pour reconfirmer que la sonde est dans la veine jugulaire droite, disséquez le rat. Retirez la sonde de microdialyse de la veine jugulaire droite et mettez-la dans de l’eau ultrapure. Connectez la sonde au pipeline et rincez pendant la nuit à l’eau ultrapure pour éliminer soigneusement le sel résiduel dans le tuyau et la sonde.
Les échantillons de sang normaux apparaissaient rouge vif tandis que des caillots sanguins potentiels ont été observés dans des échantillons hypoxiques. Les échantillons obtenus par la technique de microdialyse sanguine étaient incolores, clairs et transparents. Pour éviter la destruction de la membrane et le glissement ou le déplacement de la sonde, nous devons faire attention lorsque nous plaçons et immergeons la sonde dans la veine jugulaire du rat.
Les échantillons de sang obtenus grâce à la technique de microdialyse peuvent être utilisés pour analyser les biomarqueurs de différentes maladies et la distribution sanguine de médicaments et de métabolites rares.
