Hybridation Réaction en chaîne ARN Fluorescence intégrale Hybridation in situ de gènes chimiosensoriels dans les appendices olfactifs des moustiques

Notre groupe s’intéresse au système chimio-sensoriel des moustiques. Nous espérons qu’en ciblant le goût et l’odorat d’un moustique, nous pourrons l’empêcher de nous trouver et de nous piquer. L’hybridation in situ par réaction en chaîne fluorescente est un développement récent.

Cette technologie est très sensible, robuste et capable de multiplexer plusieurs cibles de gènes afin que nous puissions visualiser l’expression et la localisation de ces gènes simultanément dans leur environnement d’origine. La transcriptomique spéciale est une méthode de pointe utilisée dans le domaine de la biologie spatiale. Cette technologie est capable de multiplexer plusieurs milliers de gènes, et vous pouvez visualiser l’expression de ces gènes simultanément.

Notre protocole nous permet de visualiser directement quels neurones de l’antenne expriment l’un des quelque 50 récepteurs ionotropiques possibles. Cela nous fournit une feuille de route fondamentale pour guider notre compréhension de la façon dont ces récepteurs de facteurs classiques pourraient médier les comportements. Les neurones olfactifs dans les organes olfactifs d’un insecte, comme l’antenne, sont généralement enfouis à l’intérieur d’une coquille chitineuse protectrice.

Cela rend la visualisation de l’expression des récepteurs olfactifs dans ces neurones très difficile. Notre protocole utilise une combinaison de traitements à la chitinase et de protocoles de fluorescence et de transparence de pointe pour surmonter ces défis.